Adamtsl3作为腹主动脉瘤诊治标志物的应用制造技术

本发明专利技术公开了Adamtsl3作为腹主动脉瘤诊治标志物的应用，同时还公开了用于检测Adamtsl3的试剂、试剂盒。另外，本发明专利技术还公开了用于治疗腹主动脉瘤的方法和药物，上述研究成果为临床治疗腹主动脉瘤提供了新的策略和思路。

Adamtsl 3 as a diagnostic and therapeutic marker of abdominal aortic aneurysm

【技术实现步骤摘要】
Adamtsl3作为腹主动脉瘤诊治标志物的应用
本专利技术涉及生物医药领域，具体地，涉及Adamtsl3作为腹主动脉瘤诊治标志物的应用。
技术介绍
腹主动脉瘤(abdominalaorticaneurysm，AAA)为一种常见的慢性主动脉退行性疾病，常见于60岁以上的老年男性人群。目前，腹主动脉瘤在60岁以上老年男性人群中患病率为5％-10％。腹主动脉瘤发病率随着年龄的增长而逐渐上升，瘤体最大直径逐渐增大，发生破裂风险亦逐渐增高。腹主动脉瘤不断进展，晚期可以并发破裂出血，急诊死亡率高达90％。因此，腹主动脉瘤有高发病率，高致死率的特点，严重威胁中老年人群健康。目前，腹主动脉瘤的治疗目的在于降低其破裂出血的风险，动脉瘤切除+人工血管置换术以及腹主动脉瘤腔内隔绝术(EVAR)为最常采用的治疗方案。手术治疗(动脉瘤切除+人工血管置换术)创伤较大，并发症较多，EVAR治疗方案花费高昂且对动脉瘤形态、部位等解剖条件要求较高。因此，对于瘤体最大直径在5.0cm以上的腹主动脉瘤，因其破裂风险较高，指南推荐进行手术或EVAR干预；对于最大直径小于5.0cm的小腹主动脉瘤，其破裂风险较小，推荐进行以随访观察为基础的保守治疗方案。但是，在随访观察期间，超过40％的小腹主动脉瘤患者(最大直径小于5.0cm)在3年内因发生瘤体快速增大或者出现先兆破裂征象而需要行手术治疗或腔内修复进行干预。目前，尚无明确药物能够延缓小腹主动脉瘤的进展。因此，明确腹主动脉瘤的发生发展的机制，根据相关作用机制寻找合适靶点以及药物干预控制腹主动脉瘤进展，具有极其重大的临床意义。
技术实现思路
根据本专利技术一个方面，本专利技术提供了检测Adamtsl3的产品在制备诊断腹主动脉瘤的工具中的应用。进一步，所述检测Adamtsl3的产品包括检测样品中Adamtsl3基因表达量的产品。更进一步，所述检测Adamtsl3的产品包括能够定量样品中Adamtsl3基因mRNA的产品，和/或能够定量样品中Adamtsl3蛋白的产品。本专利技术的定量样品中Adamtsl3基因mRNA的产品可基于使用核酸分子的已知方法来发挥其功能：如PCR、如Southern杂交、Northern杂交、点杂交、荧光原位杂交(FISH)、DNA微阵列、ASO法、高通量测序平台等。使用该产品可以定性地、定量地、或半定量地实施分析。包含在上述产品中的核酸可以通过化学合成来获得，或通过从生物材料制备含有期望核酸的基因，然后使用设计用于扩增期望核酸的引物扩增它来获得。进一步，所述PCR方法为已知方法，例如，ARMS(AmplificationRefractoryMutationSystem，扩增不应突变系统)法、RT-PCR(逆转录酶-PCR)法、嵌套PCR法等等。扩增的核酸可以通过使用点印迹杂交法、表面等离子共振法(SPR法)、PCR-RFLP法、原位RT-PCR法、PCR-SSO(序列特异性寡核苷酸)法、PCR-SSP法、AMPFLP(可扩增片段长度多态性)法、MVR-PCR法、和PCR-SSCP(单链构象多态性)法来检测。所述能够定量样品中Adamtsl3基因mRNA的产品包括实时定量PCR中使用的特异扩增Adamtsl3基因的引物。产品中包括的引物可以通过化学合成来制备，通过使用本领域技术人员知道的方法参考已知信息来适当地设计，并通过化学合成来制备。如本文使用的，术语“引物”是指具有短的游离3′-末端羟基的核酸序列，其是短的核酸序列，可以与互补模板形成碱基对并用作模板链复制的起始点。在合适的缓冲液在合适的温度在存在用于聚合的试剂(例如，DNA聚合酶或反转录酶)和四种三磷酸核苷的情况下，引物可以起始DNA合成。PCR条件和有义和反义引物的长度可以根据本领域中已知技术适当选择。上面所述的核酸还可包括探针，所述探针可以通过化学合成来制备，通过使用本领域技术人员知道的方法参考已知信息来恰当设计，并通过化学合成来制备，或者可以通过从生物材料制备含有期望核酸序列的基因，并使用设计用于扩增期望核酸序列的引物扩增它来制备。在本文使用的术语“基因”指编码功能蛋白质、多肽或者肽的单元。如本领域的技术人员所理解的，这一功能性的术语包括两个基因组序列、cDNA序列或者其片段或组合，以及基因的产物，包括可以经人工改变的那些。经纯化的基因、核酸、蛋白质等等用于指从至少一种通常与其相关的污染核酸或者蛋白质中鉴定并分离出来的这些实体。术语“等位基因”或者“等位基因形式”指编码同样的功能性蛋白的基因的可选择的形式，但是含有与同一基因的其他形式相关的核苷酸序列上的差异。如本文所使用的，“核酸”或者“核酸分子”指多核苷酸，如脱氧核糖核酸(DNA)或者核糖核酸(RNA)、寡核苷酸、由聚合酶链式反应(PCR)所产生的片段以及通过任意的连接、剪切、核酸内切酶和核酸外切酶活动产生的片段。核酸分子可以由天然产生的核苷酸的单体组成(例如DNA和RNA)，或者由天然产生的核苷酸的类似物组成(例如天然产生的核苷酸的α-对映体形式)，或者两者的组合组成。经修饰的核苷酸可以在糖部分和/或在嘧啶或者嘌呤碱基部分上有改变。糖的修饰包括，例如将一个或者多个羟基以卤素、烷基、胺和叠氮基团替代，或者可以将糖功能化成为醚或者酯。除此之外，整个的糖部分可以用空间上和电子上类似的结构替换，如阿扎糖以及碳环的糖类似物。在碱基部分上修饰的实例包括烷基化的嘌呤和嘧啶、酰化的嘌呤和嘧啶或者其他公知的杂环替代物。核酸单体可以通过磷酸二酯键或者该连接的类似物进行连接。磷酸二酯键的类似物包括硫代磷酸酯、二硫代磷酸酯、硒代磷酸酯(phosphoroselenoate)、二硒代磷酸酯(phosphorodiselenoate)、phosphoroanilothioate、phosphoranilidate、氨基磷酸酯等等。术语“核酸分子”还包括所谓的“肽核酸”，其包括连接到聚酰胺骨架上的天然产生的或者经修饰的核酸碱基。核酸可以是单链的或者双链的。本专利技术的定量样品中Adamtsl3蛋白通过抗原-抗体反应测量。更特别是，抗原-抗体反应可以根据本领域已知的定量或定性免疫测定方案进行。免疫测定形式可以包括，但不限于，酶联免疫吸附测定(ELISA)、放射性免疫测定(RIA)、夹心测定、蛋白质印迹、免疫沉淀、免疫组织化学染色、流式细胞术、荧光辅助的细胞分选(FACS)、酶底物显色测定和抗原-抗体聚集。本专利技术的定量样品中Adamtsl3蛋白的产品包括特异性结合Adamtsl3蛋白的抗体或其片段。可以使用任何结构、尺寸、免疫球蛋白类别、起源等的抗体或其片段，只要它结合靶蛋白质即可。本专利技术的检测产品中包括的抗体或其片段可以是单克隆的或多克隆的。抗体片段指保留抗体对抗原的结合活性的抗体一部分(部分片段)或含有抗体一部分的肽。抗体片段可以包括F(ab′)2、Fab′、Fab、单链Fv(scFv)、二硫化物键合的Fv(dsFv)或其聚合物、二聚化V区(双抗体)、或含有CDR的肽。本专利技术的定量样品中Adamtsl3蛋白的产品可以包括编本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.检测Adamtsl3的产品在制备诊断腹主动脉瘤的工具中的应用。/n

【技术特征摘要】
1.检测Adamtsl3的产品在制备诊断腹主动脉瘤的工具中的应用。


2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述检测Adamtsl3的产品包括检测样品中Adamtsl3基因表达量的产品。


3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述检测Adamtsl3的产品包括能够定量样品中Adamtsl3基因mRNA的产品，和/或能够定量样品中Adamtsl3蛋白的产品。


4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述能够定量样品中Adamtsl3基因mRNA的试剂包括特异扩增Adamtsl3基因的引物；所述能够定量样品中Adamtsl3蛋白的试剂包括特异性结合Adamtsl3蛋白的抗...

【专利技术属性】
技术研发人员：张慧，李方达，陈思良，杨丹，郑月宏，
申请(专利权)人：中国医学科学院北京协和医院，
类型：发明
国别省市：北京;11