一种血浆中异橙黄酮含量的检测方法技术

本发明专利技术提供了一种血浆中异橙黄酮含量的检测方法，属于药物分析领域。本发明专利技术建立了一种基于沉淀法和液质联用技术的血浆中异橙黄酮检测方法，可用于检测生物体内的异橙黄酮浓度，为临床和基础研究提供可靠的分析手段，本发明专利技术使用蛋白质沉淀法处理含异橙黄酮的血浆样品，通过一步沉淀反应去除杂质和内源性干扰物，在高效液相色谱的分离过程中，向流动相中加入了一定的甲酸，使异橙黄酮在电离后形成更多的加氢的准分子离子峰，对应的特征性碎片离子的丰度随之升高，提高了检测得灵敏度；在定量的过程中，以石吊兰素为内标物，通过准分子离子峰→子离子的特异性的、高灵敏度的监测实现对异橙黄酮的定量检测。

A method for the determination of isoflavone in plasma

【技术实现步骤摘要】
一种血浆中异橙黄酮含量的检测方法
本专利技术涉及药物分析
，尤其涉及一种血浆中异橙黄酮含量的检测方法。
技术介绍
异橙黄酮是一种多甲氧基黄酮，广泛存在于多种柑橘类植物中，具有多种生物活性。分子式为C20H20O7，分子量为372.1。异橙黄酮具有多种药理活性，包括抗肿瘤、抗增殖和抗氧化作用。此外，异橙黄酮与其他药物之间还可能存在药物相互作用，同时服用时能够提高一些药物的血浆药物浓度。对于以异橙黄酮为代表的多甲氧基黄酮的研究正日益增多，测定其在生物体内的血浆药物浓度对于评价药物疗效和分析药理作用等方面具有很重要的作用。据研究报道，液相色谱、紫外光谱、核磁和液质联用等手段已经用于柑橘提取物中异橙黄酮的检测，但这些方法无法定量检测生物样本中的异橙黄酮。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种血浆中异橙黄酮含量的检测方法。本专利技术提基于沉淀法和液质联用技术进行血浆中异橙黄酮检测，可用于检测生物体内的异橙黄酮浓度，提供了一种快速、准确、稳定的检测方法。为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种血浆中异橙黄酮含量的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：/n将含异橙黄酮的血浆、石吊兰素的甲醇溶液以及乙腈混合进行沉淀反应，将所得上清液进行液质联用检测，用内标法以标准曲线计算血浆中异橙黄酮的含量，所述标准曲线以异橙黄酮的浓度为横坐标，以异橙黄酮和石吊兰素的峰面积比值为纵坐标；/n所述液质联用检测的高效液相色谱条件包括：色谱柱为安捷伦ZORBAX Eclipse PlusC18 RRHD色谱柱，采用梯度洗脱，流动相A为含0.1vol％甲酸的水溶液，流动相B为乙腈，洗脱程序为0～0.5分钟，流动相B的体积百分含量从95％下降到5％；0.5～1.5分钟，流动相B的体积百分含量保持为95％；...

【技术特征摘要】
1.一种血浆中异橙黄酮含量的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
将含异橙黄酮的血浆、石吊兰素的甲醇溶液以及乙腈混合进行沉淀反应，将所得上清液进行液质联用检测，用内标法以标准曲线计算血浆中异橙黄酮的含量，所述标准曲线以异橙黄酮的浓度为横坐标，以异橙黄酮和石吊兰素的峰面积比值为纵坐标；
所述液质联用检测的高效液相色谱条件包括：色谱柱为安捷伦ZORBAXEclipsePlusC18RRHD色谱柱，采用梯度洗脱，流动相A为含0.1vol％甲酸的水溶液，流动相B为乙腈，洗脱程序为0～0.5分钟，流动相B的体积百分含量从95％下降到5％；0.5～1.5分钟，流动相B的体积百分含量保持为95％；1.5～1.6分钟，流动相B的体积百分含量从5％上升到95％；1.6～3.5分钟，流动相B的体积百分含量保持为95％，流速为0.6mL/min，柱温为20℃，进样量为2μL；
所述液质联用检测的质谱条件包括：使用三重四级杆质谱仪，离子源为电喷雾离子源，采用正离子模式，采用多反应监测扫描模式，所述异橙黄酮的离子对为373.1→343.1和373.1→153.1，所述离子对373.1→343.1为定量离子对，所述离子对373.1→153.1为定性离子对，所述石吊兰素的离子对为345.1→315.1，所述异橙黄酮的碰撞能量为29eV，所述石吊兰素的...

【专利技术属性】
技术研发人员：叶炜剑，牛超，孙佳，陈根，黄晓忠，
申请(专利权)人：温州医科大学附属第二医院，温州医科大学附属育英儿童医院，
类型：发明
国别省市：浙江;33