基于杂交链式反应的荧光DNA传感器及E542K基因检测方法技术

本发明专利技术涉及一种基于杂交链式反应的荧光DNA传感器及E542K基因检测方法。本发明专利技术所提供的基于杂交链式反应的荧光DNA传感器，包括引发链、第一发夹探针及第二发夹探针，所述第一发夹探针的两端分别标记有荧光基团及相应的荧光猝灭基团，所述第二发夹探针的两端分别标记有荧光基团及相应的荧光猝灭基团，所述引发链为E542K基因，所述引发链可与所述第一发夹探针结合，打开所述第一发夹探针的发夹结构，使所述第一发夹探针与所述第二发夹探针结合，激活杂交链式反应，形成长双链DNA，使所述长双链DNA荧光增强，从而定量检测所述E542K基因。该基于杂交链式反应的荧光DNA传感器，提高了E542K基因检测的灵敏度与选择性，具有简单、快速、高效的优势。

Fluorescent DNA sensor and e542k gene detection method based on hybrid chain reaction

【技术实现步骤摘要】
基于杂交链式反应的荧光DNA传感器及E542K基因检测方法
本专利技术涉及化学与生物传感
，特别是涉及基于杂交链式反应的荧光DNA传感器及E542K基因检测方法。
技术介绍
循环肿瘤DNA是一类重要的肿瘤标志物，能够实时反映肿瘤的动态变化，因此在多种肿瘤的早期诊断、实时监控、预后评估等方面体现出重要的临床价值。PIK3CA基因是一种重要的循环肿瘤DNA，可以编码蛋白质，调控细胞增殖、分化等一系列细胞活动，其中，E542K基因是野生型PIK3CA基因热点突变区域的一种突变型基因，在乳腺癌、结肠癌和肺癌中均有该基因的突变，可作为肿瘤标志物用于临床上的辅助诊断。循环肿瘤DNA的检测方法主要有数字PCR、BEAMing及NGS等，但是这些方法具有操作复杂、价格昂贵、耗时耗力、实验条件苛刻等缺点。近年来，随着检测技术的不断提高，循环肿瘤DNA的检测出现了电化学检测、表面增强拉曼散射检测等方法，但这些方法都存在检测信号不稳定的问题，使得这些方法在实际应用中受到制约。
技术实现思路
基于此，为了克服上述问题，提供一种基于杂交本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基于杂交链式反应的荧光DNA传感器，其特征在于，包括引发链、第一发夹探针及第二发夹探针，所述第一发夹探针的两端分别标记有荧光基团及相应的荧光猝灭基团，所述第二发夹探针的两端分别标记有荧光基团及相应的荧光猝灭基团，所述引发链为E542K基因，所述引发链可与所述第一发夹探针结合，打开所述第一发夹探针的发夹结构，使所述第一发夹探针与所述第二发夹探针结合，激活杂交链式反应，形成长双链DNA，使所述长双链DNA荧光增强，从而定量检测所述E542K基因。/n

【技术特征摘要】
1.一种基于杂交链式反应的荧光DNA传感器，其特征在于，包括引发链、第一发夹探针及第二发夹探针，所述第一发夹探针的两端分别标记有荧光基团及相应的荧光猝灭基团，所述第二发夹探针的两端分别标记有荧光基团及相应的荧光猝灭基团，所述引发链为E542K基因，所述引发链可与所述第一发夹探针结合，打开所述第一发夹探针的发夹结构，使所述第一发夹探针与所述第二发夹探针结合，激活杂交链式反应，形成长双链DNA，使所述长双链DNA荧光增强，从而定量检测所述E542K基因。


2.根据权利要求1所述的基于杂交链式反应的荧光DNA传感器，其特征在于，所述荧光基团为6-羧基荧光素，所述荧光猝灭基团为黑洞猝灭基团。


3.根据权利要求1所述的基于杂交链式反应的荧光DNA传感器，其特征在于，所述第一发夹探针包括特异性识别E542K基因的碱基序列，所述第一发夹探针的碱基序列为5’-BHQ1-AAAATCACTAAGCAGGCAAAGTCCTGCTTAGTGATTTTAGAGAG-FAM-3’。


4.根据权利要求1所述的基于杂交链式反应的荧光DNA传感器，其特征在于，所述第二发夹探针包括与所述第一发夹探针互补的碱基序列，所述第二发夹探针的碱基序列为5’-FAM-ACTTTGCCTGCTTAGTGATTTTCTCTCTAAAATCACTAAGCAGG-BHQ1-3’。


5.一种如权利要求1所述的基于杂交链式反应的荧光DNA传感器的E542K基因检测...

【专利技术属性】
技术研发人员：白云峰，张慧琳，赵璐，李婉宁，冯锋，翟红，刘海燕，李江，
申请(专利权)人：山西大同大学，
类型：发明
国别省市：山西;14