提高微生物转化生成乳糖酸的方法技术

本发明专利技术属于生物技术领域，公开了提高微生物转化生成乳糖酸的方法，其包括如下步骤：步骤1）一次发酵：将荧光假单胞菌种子液接种于含有发酵培养基的发酵罐中进行发酵培养20‑24h，然后添加促进培养基；继续发酵24‑36h，停止发酵，得到发酵液；步骤2）二次发酵：将一次发酵的发酵液进行陶瓷膜过滤，收集滤液和湿菌体，将湿菌体打回发酵罐，然后添加二次发酵培养基，继续发酵培养10‑14h，停止发酵，将二次发酵液进行过滤，收集滤液；合并两次滤液用于后续分离提取乳糖酸。本发明专利技术对废弃的湿菌体进行了二次利用，变废为宝，提高了乳糖酸的产率。

Methods of improving microbial transformation to produce lactose acid

【技术实现步骤摘要】
提高微生物转化生成乳糖酸的方法
本专利技术属于生物
，具体涉及提高微生物转化生成乳糖酸的方法。
技术介绍
乳糖酸是一种重要的药物中间体，广泛已应用于医药制备
目前，合成乳糖酸的方法主要包括化学法、酶法以及生物法。市场应用的乳糖酸主要由化学法制得，高耗能且需要昂贵的金属催化剂。化学法所用到的化学试剂是一些有毒的且昂贵的试剂；在反应过程中还会有副产物产生；利用金属催化合成乳糖酸，金属催化剂容易钝化；化学法对pH和温度的稳定的要求相对严格，还容易产生大量的副产物，造成环境污染。酶法合成乳糖酸相对于化学法具产物相对单一、产物易于分离和条件温和等优点，但是用于生物催化的酶需要生产和进一步纯化，而这些步骤成本较高，费时费力。乳糖酸的生物合成法是一种可行的方法，这种方法可以克服化学法和酶法合成乳糖酸的缺陷，绿色环保，而且能耗低，可持续发展性强。中国专利技术“CN101988046A”公开了一种利用荧光假单胞菌生产乳糖酸的方法，该方法以乳糖为转化底物，添加氮源和无机盐作为发酵培养基，在最优选的条件下，转化率可达到90%，但是该发酵过程时间本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.提高微生物转化生成乳糖酸的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：/n步骤1）一次发酵：将荧光假单胞菌活化，然后接种到种子培养基上进行培养，得到荧光假单胞菌种子液，将荧光假单胞菌种子液按照5-10％的接种量接种于含有发酵培养基的发酵罐中进行发酵培养20-24h，然后添加促进培养基；继续发酵24-36h，停止发酵，得到发酵液；整个发酵过程中，通过流加氨水控制pH为6.0-6.2；/n步骤2）二次发酵：将一次发酵的发酵液进行陶瓷膜过滤，收集滤液和湿菌体，将湿菌体打回发酵罐，然后添加二次发酵培养基，继续发酵培养10-14h，停止发酵，将二次发酵液进行过滤，收集滤液；合并两次滤液用于分离提取乳糖酸...

【技术特征摘要】
1.提高微生物转化生成乳糖酸的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：
步骤1）一次发酵：将荧光假单胞菌活化，然后接种到种子培养基上进行培养，得到荧光假单胞菌种子液，将荧光假单胞菌种子液按照5-10％的接种量接种于含有发酵培养基的发酵罐中进行发酵培养20-24h，然后添加促进培养基；继续发酵24-36h，停止发酵，得到发酵液；整个发酵过程中，通过流加氨水控制pH为6.0-6.2；
步骤2）二次发酵：将一次发酵的发酵液进行陶瓷膜过滤，收集滤液和湿菌体，将湿菌体打回发酵罐，然后添加二次发酵培养基，继续发酵培养10-14h，停止发酵，将二次发酵液进行过滤，收集滤液；合并两次滤液用于分离提取乳糖酸。


2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述促进培养基的制备方法为：将木质素和氯化钠按照1:50-100的质量比混匀制得。


3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述种子培养基为：按照重量百分比，5%乳糖、2%葡萄糖、1%蛋白胨、0.2%氯化钾、0.1%七水硫酸镁，余量为无菌水。


4.根据权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘加林，霍萧勇，刘加海，方朝杰，张渊源，
申请(专利权)人：杭州巴洛特生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江;33