一种脐带血CIK细胞的培养方法技术

本发明专利技术提供一种脐带血CIK细胞的培养方法，包括：将脐带血核细胞悬浮液加入纤维连接蛋白包被的培养容器中培养，并加入IFN‑γ、IL‑2、IL‑1a、抗CD3单克隆抗体，继续培养，得到所述CIK细胞。本发明专利技术成功获得增值性更高，双阳性细胞百分比和杀伤活性更强的脐带血CIK，是一种值得临床推荐且可大量扩增脐带血CIK的培养方法。

A culture method of CIK cells in cord blood

【技术实现步骤摘要】
一种脐带血CIK细胞的培养方法
本专利技术涉及细胞培养
，特别是涉及一种脐带血CIK细胞的培养方法。
技术介绍
细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokineinducedkillercells,CIK)是介导细胞毒活性最强的免疫效应细胞，兼具有T淋巴细胞的高度杀瘤活性和NK细胞(naturalkillercell，自然杀伤细胞)非主要组织相容性复合物(MHC)的限制性杀瘤效应。CIK细胞同时表达CD3和CD56两种膜蛋白分子，具有增殖速度快，杀瘤活性高，杀瘤谱广等优点，被认为是肿瘤过继免疫治疗的新希望。现有技术中的CIK细胞制备方法大多采用病人的外周血单个核细胞，先加入IFN-γ，24小时后再加入其他细胞因子如IL-2、IL-Ia、CD3单抗，继续培养，这种方法制备出的CIK细胞存在繁殖能力差、细胞活性低，肿瘤杀伤性差等问题，且因异体CIK细胞输注易引发严重的移植物抗宿主病(GVHD)。随着脐血的广泛应用，脐血已成为获得CIK(cordbloodCRX℃B-CHK)细胞的一个重要来源，且脐血CIK细胞作用更强，移植后GVHD发生率亦低本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种脐带血CIK细胞的培养方法，其特征在于，将脐带血核细胞悬浮液加入纤维连接蛋白包被的培养容器中培养，并加入IFN-γ、IL-2、IL-1a、抗CD3单克隆抗体，继续培养，得到所述CIK细胞。/n

【技术特征摘要】
1.一种脐带血CIK细胞的培养方法，其特征在于，将脐带血核细胞悬浮液加入纤维连接蛋白包被的培养容器中培养，并加入IFN-γ、IL-2、IL-1a、抗CD3单克隆抗体，继续培养，得到所述CIK细胞。


2.根据权利要求1所述的培养方法，其特征在于：所述IFN-γ是在所述脐带血核细胞加入所述包被有纤维连接蛋白的培养容器后30min内加入。


3.根据权利要求1所述的培养方法，其特征在于：所述IL-2、IL-1a、抗CD3单克隆抗体是在所述脐带血核细胞加入所述包被有纤维连接蛋白的培养容器后的第24～26h加入。


4.根据权利要求3所述的培养方法，其特征在于：在所述脐带血核细胞加入所述包被有纤维连接蛋白的培养容器后的第24～26h还加入IL-15。


5.根据权利要求4所述的培养方法，其特征在于：所述IL-15添加后在培养体系中的终浓度为10-30ng/mL。


6.根据权利要求1所述的培养方法，其特征在于：所述纤维连接蛋白选自RetroNectin；
和/或，采用所述纤维...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙丹，唐忆琳，陈巧林，
申请(专利权)人：中科细胞科技广州有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44