一类糖苷生物碱及其制备方法与用途技术

本发明专利技术公开了一类糖苷生物碱及其制备方法与用途，具体为四种不同结构的半乳糖苷，包含本发明专利技术上述化合物的药物组合物对S180肉瘤、艾氏腹水瘤、Lewis肺癌移植瘤、小鼠肝癌细胞H22移植瘤、人肺癌腺细胞A549裸鼠移植瘤、人肺鳞癌细胞NCI‑H520裸鼠移植瘤、人大细胞肺癌NCI‑H460裸鼠移植瘤等多种肿瘤均具有很好的抑制和治疗作用。

A kind of glycoside alkaloid and its preparation and Application

【技术实现步骤摘要】
一类糖苷生物碱及其制备方法与用途
本专利技术涉及医药制备
，特别涉及一类糖苷生物碱及其制备方法与用途。
技术介绍
糖苷生物碱主要分布在茄科及百合科的植物体内，由疏水性的苷元和亲水性的寡糖链构成，其苷元包括螺旋甾碱烷、茄次碱烷和其他甾体衍生物三种，寡糖链由3～4个单糖组成，是一种甾体皂苷。植物合成糖苷生物碱主要是为了防御微生物、动物及昆虫的侵袭，因此，糖苷生物碱具有一定的毒性，但与此同时，它还具有降低胆固醇和高血压、消炎、活血镇痛、抗过敏、增强机体免疫力、抗病原微生物等多种生理活性，具有潜在的药用价值。茄科和百合科的植物在自然界中广泛存在，如白英、马铃薯和番茄等植物，具有很强的经济价值，中药白英始载于《神农百草经》，其味甘，性寒，具有清热、解毒、祛风、化瘀等功效，研究表明白英的主要化学成分为糖苷生物碱，因此，研究从中药白英中提取新型的糖苷生物碱具有重要意义。鉴于糖苷生物碱的上述药物功效，医药界对其非常重视，中国专利文献CN102319319A公开了一种白英提取物以及包括其的抗癌药物，该提取物通过以下步骤制得：乙醇提取白英药材，将白英药材在乙醇中回流提取，回收溶剂蒸发至干，得乙醇提取物；精制：将上述乙醇提取物用水形成溶液，用弱酸性阳离子交换大孔树脂柱吸附，依次用乙醇和盐酸乙醇洗脱，收集盐酸乙醇洗脱液，用氨水中和至中性，脱盐制得白英提取物，其中，白英提取物包括1％～60％的甾体生物碱，通过实验证明了该提取物对S180肉瘤、艾氏腹水瘤、Lewis肺癌移植瘤、小鼠肝癌细胞H22移植瘤均具有很好的抗肿瘤作用。>中国专利文献CN106928309A、CN106939031A、CN106928309B公开了三种提取自白英的糖苷生物碱及其制备方法与用途。但是其可分离提取出的糖苷生物碱种类有限，结构复杂，作用效果单一，并且提取过程能耗高污染重，严重限制其发展，因此如何提供一种可提取更多种糖苷生物碱以使其具有更佳的作用效果以及工艺简便节能环保的糖苷生物碱的制备方法并明确其用途，是本领域技术人员亟待解决的问题。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术提供了一种节能环保高效的糖苷生物碱的制备方法，改进工艺使其提取出更多种类的糖苷生物碱，并且明确其用途。为了达到上述目的，本专利技术采用如下技术方案：首先本专利技术提供了四种新的化合物结构，一种糖苷生物碱，分子式：C45H75NO17；分子量：901，命名为(3β,5α,20S,22S,23R,25S)-16,22-环氧-23,26-环亚胺-胆甾醇-3-基氧-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→2)-氧-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-β-D-吡喃半乳糖苷，以下称化合物1，具有以下结构式：一种糖苷生物碱，分子式：C45H73NO17；分子量：899，命名为(3β,20S,22S,23R,25S)-16,22-环氧-23,26-环亚胺-胆甾醇-5-烯基-3-基氧-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→2)-氧-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-β-D-吡喃半乳糖苷，以下称化合物2，具有以下结构式：一种糖苷生物碱，分子式：C45H73NO17；分子量：893，命名为(3β,25R)-16,23-环氧-23,24-环亚胺-胆甾醇-5,16,20,23(N)-四烯-3β-醇-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→6)-β-D-吡喃半乳糖苷，以下称化合物3，具有以下结构式：一种糖苷生物碱，分子式：C45H67NO17；分子量：893，命名为16,23-环氧-22,26-环亚胺-胆甾醇-5,22(N),23,25-四烯-3β-醇-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→6)-β-D-吡喃半乳糖苷，以下称化合物4，具有如下结构式：其次本专利技术提供了上述四种化合物的制备方法，包括以下步骤：(1)将白英干燥全草用体积浓度为70％的乙醇水溶液回流提取，过滤，将滤液浓缩至50℃相对密度为1.05的浸膏，加入蒸馏水分散，过滤，取滤液加至D151大孔吸附树脂柱，依次用2～4倍柱体积的蒸馏水和2～4倍柱体积的体积浓度95％乙醇水溶液洗脱，弃去洗脱液，然后用3～5倍柱体积的体积浓度为6‰的盐酸乙醇水溶液洗脱，所述盐酸乙醇水溶液中乙醇的体积浓度为95％，收集盐酸乙醇洗脱液，用氨水中和至中性，过滤，将滤液浓缩至干，用蒸馏水分散，将分散后的药液加至AB-8大孔吸附树脂，用6～10倍柱体积的蒸馏水洗脱，弃去洗脱液，然后用3～5倍柱体积的体积浓度为95％乙醇水溶液洗脱，收集乙醇洗脱液，浓缩干燥，即得白英总碱，备用；(2)将所述步骤(1)制备得到的白英总碱样品加入至体积浓度60％的醇溶液中加热至90℃溶解，然后加入薄层层析硅胶混合均匀，之后经正相硅胶柱层析进行分离，以体积比为(3～0):1的乙酸乙酯和乙醇水溶液形成的洗脱剂进行梯度洗脱，所述乙醇水溶液的体积浓度为93％～97％，以盐酸水溶液改良的碘化铋钾试液为显色剂，以薄层色谱进行检测，合并相同流份；(3)将所述步骤(2)得到的不同组分分别以0.45um滤膜过滤，然后采用高效液相色谱法进行分离纯化，收集不同保留时间的洗脱液，获得糖苷生物碱类化合物1～4。其中，步骤(2)称取45～55重量份的白英总碱样品，加入至400～600体积份的体积浓度60％的乙醇水溶液中加热至80～100℃，然后加入10～20重量份薄层层析硅胶混合均匀，上样于700-900重量份的薄层层析硅胶的硅胶层析柱层析分离(所述重量份与体积份的关系为g/mL)。步骤(2)中所述盐酸水溶液改良碘化铋钾试液的制备方法为：称取碱式硝酸铋0.8～0.9重量份，依次加入9～11体积份的冰醋酸、39～41体积份的水和19～21体积份的碘化钾溶液，混合均匀即得碘化铋钾试液；向所述碘化铋钾试液中加入0.6mol/L的盐酸水溶液，所述碘化铋钾试液与所述盐酸水溶液的体积比为1:2，即得所述盐酸水溶液改良的碘化铋钾试液(所述重量份与体积份的关系为g/mL)。步骤(3)中液相色谱流动相为乙腈/水/酸系统，所述酸为0.05％的三氟乙酸(TFA)，乙腈/水混合比例为5:95-95:5。优选的，步骤(3)中高效液相色谱法进行分离纯化过程色谱条件如下：C18液相色谱柱，10u250*10mm；以含0.05％TFA的乙腈为流动相A，含0.05％TFA的水为流动相B，按照如下程序进行梯度洗脱：0～60min，流动相A：流动相B的体积比为5％：95％→95％～5％；控制流动相流速为2mL/min；控制柱温为25℃。本专利技术还提供了一种如上技术方案所述的糖苷生物碱及其药学上可接受的盐或载体。本专利技术还提供了一种制剂，包括权利要求1-4所述的糖苷生物碱的制剂，或者包括采用权利要求5-6任一项所述的糖苷生物碱的制备方法制备的糖苷生物碱的制剂，或者包括所述权利要求7所述的糖苷生物碱及其药学上可接受的盐或载体的制剂，以糖苷生物碱为有效成分，加入常规辅料，按常规工艺制成临床上可接受的制剂。<本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种糖苷生物碱，其特征在于，命名为(3β,5α,20S,22S,23R,25S)-16,22-环氧-23,26-环亚胺-胆甾醇-3-基氧-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→2)-氧-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-β-D-吡喃半乳糖苷，以下称化合物1，具有以下结构式：/n

【技术特征摘要】
1.一种糖苷生物碱，其特征在于，命名为(3β,5α,20S,22S,23R,25S)-16,22-环氧-23,26-环亚胺-胆甾醇-3-基氧-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→2)-氧-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-β-D-吡喃半乳糖苷，以下称化合物1，具有以下结构式：

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2.一种糖苷生物碱，其特征在于，命名为(3β,20S,22S,23R,25S)-16,22-环氧-23,26-环亚胺-胆甾醇-5-烯基-3-基氧-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→2)-氧-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-β-D-吡喃半乳糖苷，以下称化合物2，具有以下结构式：

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3.一种糖苷生物碱，其特征在于，命名为(3β,25R)-16,23-环氧-23,24-环亚胺-胆甾醇-5,16,20,23(N)-四烯-3β-醇-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→6)-β-D-吡喃半乳糖苷，以下称化合物3，具有以下结构式：

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4.一种糖苷生物碱，其特征在于，命名为16,23-环氧-22,26-环亚胺-胆甾醇-5,22(N),23,25-四烯-3β-醇-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→6)-β-D-吡喃半乳糖苷，以下称化合物4，具有如下结构式：

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5.一种权利要求1-4所述的糖苷生物碱的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)将白英干燥全草用体积浓度为70％的乙醇水溶液回流提取，过滤，将滤液浓缩至50℃相对密度为1.05的浸膏，加入蒸馏水分散，过滤，取滤液加至D151大孔吸附树脂柱，依次用2～4倍柱体积的蒸馏水和2～4倍柱体积的体积浓度95％乙醇水溶液洗脱，弃去洗脱液，然后用3～5倍柱体积的体积浓度为6‰的盐酸乙醇水溶液洗脱，所述盐酸乙醇水溶液中乙醇的体积浓度为95％，收集盐酸乙醇洗脱液，用氨水中和至中性，过滤，将滤液浓缩至干，用蒸馏水分散，将分散后的药液加至AB-8大孔吸附树脂，用6～10倍柱体积的蒸馏水洗脱，弃去洗脱液，然后用3～5倍柱体积的体积浓度为95％乙...

【专利技术属性】
技术研发人员：王建农，杜肖，
申请(专利权)人：中国中医科学院西苑医院，
类型：发明
国别省市：北京;11