一种钙调蛋白磷酸酶抑制剂及其在抗肿瘤中应用制造技术

本发明专利技术涉及一种钙调蛋白磷酸酶抑制剂及其在抗肿瘤中应用，具体的涉及钙调蛋白磷酸酶抑制剂YDIS及其在制备调控肿瘤细胞周期药物和诱导肿瘤细胞凋亡药物中的应用。发明专利技术人在细胞和动物两个水平探索了YDIS的抗肿瘤效果，深入探究YDIS的抗肿瘤机制，为其临床应用奠定基础。

A calmodulin phosphatase inhibitor and its application in antitumor

【技术实现步骤摘要】
一种钙调蛋白磷酸酶抑制剂及其在抗肿瘤中应用
本专利技术涉及抗肿瘤药物，具体涉及一种新型钙调蛋白磷酸酶抑制剂及其在抗肿瘤中应用，更具体的涉及钙调蛋白磷酸酶抑制剂isogarcinol(YDIS)及其在抗肿瘤中应用。
技术介绍
恶性肿瘤作为现今威胁人类生命健康的重大疾病，已于近年成功超越心脑血管疾病登上了全球人类死亡原因的首位。在我国，恶性肿瘤的发病率和死亡率也呈现出了逐年攀升的趋势。近期，我国国家癌症中心发布的最新数据显示，全国每天约有1万例患者被确诊为恶性肿瘤，全年新增患者人数逾300万，死亡人数逾200万。在过去的几十年中，随着化疗药物品种的不断增加以及化疗方案的进一步提升，用化学药物治疗恶性肿瘤的效果有了较为显著的提升。虽然，目前可供临床治疗使用的化疗药物种类繁多，但其在治疗过程中仍然存在骨髓抑制、胃肠道不适、器官毒性、脱发以及耐药性等方面的问题。因此，寻找效果好、毒性小的抗肿瘤药物是科研工作者们长期的研究目标。YDIS是多异戉烯基取代的苯甲酮类化合物，最早于1981年被KrishnamurthyN从藤黄科植物(Garciniaindica)分离出来，国内外学者对YDIS的药理活性研究发现其具有抗疟原虫，抗细菌、作为免疫抑制剂等活性。专利技术人从天然中草药中筛选钙调蛋白磷酸酶抑制剂时发现了YDIS，在前期开展YDIS免疫抑制作用相关研究的过程中，发现YDIS对人外周血白血病T淋巴细胞系(Jurkat)有明显的杀伤作用，但对小鼠腹腔巨噬细胞系(RAW264.7)却无任何影响，目前YDIS作用分子机制研究不足，导致其抗肿瘤机制和抗肿瘤效果不清，其对那些肿瘤有效，那些肿瘤治疗效果不佳还有待进一步研究。本申请中，专利技术人在细胞和动物两个水平探索了YDIS的抗肿瘤效果，针对不同的肿瘤细胞分别进行研究，并以常见的肿瘤细胞A549和SMMC-7721为代表深入探究YDIS的抗肿瘤机制，为临床应用奠定基础。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供YDIS在制备肿瘤药物中的应用。进一步，肿瘤选自下列肿瘤中的一种或几种：肝癌、肺癌、胃癌、白血病、卵巢癌、黑色素瘤、结肠癌、乳腺癌、宫颈癌、胰腺癌、骨肉瘤或纤维肉瘤。进一步，肿瘤药物抑制肿瘤细胞的增殖。进一步，肿瘤药物诱导肿瘤细胞发生凋亡。本专利技术的目的在于提供YDIS在制备调控肿瘤细胞周期药物中的应用。进一步，该药物使肿瘤细胞发生G1期阻滞。优选的，该药物调控肿瘤细胞G1/S检验点的，使肿瘤细胞发生G1期阻滞。优选的，该药物减少CDK4和CDK2蛋白的表达从而下调CyclinD1-CDK4复合体和CyclinE-CDK2复合体，使得肿瘤细胞无法完成从G1期到S期的转化，发生G1期阻滞。优选的，该药物调控细胞周期中Cyclin-CDK复合体活性有负调控作用的蛋白的表达使肿瘤细胞发生G1期阻滞。更优选的，药物调控P21蛋白的表达使得肿瘤细胞发生G1期阻滞。本专利技术的目的在于提供肿瘤细胞中YDIS下述任意一项应用：YDIS在制备CDK4蛋白的表达抑制剂中的应用；YDIS在制备CDK2蛋白的表达抑制剂中的应用；YDIS在制备CyclinD1蛋白表达促进剂中的应用；YDIS在制备P21蛋白表达促进剂中的应用。进一步，上述应用用于调控肿瘤细胞的细胞周期。本专利技术的目的在于提供YDIS在制备诱导肿瘤细胞凋亡药物中的应用。进一步，药物通过激活Fas介导的死亡受体途径诱导肿瘤细胞凋亡。优选的，药物通过上调死亡受体Fas及其配体FasL蛋白表达量激活Fas介导的死亡受体途径诱导肿瘤细胞凋亡。优选的，药物通过降低肿瘤细胞中Caspase8蛋白的表达量激活Fas介导的死亡受体途径诱导肿瘤细胞凋亡。进一步，药物通过激活线粒体凋亡途径诱导肿瘤细胞凋亡。优选的，药物通过下调抗凋亡蛋白Bcl-2、Bcl-xL的表达和/或上调促凋亡蛋白Bim的表达来激活线粒体凋亡途径诱导肿瘤细胞凋亡。本专利技术的目的在于提供肿瘤细胞中YDIS下述任意一项应用：YDIS在制备Fas蛋白表达促进剂中的应用；YDIS在制备FasL蛋白表达促进剂中的应用；YDIS在制备Caspase3蛋白表达促进剂中的应用；YDIS在制备Caspase8蛋白的表达抑制剂中的应用；YDIS在制备Bid蛋白的表达抑制剂中的应用；YDIS在制备Bcl-2蛋白的表达抑制剂中的应用；YDIS在制备Bcl-xL蛋白的表达抑制剂中的应用；YDIS在制备Bim蛋白表达促进剂中的应用；YDIS在制备Hrk蛋白表达促进剂中的应用；YDIS在制备Noxa蛋白表达促进剂中的应用；YDIS在制备P53基因或蛋白表达促进剂中的应用。进一步，上述应用用于调控肿瘤细胞的细胞凋亡。附图说明图1是YDIS对正常小鼠原代细胞的增殖抑制作用图；图2是YDIS对人肺癌细胞A549的增殖抑制作用；图3是YDIS对人肝癌细胞SMMC-7721的增殖抑制作用；图4是YDIS对裸鼠SMMC-7721移植瘤模型的作用效果，4A各组裸鼠瘤体积的变化，4B各组裸鼠瘤重，4C各组裸鼠体重的变化，4D各组裸鼠瘤重脾脏指数；图5是YDIS对人肺癌细胞A549细胞周期的影响；图6是YDIS对人肝癌细胞SMMC-7721细胞周期的影响；图7是YDIS对两种细胞中细胞周期Cyclin蛋白mRNA水平的影响，7A是CyclinD1蛋白，7B是CyclinE蛋白，7C是CyclinA2蛋白；图8是YDIS对两种细胞中Cyclin及CDK蛋白表达量的影响，8A是WB示意图，8B是CDK4蛋白WB量化结果图，8C是CDK2蛋白WB量化结果图，8D是CyclinE蛋白WB量化结果图；图9是YDIS对两种细胞中P21蛋白mRNA相对表达量的影响；图10是YDIS对P21蛋白表达量的影响，10A是WB示意图，10B是WB量化结果图；图11是YDIS可引起A549细胞的凋亡；图12是YDIS可引起SMMC-7721细胞的凋亡图；图13是YDIS提高细胞中cleaved-Caspase3和cleaved-PARP蛋白的水平，13A是WB示意图，13B是cleaved-Caspase3蛋白WB量化结果图，13C是cleaved-PARP蛋白WB量化结果图；图14是YDIS对Fas介导的死亡受体途径中相关蛋白表达量的影响；图15是YDIS对Bcl-xl、Hrk和Noxa蛋白mRNA水平的影响；图16是YDIS对Bcl-2和Bcl-xl蛋白表达的影响；图17是YDIS对A549和SMMC-7721细胞线粒体膜电势的影响；图18是YDIS对A549和SMMC-7721细胞中P53蛋白mRNA表达的影响；图19是YDIS对A549和SMMC-772本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.YDIS在制备肿瘤药物中的应用。/n

【技术特征摘要】
20190314 CN 20191019256571.YDIS在制备肿瘤药物中的应用。


2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，肿瘤选自下列肿瘤中的一种或几种：肝癌、肺癌、胃癌、白血病、卵巢癌、黑色素瘤、结肠癌、乳腺癌、宫颈癌、胰腺癌、骨肉瘤或纤维肉瘤。


3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，肿瘤药物抑制肿瘤细胞的增殖和/或诱导肿瘤细胞发生凋亡。


4.YDIS在制备调控肿瘤细胞周期药物中的应用。


5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述药物使肿瘤细胞发生G1期阻滞。


6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述药物调控肿瘤细胞G1/S检验点的，使肿瘤细胞发生G1期阻滞。


7.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述药物减少CDK4和CDK2蛋白的表达从而下调CyclinD1-CDK4复合体和CyclinE-CDK2复合体，使得肿瘤细胞无法完成从G1期到S期的转化，发生G1期阻滞。


8.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述药物调控细胞周期中对Cyclin-CDK复合体活性有负调控作用的蛋白的表达，使肿瘤细胞发生G1期阻滞；优选的，药物调控P21蛋白的表达使得肿瘤细胞发生G1期阻滞。


9.肿瘤细胞中YDIS下述任意一项应用：
YDIS在制备CDK4蛋白的表达抑制剂中的应用；
YDIS在制备CDK2蛋白的表达抑制剂中的应用；
YDIS...

【专利技术属性】
技术研发人员：魏群，王梦奇，韩诗源，陈乐嘉，
申请(专利权)人：魏群，
类型：发明
国别省市：北京;11