金刚烷酸及其在药学上可接受的盐在制备抗乙型肝炎病毒的药物中的应用制造技术

本发明专利技术公开了金刚烷酸及其在药学上可接受的盐在制备治疗乙型肝炎病毒的药物中的应用，该金刚烷酸包括1‑金刚烷甲酸和1‑金刚烷乙酸中的至少一种。本发明专利技术中的金刚烷酸及其在药学上可接受的盐具有良好的抗乙型肝炎病毒的效果。

Adamantanic acid and its pharmaceutically acceptable salts in the preparation of anti hepatitis B drugs

【技术实现步骤摘要】
金刚烷酸及其在药学上可接受的盐在制备抗乙型肝炎病毒的药物中的应用
本专利技术属于生物医药
，具体涉及金刚烷酸及其在药学上可接受的盐在制备抗乙型肝炎病毒的药物中的应用。
技术介绍
乙型肝炎病毒(HepatitisBvirus，HBV)是一种典型的噬肝性DNA病毒，慢性感染乙肝病毒会发展成为肝纤维化、肝硬化、肝功能代偿不全甚至肝癌。乙型肝炎是由乙肝病毒(HBV)感染引起的慢性坏死性疾病，已成为全球主要的公共健康问题，其所致的肝脏恶性肿瘤居恶性肿瘤第五位。抑制或者杀灭乙肝病毒对于乙肝治疗有着极其重要的作用。目前临床用于慢性乙肝病毒治疗的药物分为两类：一类是免疫调节剂，其应答率低且副作用大；另一类是核苷酸类似物，其易积累耐药性且疗程漫长，需要终身治疗，因此研发新的安全有效的抗HBV药物是当务之急。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供金刚烷酸及其在药学上可接受的盐在制备抗乙型肝炎病毒的药物中的应用。本专利技术的技术方案如下：金刚烷酸及其在药学上可接受的盐在制备抗乙型肝炎病毒的药物中的应用，该金刚烷酸包括1-金刚烷甲酸和1-金刚烷乙酸中的至少一种。在本专利技术的一个优选实施方案中，所述金刚烷酸为1-金刚烷甲酸和1-金刚烷乙酸中的至少一种。进一步优选的，所述金刚烷酸为1-金刚烷甲酸。进一步优选的，所述金刚烷酸为1-金刚烷乙酸。本专利技术的另一技术方案如下：一种抗乙型肝炎病毒的药物，其有效成分为金刚烷酸及其在药学上可接受的盐，该金刚烷酸包括1-金刚烷甲酸和1-金刚烷乙酸中的至少一种。在本专利技术的一个优选实施方案中，所述金刚烷酸为1-金刚烷甲酸和1-金刚烷乙酸中的至少一种。进一步优选的，所述金刚烷酸为1-金刚烷甲酸。进一步优选的，所述金刚烷酸为1-金刚烷乙酸。本专利技术的有益效果是：本专利技术中的金刚烷酸及其在药学上可接受的盐具有良好的抗乙型肝炎病毒的效果。附图说明图1为本专利技术中的1-金刚烷甲酸对HepG2.2.15细胞分泌HBsAg，HBeAg，HBVDNA抑制作用和细胞毒性图(A和B：与阳性对照3TC相比*p＜0.05，**p＜0.01，#p＜0.001；C：与阴性对照相比*p＜0.05，**p＜0.01，#p＜0.001)。图2为本专利技术中的1-金刚烷乙酸对HepG2.2.15细胞分泌HBsAg，HBeAg，HBVDNA抑制作用和细胞毒性图(A和B：与阳性对照3TC相比*p＜0.05，**p＜0.01，#p＜0.001；C：与阴性对照相比*p＜0.05，**p＜0.01，#p＜0.001)。具体实施方式以下通过具体实施方式结合附图对本专利技术的技术方案进行进一步的说明和描述。实施例1金刚烷酸的提取与分离1.疣荔枝螺浸膏的制备：取新鲜海螺样品25kg，洗净去除泥沙，并在沸水中加热3～5分钟，去壳，将剩余软组织冷冻干燥后，用高速粉碎机打粉，将粉末分次置于1000mL圆底烧瓶内，加入适量95％乙醇回流提取。提取四次，其中每次提取1至2小时。旋转蒸发的方法进行浓缩所有提取液，浓缩后置于冷冻干燥器中过夜，得95％乙醇浸膏，称量为381g。将上述95％乙醇浸膏依次用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯以及正丁醇进行萃取，合并萃取后溶液并浓缩，即样品粗略分为五相并进行称量，其中石油醚浸膏(APE)约为142g、二氯甲烷浸膏(ADE)为53.12g、乙酸乙酯浸膏(AEE)36.11g、正丁醇浸膏(ABE)8.25g、水部位(AWE)9.76g。2.金刚烷酸的分离纯化：将石油醚浸膏(APE)通过以硅胶为填料的快速中压制备柱，流动相石油醚(PE)∶乙酸乙酯(EA)(100∶0，97∶3，90∶10，70∶30，40∶60，0∶100)和乙酸乙酯(EA)∶甲醇(MeOH)(50∶50-0∶100)，的到8个馏分：P1～P8。P-8(EA-MeOH，0∶100，15.0g)过硅胶柱(EA-MeOH，90∶10，80∶20，60∶40，0∶100)得馏分P8-1～P8-4；P8-2过SephadexLH-20凝胶柱(水-甲醇，100∶0，95∶5，90∶10，80∶20，60∶40，0∶100)，得1-金刚烷甲酸化合物1(化合物1，19.6mg)和1-金刚烷乙酸(化合物2，16.7mg)。上述化合物1至2的结构式如下：实施例2金刚烷酸体外活性筛选乙肝病毒表明抗原(HBsAg)和乙肝病毒e抗原(HBeAg)是临床上判断HBV感染的重要指标。乙肝表面抗原(HBsAg)是HBV的外壳蛋白，本身具有抗原性，不具有传染性，但它的出现常伴随HBV的存在，所以它是已感染HBV的标志。HBeAg是病毒的核心内部成分，在病毒血清学检测中被认为是病毒复制的标志，表示肝细胞存在进行性损害和高度的传染性。HBVDNA为HBV脱氧核糖核酸，也是病毒核心部分，为判断病毒复制性的金指标，HBVDNA定量检查则是检测HBV感染最直接的一项指标。临床上通过定量检测HBV在乙肝患者血液中的含量可以判断患者感染现状以及准确评价药物的治疗效果。以上三个指标是目前最常用的用于评估抗HBV活性的重要指标。1.试剂与材料：HepG2.2.15细胞(来源于厦门大学国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心)2.实施方案：a.化合物溶液配制：取8.0mg化合物1至2分别溶于500μLDMSO中，并各做4次梯度二倍稀释于DMSO中。b.铺细胞板：将细胞瓶的HepG2.2.15细胞稀释到浓度为1×105/mL，于24孔板每孔中加入1mL细胞混悬液，于CO2细胞培养箱中静置24小时，培养条件37℃，5.0％CO2浓度。c.加药：24孔板每行1至5每孔加入上述1中配制的药液各5μL，使每个化合物在各孔浓度分别到达80μg/mL，40μg/mL，20μg/mL，10μg/mL，5μg/mL，第6孔加入5μLDMSO。每孔DMSO终浓度为0.5％。于CO2细胞培养箱培养，培养条件37℃，5.0％CO2浓度。每三天吸取上清液，重新加入完全培养基和药液。d.将上述细胞上清液一部分按说明书加入乙型肝炎病毒s抗原诊断试剂盒和乙型肝炎病毒.e.抗原诊断试剂盒检测HBsAg和HBeAg，另一部分提取HBVDNA后通过qPCR检测HBVDNA含量。实验结果如表1所示表1注：TC50：半数中毒剂量；IC50：半数治疗剂量；TI：治疗指数＝TC50/IC50化合物1：(1-金刚烷甲酸)结果如图1所示。在浓度小于40μg/mL时对HBsAg和HBeAg抑制作用较弱，与3TC相当，浓度大于40μg/mL有较强的HBsAg和HBeAg抑制作用，效果优于3TC且有显著性差异。在浓度为10μg/mL时即对HBVDNA有显著抑制作用，40μg/mL时与3TC相当，而且对HepG2.2.15细胞毒性较弱，在80μg/mL时只有本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.金刚烷酸及其在药学上可接受的盐在制备抗乙型肝炎病毒的药物中的应用，其特征在于：该金刚烷酸包括1-金刚烷甲酸和1-金刚烷乙酸中的至少一种。/n

【技术特征摘要】
1.金刚烷酸及其在药学上可接受的盐在制备抗乙型肝炎病毒的药物中的应用，其特征在于：该金刚烷酸包括1-金刚烷甲酸和1-金刚烷乙酸中的至少一种。


2.如权利要求1所述的应用，其特征在于：所述金刚烷酸为1-金刚烷甲酸和1-金刚烷乙酸中的至少一种。


3.如权利要求1或2所述的应用，其特征在于：所述金刚烷酸为1-金刚烷甲酸。


4.如权利要求1或2所述的应用，其特征在于：所述金刚烷酸为1-金刚烷乙酸。

【专利技术属性】
技术研发人员：崔秀灵，唐飞，许瑞安，黄光华，
申请(专利权)人：华侨大学，
类型：发明
国别省市：福建;35