羧酸在制备GLUT9与URAT1双靶点抑制剂中应用制造技术

本发明专利技术公开了羧酸在制备GLUT9与URAT1双靶点抑制剂中应用。发明专利技术人通过研究发现，乙酸、丙酸或丁酸对治疗高尿酸血症的重要药物靶点URAT1和GLUT9产生抑制作用，而这些转运体也在肠道中大量存在。通过给予高尿酸血症病人足够量的乙酸、丙酸或丁酸，或通过调整饮食的方式来增加体内乙酸、丙酸或丁酸的含量，有望促进尿酸从肾脏及肠道排泄，对改善或治疗高尿酸血症具有重要意义。

Application of carboxylic acid in the preparation of GLUT9 and URAT1 double target inhibitors

【技术实现步骤摘要】
羧酸在制备GLUT9与URAT1双靶点抑制剂中应用
本专利技术涉及化合物的新应用，特别涉及羧酸在制备GLUT9与URAT1双靶点抑制剂中应用。
技术介绍
高尿酸血症是继高血脂，高血糖之后的又一高发病率的代谢疾病，中国成年人的发病率高达12％，尤其是沿海城镇，发病率高达20％，其主要原因为饮食习惯不好造成，如食用大量海鲜，过量饮酒，过多摄取大鱼大肉等。该类食物嘌呤含量过高，尿酸是体内嘌呤类物质的最终代谢产物，体内的腺嘌呤、次黄嘌呤等被肝脏中的黄嘌呤氧化酶催化生成尿酸嘌呤摄入过多或者代谢异常均可导致高尿酸血症的发生进而导致痛风，高血压，心血管疾病和肾脏疾病等等。临床上目前可供选择的降尿酸药物不多，黄嘌呤氧化酶抑制剂是目前临床常用的一类降尿酸药物，该类药物作用于肝脏抑制尿酸的生成，如别嘌呤醇、非布司他等。但别嘌呤醇易引起高敏性反应，非布司他也被FDA提出其易诱发心脑血管疾病。除肝脏外，肾脏是血尿酸排泄的主要部位，肾脏尿酸盐的排泄取决于尿酸盐的重吸收和排泄的平衡，该转运过程涉及一系列转运体，包括尿酸重吸收转运体尿酸阴离子转运体1(SLC22A12，URAT1)和葡萄糖转运蛋白9(SLC2A9，GLUT9)及促进尿酸排泄的OAT1，OAT3等，该类药物为促尿酸排泄药，通过抑制肾小管上转运体URAT1而达到促进尿酸从尿液排泄，如苯溴马隆(BM)，丙磺舒(PB)，Lesinurad等，但这些药物因为副作用大，药效差等原因，也限制了其临床上的应用。尽管URAT1已成为发现降低尿酸的药物的热门靶点，但GLUT9在维持正常血液中的尿酸水平方面已引起了更多关注。GLUT9是一种具有高容量和低亲和力的尿酸盐转运体。研究表明，GLUT9可能发挥着比URAT1更为重要的作用，但是目前尚未发现靶向GLUT9的降尿酸药物。肠道也是尿酸排泄的重要器官，人体大约有30％的尿酸从肠道排出。越来越多研究认为，肠道尿酸排泄障碍是原发性高尿酸血症的重要发病机制。目前已知的肠道存在各种各样的转运体，比如URAT1，GLUT9，ABCG2等，但是目前没有肠道转运尿酸的相关研究，肠道如何发挥降尿酸作用进一步研究。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供化合物在制备GLUT9与URAT1双靶点抑制剂中应用。本专利技术所采取的技术方案是：本专利技术的第一个方面，提供：化合物在制备GLUT9或URAT1抑制剂中的应用，所述化合物选自：C2～C4的羧酸或其药学上可接受的衍生物。在一些实例中，所述衍生物可在体内，进一步为消化道内，特别是肠道内代谢产生C2～C4的羧酸。在一些实例中，所述衍生物为C2～C4的羧酸的盐或酯。在一些实例中，C2～C4的羧酸选自乙酸、丙酸或丁酸。本专利技术的第二个方面，提供：化合物在制备降尿酸组合物中的应用，所述化合物选自：C2～C4的羧酸或其药学上可接受的衍生物。在一些实例中，所述衍生物可在体内，进一步为消化道内，特别是肠道内代谢产生C2～C4的羧酸。在一些实例中，所述衍生物为C2～C4的羧酸的盐或酯。在一些实例中，C2～C4的羧酸选自乙酸、丙酸或丁酸。在一些实例中，所述组合物为口服制剂或肠道给药制剂。在一些实例中，所述口服制剂选自胶囊、片剂、颗粒剂、泡腾片、口服液。在一些实例中，所述口服制剂为肠溶剂。本专利技术的第三个方面，提供：化合物在制备治疗或改善高尿酸血症组合物中的应用，所述化合物选自：C2～C4的羧酸或其药学上可接受的衍生物。在一些实例中，所述衍生物可在体内，进一步为消化道内，特别是肠道内代谢产生C2～C4的羧酸。在一些实例中，所述衍生物为C2～C4的羧酸的盐或酯。在一些实例中，C2～C4的羧酸选自乙酸、丙酸或丁酸。在一些实例中，所述组合物为口服制剂或肠道给药制剂。在一些实例中，所述口服制剂选自胶囊、片剂、颗粒剂、泡腾片、口服液。在一些实例中，所述口服制剂为肠溶剂。本专利技术的第四个方面，提供：组合物在制备降尿酸、治疗或改善高尿酸血症制剂中的应用，所述组合物具有可接受的产C2～C4的羧酸菌和/或其发酵底物。在一些实例中，C2～C4的羧酸选自乙酸、丙酸或丁酸。在一些实例中，产C2～C4的羧酸菌位于肠道内。在一些实例中，所述发酵底物含有膳食纤维。本专利技术的有益效果是：专利技术人通过研究发现，乙酸、丙酸或丁酸对治疗高尿酸血症的重要药物靶点URAT1和GLUT9产生抑制作用，而这些转运体也在肠道中大量存在。通过给予高尿酸血症病人足够量的乙酸、丙酸或丁酸，或通过调整饮食的方式来增加体内乙酸、丙酸或丁酸的含量，有望促进尿酸从肾脏及肠道排泄，对改善或治疗高尿酸血症具有重要意义。附图说明图1是不同浓度乙酸、丙酸、丁酸对GLUT9抑制作用的量效关系曲线及其IC50值。图2是不同浓度乙酸、丙酸、丁酸对GLUT9抑制作用的量效关系曲线及其半数抑制浓度(IC50)。具体实施方式下面结合实验，进一步说明本专利技术的技术方案。专利技术人利用GLUT9转运尿酸时的产电特性，即细胞膜电位会发生变化的特性，使用膜片钳技术研究丁酸对GLUT9的抑制作用；通过14[C]同位素尿酸摄取实验来研究丁酸对URAT1的抑制作用。具体的实验方案如下：1)将包括编码GLUT9或URAT1活性片段克隆到表达载体上，构建重组质粒；2)将所述重组质粒转染至哺乳动物细胞；3)对经转染的细胞进行膜片钳电生理实验或者14[C]尿酸摄取实验，其中使用含尿酸的细胞外液或含14[C]尿酸的摄取缓冲液；4)将丁酸加到含尿酸的细胞外液中，当与未加丁酸(仅加入尿酸溶液)相比，所记录的细胞产生的电流明显降低时，则判断丁酸为对GLUT9有抑制作用的化合物；丁酸预孵育转染URAT1的HEK293T细胞15min后同时加入丁酸和14[C]尿酸，当与未加丁酸(仅加入尿酸溶液)相比，放射CPM值明显降低时，则判断所述丁酸为对URAT1有抑制作用的化合物。膜片钳电生理实验具体步骤如下：首先将GLUT9重组质粒pcDNA3.1(-)-GLUT9与荧光基因片段EGFP共转染至融合度为70-80％的HEK293T细胞，转染后18-24h，将细胞消化并重新接种至多聚赖氨酸预处理盖玻片上，配制待细胞贴壁后可用于全细胞膜片钳记录。本专利技术分别测定了含不同浓度丁酸的尿酸外液(尿酸浓度为1mM)刺激表达GLUT9的HEK293T细胞产生的电流大小变化，通过非线性拟合计算获得丁酸抑制GLUT9的半数抑制浓度(IC50值)。电生理实验的具体操作步骤如下：将玻片放在连有金属电极的细胞外液中，将玻璃微电极移到带荧光的细胞的上方，给予负压，待电极与细胞之间形成大于1GΩ的高阻封接，电容补偿后，将细胞钳制在-30mV，以2-3ml/min的速度灌流同时含有丁酸与尿酸的外液，记录仅灌流尿酸与同时灌流丁酸与尿酸时细胞产生电流大小的变化，本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.化合物在制备GLUT9或URAT1抑制剂中的应用，所述化合物选自：/nC2～C4的羧酸或其药学上可接受的衍生物。/n

【技术特征摘要】
1.化合物在制备GLUT9或URAT1抑制剂中的应用，所述化合物选自：
C2～C4的羧酸或其药学上可接受的衍生物。


2.化合物在制备降尿酸组合物中的应用，所述化合物选自：
C2～C4的羧酸或其药学上可接受的衍生物。


3.化合物在制备治疗或改善高尿酸血症组合物中的应用，所述化合物选自：
C2～C4的羧酸或其药学上可接受的衍生物。


4.根据权利要求1～3所述的应用，其特征在于：所述衍生物可在体内代谢产生C2～C4的羧酸。


5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：所述衍生物为C2～C4的羧酸的盐或酯。<...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴婷，赵泽安，庞建新，陈演瑜，曹莹，李咏梅，李璐，
申请(专利权)人：南方医科大学，
类型：发明
国别省市：广东;44