本发明专利技术提供了一种槲皮素与抗菌药物的联合应用，属于抗菌药物领域。其技术方案为：槲皮素与抗菌药物联合用药能够产生协同抗菌效力，降低抗菌药物的最低抑菌脓毒和最低杀菌浓度，在制备新药和提高抗菌药物临床效果中的应用。本发明专利技术的有益效果为：本组合联合用药能够抑制细菌生长，同时槲皮素具有同抗菌药物协同抗大肠杆菌的作用，抗菌药物在更低剂量下抑制致病菌的生长，增强了抗菌药物的抗菌效力，并且可以减少细菌耐药性的产生，提高了抗细菌感染效果、减少抗菌药物的使用剂量，使得该复方或者该组合能够在预防及治疗细菌感染性疾病中得到应用。
【技术实现步骤摘要】
一种槲皮素与抗菌药物的联合应用
本专利技术涉及一种抗菌药物领域，尤其涉及一种槲皮素与抗菌药物的联合应用。
技术介绍
抗菌药物在减少动物的疾病和死亡方面发挥了重要作用，它的发现和应用对人类和动物健康做出了重大贡献。然而，随着抗菌药物在全球范围内的频繁大量使用，细菌耐药性越来越严重，“超级细菌”的出现也成为世界难题，时刻威胁着生命的健康。而新的抗菌药物研制目前成本高且周期长，而联合用药作为一个解决细菌耐药性的问题具有十分大的潜力。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种能够抑制细菌生长，同时槲皮素具有同抗菌药物协同抗大肠杆菌的作用，抗菌药物在更低剂量下抑制致病菌的生长，增强了抗菌药物的抗菌效力，并且可以减少细菌耐药性的产生，提高了抗细菌感染效果、减少抗菌药物的使用剂量，使得该复方或者该组合能够在预防及治疗细菌感染性疾病中得到应用的槲皮素与抗菌药物的联合应用。本专利技术是通过如下措施实现的：一种槲皮素与抗菌药物的联合应用，其特征在于，槲皮素与抗菌药物联合用药能够产生协同抗菌效力，降低抗菌药物的最低抑菌脓毒和最低杀菌浓度，在制备新药和提高抗菌药物临床效果中的应用。本专利技术的具体特点还有：所述菌为革兰氏阴性菌，优选的，以致病性的大肠杆菌和标准大肠杆菌为代表。所述抗菌药物为四环素、金霉素、土霉素、多西环素中任一种；优选的，所述抗菌药物还可以是氧氟沙星、诺氟沙星、环丙沙星、氟苯尼考、头孢喹肟、头孢噻呋中任一种。所述抗菌药物的制备方法为：S1、取槲皮素与抗菌药物，将槲皮素与抗菌药物分别使用溶解剂进行溶解；S2、将步骤S1中溶解后的槲皮素与抗菌药物按照等体积比混合，得到混合溶液；S3、将步骤S2得到的混合溶液孵育，孵育温度为30℃-38℃，培养时间为14h-36h。所述步骤S1中的槲皮素与抗菌药物浓度均不大于槲皮素与抗菌药物单独作用时浓度的1/4。所述溶解剂为二甲基亚砜或无菌水。所述槲皮素的浓度为0.25μg/mL～4096μg/mL，所述抗菌药物的浓度为0.25μg/mL～4096μg/mL。本专利技术的有益效果为：本组合联合用药能够抑制细菌生长，同时槲皮素具有同抗菌药物协同抗大肠杆菌的作用，抗菌药物在更低剂量下抑制致病菌的生长，增强了抗菌药物的抗菌效力，并且可以减少细菌耐药性的产生，提高了抗细菌感染效果、减少抗菌药物的使用剂量，使得该复方或者该组合能够在预防及治疗细菌感染性疾病中得到应用。附图说明图1为实验一中槲皮素联合四环素治疗小鼠感染模型的疗效。图2为实验二中杀菌曲线图。图3为实验二中细菌细胞膜通透性试验图。图4为实验二中四环素抗性和敏感性大肠杆菌的积累释放图。图5为实验二中使用扫描电镜观察大肠杆菌的形态学变化图。图6为实验二中槲皮素、四环素、四环素和槲皮素联合处理后的大肠杆菌耐药基因的表达情况。具体实施方式为能清楚说明本方案的技术特点，下面通过具体实施方式，对本方案进行阐述。一种槲皮素与抗菌药物的联合应用，其特征在于，槲皮素与抗菌药物联合用药能够产生协同抗菌效力，降低抗菌药物的最低抑菌脓毒和最低杀菌浓度，在制备新药和提高抗菌药物临床效果中的应用。所述菌为革兰氏阴性菌，优选的，以致病性的大肠杆菌和标准大肠杆菌为代表。抗菌药物为四环素、金霉素、土霉素、多西环素中任一种；优选的，抗菌药物还可以是氧氟沙星、诺氟沙星、环丙沙星、氟苯尼考、头孢喹肟、头孢噻呋中任一种。抗菌药物的制备方法为：S1、取槲皮素与抗菌药物，将槲皮素与抗菌药物分别使用溶解剂进行溶解；S2、将步骤S1中溶解后的槲皮素与抗菌药物按照等体积比混合，得到混合溶液；S3、将步骤S2得到的混合溶液孵育，孵育温度为30℃-38℃，培养时间为14h-36h。步骤S1中的槲皮素与抗菌药物浓度均不大于槲皮素与抗菌药物单独作用时浓度的1/4。溶解剂为二甲基亚砜或无菌水。槲皮素的浓度为0.25μg/mL～4096μg/mL，抗菌药物的浓度为0.25μg/mL～4096μg/mL本专利技术药物的专利技术人其槲皮素与抗菌药物的联合应用方面，进行了一系列实验研究，确定了制备本专利技术药物的联合应用，使其与现有技术相比具有明显的突出疗效优势，并通过下述实验数据得出，在本专利技术中，四环素浓度大于256μg/mL才对大肠杆菌全部产生抗菌作用，槲皮素浓度高于1024μg/mL才对耐药菌产生抗菌作用。当两者联合后，其药物浓度降低倍数不小于4。联合体系在低剂量下即产生显著的抗菌效果。实验一、槲皮素与抗菌药物的联合应用药效实验研究一、体外抑菌实验1.1、最低抑菌浓度(MinimumInhibitoryConcentration,MIC)实验将本专利技术提供的抗菌药物和槲皮素以二倍梯度稀释配制成多份样品液，分别加入等量不同来源的大肠杆菌菌液中，密封，在37℃培养16-18h，肉眼观察培养物最低无细菌生长者，即为抗菌药物或者中药单体的MIC(μg/mL)值。1.2微量棋盘稀释法采用微量棋盘稀释法检测抗菌药物和槲皮素联合应用时对不同菌株(大肠杆菌ATCC25922、GZP8-8、GZP10-8、12a4、12e5、GZP13-4、Ⅱ-119和Ⅱ-CX53)的协同作用。在分别测定单一药物对于各细菌的MIC值的基础上，确定抗菌药物的稀释梯度。其中，单一药物的最低药物浓度为其MIC值的1/64倍(即MIC×1/32)，最高浓度为其MIC值的8倍(即MIC×4)，在此范围内进行依次倍比稀释。两种测试物的稀释分别在96孔板的横列和纵列方向上进行，这样可以得到不同浓度组合的两种抗菌药物的混合液。接种细菌终浓度为105CFU/mL，每孔终体积为200μL。无菌MH肉汤培养基作为阴性对照，相同浓度和体积的上样菌液作为阳性对照。将96孔板置于30-37℃恒温培养箱内孵育14h-24h后观察结果。过夜培养后，记录无细菌生长的两种抗菌药物的MIC值。根据美国临床实验室标准委员会(NationalCommitteeforClinicalLaboratoryStandards，NCCLS)制定的标准，通过计算部分抑菌浓度指数(FractionalInhibitoryConcentration，FIC)判断两种抗菌药物联合作用的结果。FIC＝(联合用药时抗菌素的MIC值/单独抗菌素的MIC值)+(联合用药槲皮素的MIC值/单独槲皮素的MIC值)。判断标准为：FIC指数<0.5，为协同作用；0.5<FIC指数≤1，为相加作用；1<FIC指数≤2，为无关作用；FIC指数>2，为拮抗作用。协同增效抗菌的中西复方组合的筛选结果如表1-3所示。可以看出，优选的，当槲皮素和四环素联合应用时能够降低不同大肠杆菌的耐药性，包括ATCC25922、GZP10-8、GZP8-8、12a4、12e5、GZP13-4、II-119本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种槲皮素与抗菌药物的联合应用，其特征在于，槲皮素与抗菌药物联合用药能够产生协同抗菌效力，降低抗菌药物的最低抑菌脓毒和最低杀菌浓度，在制备新药和提高抗菌药物临床效果中的应用。/n
【技术特征摘要】
1.一种槲皮素与抗菌药物的联合应用，其特征在于，槲皮素与抗菌药物联合用药能够产生协同抗菌效力，降低抗菌药物的最低抑菌脓毒和最低杀菌浓度，在制备新药和提高抗菌药物临床效果中的应用。
2.根据权利要求1所述的槲皮素与抗菌药物的联合应用，其特征在于，所述菌为革兰氏阴性菌，以致病性的大肠杆菌和标准大肠杆菌为代表。
3.根据权利要求2所述的槲皮素与抗菌药物的联合应用，其特征在于，所述抗菌药物为四环素、金霉素、土霉素、多西环素中任一种。
4.根据权利要求3所述的槲皮素与抗菌药物的联合应用，其特征在于，所述抗菌药物的制备方法为：
S1、取槲皮素与抗菌药物，将槲皮素与抗菌药物分别使用溶解剂进行溶解；
【专利技术属性】
技术研发人员：郝智慧，戴存春，曲少奇，王苹苹，黄亭亭，
申请(专利权)人：中国农业大学，
类型：发明
国别省市：北京;11
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