【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】B7-H4抗体及其使用方法相关申请的交叉引用本申请要求2017年8月25日提交的美国临时申请第62/550,173号、2017年10月31日提交的美国临时申请第62/579,774号、2017年12月19日提交的美国临时申请第62/607,810号以及2018年4月12日提交的美国临时申请第62/656,789号的权益，各案以全文引用的方式并入本文中。有关以电子方式经EFS-WEB提交的序列表的引用以电子方式提交的序列表(名称：3986.0090004_SL_ST25.txt；大小：331,354字节；创建日期：2018年8月3日)以全文引用的方式并入本文中。专利技术背景
本公开涉及特异性结合至人类B7-H4的抗体、包含此类抗体的组合物以及产生和使用特异性结合至B7-H4的抗体的方法。相关技术的描述B7-H4(又称为B7x、B7-S1和VTCN1)是与包括PD-L1在内的其它B7家族成员共有同源性的一种免疫调节分子。它是包含IgV和IgC胞外结构域的I型跨膜蛋白。尽管在蛋白质水平上，B7-H4在健康组织中的表达相对有限，但B7-H4在若干实体肿瘤，如乳癌、卵巢癌和子宫内膜癌之类妇科癌瘤中有表达。B7-H4在肿瘤中的表达量往往与不良预后相关。B7-H4的受体仍未知，但相信它是在T细胞上表达。相信B7-H4直接抑制T细胞活性。已知B7-H4的表达和功能，本文中提供特异性结合至B7-H4的抗体以及这些抗体调节B7-H4活性，包括在癌症治疗中的用途。
【技术保护点】
1.一种特异性结合至人类B7-H4的分离的抗体或其抗原结合片段，所述分离的抗体或其抗原结合片段包含选自由以下组成的组的重链可变区(VH)互补决定区(CDR)1、VH CDR2、VH CDR3以及轻链可变区(VL)CDR1、CDR2及CDR3序列：/n(a)对应地，SEQ ID NO:458-463；/n(b)对应地，SEQ ID NO:5-10；/n(c)对应地，SEQ ID NO:15-20；/n(d)对应地，SEQ ID NO:25-30；/n(e)对应地，SEQ ID NO:35-40；/n(f)对应地，SEQ ID NO:45-50；/n(g)对应地，SEQ ID NO:55-60；/n(h)对应地，SEQ ID NO:65-70；/n(i)对应地，SEQ ID NO:75-80；/n(j)对应地，SEQ ID NO:85-90；/n(k)对应地，SEQ ID NO:95-100；/n(l)对应地，SEQ ID NO:105-110；/n(m)对应地，SEQ ID NO:115-120；/n(n)对应地，SEQ ID NO:125-130；/n(o)对应地，SEQ ID NO:...
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170825 US 62/550,173;20171031 US 62/579,774;20171.一种特异性结合至人类B7-H4的分离的抗体或其抗原结合片段，所述分离的抗体或其抗原结合片段包含选自由以下组成的组的重链可变区(VH)互补决定区(CDR)1、VHCDR2、VHCDR3以及轻链可变区(VL)CDR1、CDR2及CDR3序列：
(a)对应地，SEQIDNO:458-463；
(b)对应地，SEQIDNO:5-10；
(c)对应地，SEQIDNO:15-20；
(d)对应地，SEQIDNO:25-30；
(e)对应地，SEQIDNO:35-40；
(f)对应地，SEQIDNO:45-50；
(g)对应地，SEQIDNO:55-60；
(h)对应地，SEQIDNO:65-70；
(i)对应地，SEQIDNO:75-80；
(j)对应地，SEQIDNO:85-90；
(k)对应地，SEQIDNO:95-100；
(l)对应地，SEQIDNO:105-110；
(m)对应地，SEQIDNO:115-120；
(n)对应地，SEQIDNO:125-130；
(o)对应地，SEQIDNO:135-140；
(p)对应地，SEQIDNO:145-150；
(q)对应地，SEQIDNO:155-160；
(r)对应地，SEQIDNO:165-170；
(s)对应地，SEQIDNO:175-180；
(t)对应地，SEQIDNO:185-190；以及
(u)对应地，SEQIDNO:195-200。
2.根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包括含SEQIDNO:11、21、31、41、464、51、61、71、81、91、101、111、121、131、141、151、161、171、181、191或201的氨基酸序列的VH。
3.根据权利要求1或2所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包括含SEQIDNO:12、22、32、42、52、62、72、82、92、102、112、122、132、142、152、162、172、182、192或202的氨基酸序列的VL。
4.一种特异性结合至人类B7-H4的分离的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含重链可变区和轻链可变区，其中所述重链可变区包含SEQIDNO:11、21、31、41、464、51、61、71、81、91、101、111、121、131、141、151、161、171、181、191或201的氨基酸序列。
5.一种特异性结合至人类B7-H4的分离的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体包含重链可变区和轻链可变区，其中所述轻链可变区包含SEQIDNO:12、22、32、42、52、62、72、82、92、102、112、122、132、142、152、162、172、182、192或202的氨基酸序列。
6.一种特异性结合至人类B7-H4的分离的抗体或其抗原结合片段，所述分离的抗体或其抗原结合片段包括含以下氨基酸序列的重链可变区和轻链可变区：
(a)对应地，SEQIDNO:464和42；
(b)对应地，SEQIDNO:11和12；
(c)对应地，SEQIDNO:21和22；
(d)对应地，SEQIDNO:31和32；
(e)对应地，SEQIDNO:41和42；
(f)对应地，SEQIDNO:51和52；
(g)对应地，SEQIDNO:61和62；
(h)对应地，SEQIDNO:71和72；
(i)对应地，SEQIDNO:81和82；
(j)对应地，SEQIDNO:91和92；
(k)对应地，SEQIDNO:101和102；
(l)对应地，SEQIDNO:111和112；
(m)对应地，SEQIDNO:121和122；
(n)对应地，SEQIDNO:131和132；
(o)对应地，SEQIDNO:141和142；
(p)对应地，SEQIDNO:151和152；
(q)对应地，SEQIDNO:161和162；
(r)对应地，SEQIDNO:171和172；
(s)对应地，SEQIDNO:181和182；
(t)对应地，SEQIDNO:191和192；或
(u)对应地，SEQIDNO:201和202。
7.根据权利要求1至6中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或抗原结合片段还包含重链恒定区。
8.根据权利要求7所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述重链恒定区选自由人类免疫球蛋白IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1及IgA2重链恒定区组成的组。
9.根据权利要求1至8中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或抗原结合片段还包含轻链恒定区。
10.根据权利要求9所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述轻链恒定区选自由人类免疫球蛋白IgGκ和IgGλ轻链恒定区组成的组。
11.根据权利要求1至6中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或抗原结合片段还包含重链恒定区和轻链恒定区，其中所述重链恒定区是人类IgG1重链恒定区，并且其中所述轻链恒定区是人类IgGκ轻链恒定区。
12.根据权利要求1至6中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包括含SEQIDNO:13、23、33、43、469、53、63、73、83、93、103、113、123、133、143、153、163、173、183、193或203的氨基酸序列的重链。
13.根据权利要求1至6或12中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包括含SEQIDNO:14、24、34、44、54、64、74、84、94、104、114、124、134、144、154、164、174、184、194或204的氨基酸序列的轻链。
14.根据权利要求1至6中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包括含以下氨基酸序列的重链和轻链：
(a)对应地，SEQIDNO:469和44；
(b)对应地，SEQIDNO:13和14；
(c)对应地，SEQIDNO:23和24；
(d)对应地，SEQIDNO:33和34；
(e)对应地，SEQIDNO:43和44；
(f)对应地，SEQIDNO:53和54；
(g)对应地，SEQIDNO:63和64；
(h)对应地，SEQIDNO:73和74；
(i)对应地，SEQIDNO:83和84；
(j)对应地，SEQIDNO:93和94；
(k)对应地，SEQIDNO:103和104；
(l)对应地，SEQIDNO:113和114；
(m)对应地，SEQIDNO:123和124；
(n)对应地，SEQIDNO:133和134；
(o)对应地，SEQIDNO:143和144；
(p)对应地，SEQIDNO:153和154；
(q)对应地，SEQIDNO:163和164；
(r)对应地，SEQIDNO:173和174；
(s)对应地，SEQIDNO:183和184；
(t)对应地，SEQIDNO:193和194；或
(u)对应地，SEQIDNO:203和204。
15.一种特异性结合至人类B7-H4的分离的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含选自由以下组成的组的抗体的VHCDR1、VHCDR2、VHCDR3、VLCDR1、VLCDR2以及VLCDR3：15461、20500、20501、20502、20502.1、22208、15462、22213、15465、20506、15483、20513、22216、15489、20516、15472、15503、15495、15478、15441和20496。
16.根据权利要求15所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述CDR是Kabat定义的CDR、Chothia定义的CDR或AbM定义的CDR。
17.一种特异性结合至人类B7-H4的分离的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含20502.1的Chothia定义或AbM定义的VHCDR1、VHCDR2、VHCDR3、VLCDR1、VLCDR2以及VLCDR3。
18.一种特异性结合至人类B7-H4的分离的抗体或其抗原结合片段，所述分离的抗体或其抗原结合片段包含对应地SEQIDNO:458-463的重链可变区(VH)互补决定区(CDR)1、VHCDR2、VHCDR3以及轻链可变区(VL)CDR1、CDR2和CDR3序列。
19.根据权利要求18所述的抗体或其抗原结合片段，其中(i)所述抗体或其抗原结合片段包括含SEQIDNO:464的氨基酸序列的可变重链区以及含SEQIDNO:42的氨基酸序列的可变轻链区；或(ii)所述抗体包括含SEQIDNO:469的氨基酸序列的重链以及含SEQIDNO:44的氨基酸序列的轻链。
20.一种特异性结合至人类B7-H4的分离的抗体或其抗原结合片段，所述分离的抗体或其抗原结合片段包含对应地SEQIDNO:35-40的重链可变区(VH)互补决定区(CDR)1、VHCDR2、VHCDR3以及轻链可变区(VL)CDR1、CDR2和CDR3序列。
21.根据权利要求20所述的抗体或其抗原结合片段，其中(i)所述抗体或其抗原结合片段包括含SEQIDNO:41的氨基酸序列的可变重链区以及含SEQIDNO:42的氨基酸序列的可变轻链区；或(ii)所述抗体包括含SEQIDNO:43的氨基酸序列的重链以及含SEQIDNO:44的氨基酸序列的轻链。
22.一种特异性结合至人类B7-H4的分离的抗体或其抗原结合片段，所述分离的抗体或其抗原结合片段包含对应地SEQIDNO:65-70的重链可变区(VH)互补决定区(CDR)1、VHCDR2、VHCDR3以及轻链可变区(VL)CDR1、CDR2和CDR3序列。
23.根据权利要求22所述的抗体或其抗原结合片段，其中(i)所述抗体或其抗原结合片段包括含SEQIDNO:71的氨基酸序列的可变重链区以及含SEQIDNO:72的氨基酸序列的可变轻链区；或(ii)其中所述抗体包括含SEQIDNO:73的氨基酸序列的重链以及含SEQIDNO:74的氨基酸序列的轻链。
24.一种与根据权利要求1至23中任一项所述的抗体或其抗原结合片段结合至人类B7-H4的相同表位的分离的抗体或其抗原结合片段。
25.根据权利要求1至24中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段是人类抗体或其抗原结合片段。
26.根据权利要求1、15至20、22或24中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段是鼠类、人源化或嵌合抗体或其抗原结合片段。
27.根据权利要求1至26中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段诱导T细胞增殖。
28.根据权利要求27所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或抗原结合片段使T细胞增殖相较于用对照抗体处理增加至少21％。
29.根据权利要求27所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或抗原结合片段使T细胞增殖相较于用对照抗体处理增加约5％至约35％。
30.根据权利要求1至29中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段诱导CD4+T细胞增殖。
31.根据权利要求30所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段使CD4+T细胞增殖相较于用对照抗体处理增加至少9％。
32.根据权利要求30所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段使CD4+T细胞增殖相较于用对照抗体处理增加约5％至约15％。
33.根据权利要求1至32中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段诱导CD8+T细胞增殖。
34.根据权利要求33所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段使CD8+T细胞增殖相较于用对照抗体处理增加至少11％。
35.根据权利要求34所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段使CD8+T细胞增殖相较于用对照抗体处理增加约5％至约15％。
36.根据权利要求1至35中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段诱导干扰素-γ(IFNγ)产生。
37.根据权利要求36所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段能够使IFNγ产量增加至少2倍、至少3倍、至少4倍和至少5倍、至少6倍、至少7倍、至少8倍、约2倍至约10倍，或约3倍至约10倍。
38.根据权利要求1至37中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段能够在表达B7-H4的细胞中诱导抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(ADCC)。
39.根据权利要求38所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段诱导至少20％、至少30％、至少40％、约20％至约50％，或约30％至约50％的表达B7-H4的细胞特异性溶解。
40.根据权利要求1至39中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段在鼠类CT26结肠直肠癌模型、鼠类乳癌4T1模型或黑素瘤细胞系B16-moB7-H4/H3模型中抑制肿瘤生长。
41.根据权利要求40所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段使肿瘤生长相较于用对照抗体处理减少至少25％、至少30％、至少40％、至少45％或至少50％。
42.根据权利要求27至41中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述T细胞增殖的诱导、所述CD4+T细胞增殖的诱导、所述CD8+T细胞增殖的诱导、所述IFNγ产生的诱导、所述ADCC活性和/或所述肿瘤生长的抑制是剂量依赖性的。
43.根据权利要求1至42中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段结合至食蟹猕猴B7-H4。
44.根据权利要求1至43中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段结合至大鼠B7-H4。
45.根据权利要求1至44中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段结合至小鼠B7-H4。
46.根据权利要求1至45中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段结合至人类B7-H4的IgV结构域。
47.根据权利要求1至46中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段是无岩藻糖基化的。
48.根据权利要求1至47中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段是全长抗体。
49.根据权利要求1至47中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段是抗原结合片段。
50.根据权利要求49所述的抗原结合片段，其中所述抗原结合片段包含Fab、Fab'、F(ab')2、单链Fv(scFv)、二硫键连接的Fv、V-NAR结构域、IgNar、内抗体、IgGΔCH2、微型抗体、F(ab')3、四功能抗体、三功能抗体、双功能抗体、单结构域抗体、DVD-Ig、Fcab、mAb2、(scFv)2或scFv-Fc。
51.根据权利要求1至50中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段还包含可检测标记。
52.一种分离的多核苷酸，所述分离的多核苷酸包含编码根据权利要求1至51中任一项所述...
【专利技术属性】
技术研发人员：C·卡普兰，D·豪泽，L·博格斯，G·布拉特蒂奇，D·柏洛温，F·坎普，M·戈霍德斯，N·P·尼尔森，K·米勒，M·施密德，
申请(专利权)人：戊瑞治疗有限公司，
类型：发明
国别省市：美国;US
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