衣原体纳米乳剂疫苗制造技术

本申请涉及人类免疫学领域，特别是衣原体疫苗。亚单位疫苗组合物可包含从衣原体细菌分离的抗原、融合蛋白或其片段、活体或减毒的细菌、或其他细菌组分，其与纳米乳剂以不同组合混合，该纳米乳剂提供有效的免疫增强剂。

Chlamydia nano emulsion vaccine

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】衣原体纳米乳剂疫苗相关申请的交叉引用本申请要求于2018年7月13日提交的美国临时申请号62/532,348的优先权，其内容通过引用具体并入本文。
本申请涉及人类免疫学领域，具体地衣原体(Chlamydia)疫苗，或更具体地沙眼衣原体(Chlamydiatrachomatis)疫苗。专利技术背景一，关于衣原体感染的背景衣原体生物在人类、哺乳动物和鸟类中引起广泛的疾病，并且由此产生的感染对人类和动物健康以及全世界的农业产业都产生巨大的经济影响。两种主要的人类病原体是沙眼衣原体和肺炎衣原体(Chlamydophilapneumonia)，尽管也存在影响各种动物的多种其他物种和血清型。沙眼衣原体引起慢性结膜炎，并且其也是人类性传播疾病的最常见原因。感染通常不被察觉，如果不加以治疗，可最终导致眼部和生殖器组织的瘢痕形成和纤维化，导致沙眼(全球可预防性失明的主要原因)和骨盆炎性疾病，其可导致不孕不育(infertility)、异位妊娠和慢性骨盆疼痛。肺炎衣原体引起急性呼吸系统疾病，在社区获得性肺炎、支气管炎和鼻窦炎病例中占5-10％。该生物还与慢性阻塞性肺部疾病、哮喘、反应性气道疾病、Reiter综合征、结节病和动脉粥样硬化有关。因此，衣原体感染代表了主要的公共卫生问题。然而，目前尚没有针对衣原体的疫苗。尽管抗生素具有可利用性，但衣原体仍然是一个显著的全球健康问题，缺乏治疗的后果可能对公共卫生和安全以及工业和经济是毁灭性的。二，关于纳米乳剂(Nanoemulsions)的背景缺乏用于衣原体的适当疫苗促使专利技术人详细阐述此前关于纳米乳剂作为抗原免疫增强剂的新特征的发现。纳米乳剂在提供佐剂作用的同时，还通过吸引合适的细胞类型并激活免疫响应的多个臂(arms)来协助抗原呈递。(参见，例如Hamoudaetal.,Efficacy,immunogenicityandstabilityofanovelintranasalnanoemulsionadjuvantedinfluenzavaccineinamurinemodel.HUMVACCINE.2010.6:585-594；Bielinskaetal.,InductionofTh17cellularimmunitywithanovelnanoemulsionadjuvant.CRITREVIMMUNOL.2010.30:189-199；Makidonetal.,Pre-clinicalevaluationofanovelnanoemulsion-basedhepatitisBmucosalvaccine.PLOS-ONE.2008.3:e2954)。与大多数疫苗一样，寻求更大的免疫原性，因为其与在人和动物中更高的功效相关。现有技术典型地公开了使用重组蛋白(例如，美国专利号7,192,595；6,194,546；5,962,298)，以及向组合物添加佐剂如铝(美国专利号6,861,244)和胞壁酰二肽(美国专利号4,826,687)以增加免疫原性。然而，仍然需要开发具有改善的储存稳定性和易于给予的高效衣原体疫苗，这是本专利技术的纳米乳剂疫苗的特征。美国专利号6,015,832中描述了与纳米乳剂有关的在前教导，其涉及灭活革兰氏阳性细菌、细菌孢子或革兰氏阴性细菌的方法。该方法包括使革兰氏阳性细菌、细菌孢子或革兰氏阴性细菌与细菌灭活(或细菌孢子灭活)乳剂接触。美国专利No.6,506,803涉及使用乳剂杀死或中和人体上或体内的微生物剂(例如细菌，病毒、孢子、真菌)的方法。美国专利号6,559,189涉及用于净化样品(人、动物、食物、医疗装置等)的方法，包括使样品与纳米乳剂接触。纳米乳剂在与细菌、病毒、真菌，原生动物或孢子接触时，使病原体死亡或失能。该抗微生物纳米乳剂包括季铵化合物、乙醇/甘油/PEG之一、和表面活性剂。美国专利号6,635,676涉及两种不同的组合物和通过用任何一种组合物处理样品来净化样品的方法。组合物1包含对细菌、病毒、真菌、原生动物和孢子具有抗微生物作用的乳剂。该乳剂包含油和季铵化合物。美国专利号7,314,624涉及诱导对免疫原的免疫响应的方法，其包括用免疫原和纳米乳剂的组合经粘膜表面来治疗对象。纳米乳剂包含油、乙醇、表面活性剂、季铵化合物和蒸馏水。US-2005-0208083和US-2006-0251684涉及具有尺寸优选的液滴的纳米乳剂。US-2007-0054834涉及包含季铵卤化物的组合物及其使用其治疗感染性状况的方法。季铵化合物可以作为乳剂的一部分被提供。US-2007-0036831和US2011-0200657涉及包含抗炎剂的纳米乳剂。描述纳米乳剂的其他出版物包括美国专利号8,226,965，“Methodsoftreatingfungal,yeastandmoldinfections”；US2009-0269394，“Methodsandcompositionsfortreatingonychomycosis”；US2010-0075914，“Methodsfortreatingherpesvirusinfections”；US2010-0092526，“Nanoemulsiontherapeuticcompositionsandmethodsofusingthesame”；US2010-0226983，“Compositionsfortreatmentandpreventionofacne,methodsofmakingthecompositions,andmethodsofusethereof；US2012-0171249，“Compositionsforinactivatingpathogenicmicroorganisms,methodsofmakingthecompositions,andmethodsofusethereof”；和US2012-0064136，“Anti-agingandwrinkletreatmentmethodsusingnanoemulsioncompositions”。但是，这些参考文献均没有教导本专利技术的方法、组合物和试剂盒。具体地，美国专利号7,314,624描述了纳米乳剂疫苗。但是，该参考文献没有教导使用本专利技术的免疫原诱导针对衣原体的保护性免疫响应的能力。涉及疫苗的现有技术包括，例如，美国专利号7,731,967，“Compositionforinducingimmuneresponse”(Novartis)，其描述了包含至少两种佐剂的抗原/佐剂复合物。美国专利号7,357,936，“Adjuvantsystemsandvaccines”(GSK)，描述了佐剂和抗原的组合。美国专利号7,323,182，“Oilinwateremulsioncontainingsaponins”(GSK)，描述了一种具有油/水配方(formulation)的疫苗组合物。美国专利号6,867,000，“Methodofenhancingimmuneresponsetoherpes”(Wye本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种疫苗组合物，其包含：/n(a)免疫增强纳米乳剂，其中所述纳米乳剂包含水包油纳米乳剂或其稀释液；和/n(b)至少一种衣原体细菌抗原，其中所述衣原体细菌抗原是完全衣原体、分离的衣原体抗原、重组衣原体抗原、或其组合，并且其中所述衣原体细菌抗原存在于所述纳米乳剂中。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170713 US 62/532,3481.一种疫苗组合物，其包含：
(a)免疫增强纳米乳剂，其中所述纳米乳剂包含水包油纳米乳剂或其稀释液；和
(b)至少一种衣原体细菌抗原，其中所述衣原体细菌抗原是完全衣原体、分离的衣原体抗原、重组衣原体抗原、或其组合，并且其中所述衣原体细菌抗原存在于所述纳米乳剂中。


2.权利要求1所述的疫苗组合物，其中所述衣原体细菌抗原在掺入纳米乳剂之前被灭活和/或其中所述衣原体抗原被所述纳米乳剂灭活。


3.权利要求1或2所述的疫苗组合物，其中所述衣原体细菌抗原源自衣原体细菌，并且包含至少一种主要外膜蛋白(MOMP)、衣原体外膜复合物(COMC)、多态性外膜蛋白(POMP或Pmp)、60和75kDa热休克蛋白、III型分泌系统结构蛋白、外糖脂、Inc蛋白、Cap1、CT111、CT242、CT687、CT823或CT144或其免疫原性片段。


4.权利要求1-3中任一项所述的疫苗组合物，其中一种或多种衣原体抗原进一步包含表示减毒表型的核苷酸修饰。


5.权利要求1-3中任一项所述的疫苗组合物，其中至少一种衣原体抗原存在于融合蛋白中。


6.权利要求1-3中任一项所述的疫苗组合物，其中至少一种衣原体抗原存在于下列的免疫原性肽片段中：主要外膜蛋白(MOMP)、衣原体外膜复合物(COMC)、多态性外膜蛋白(POMP或Pmp)、60和75kDa热休克蛋白、III型分泌系统结构蛋白、外糖脂、Inc蛋白、Cap1、CT111、CT242、CT687、CT823或CT144或其免疫原性衍生物。


7.权利要求1-6中任一项所述的疫苗组合物，其中所述免疫增强纳米乳剂能够诱导Th1、Th2、Th17、和/或IFN-γ免疫响应。


8.权利要求1至7中任一项所述的疫苗组合物，其中所述纳米乳剂的粒度为约300nm上至约600nm。


9.权利要求1至8中任一项所述的疫苗组合物，其进一步包含：
(a)佐剂；和/或
(b)药学上可接受的载剂。


10.权利要求1至9...

【专利技术属性】
技术研发人员：A·法都姆，V·毕缇寇，
申请(专利权)人：纳诺碧欧公司，
类型：发明
国别省市：美国;US