生物样本数据质量评价用内标物、内标液、方法和试剂盒技术

本申请公开了一种生物样本数据质量评价用内标物、内标液、方法和试剂盒；所述内标物选自5‑氟尿嘧啶、没食子酸、原儿茶酸、间硝基苯酚、4‑叔丁基苯酚、2,4‑二叔丁基苯酚中的至少一种。本申请所述数据质量评价方法操作过程、简单易控，保留时间均匀分布。

Internal standard, internal standard solution, method and kit for biological sample data quality evaluation

【技术实现步骤摘要】
生物样本数据质量评价用内标物、内标液、方法和试剂盒
本申请涉及一种生物样本数据质量评价用内标物、内标液、方法和试剂盒，属于分析化学领域。
技术介绍
在大数据时代，数据是重要而有价值的基础性战略资源，也是科学认知复杂现象和事物内在规律的知识宝藏。各种组学、生物信息学等生物大数据研究往往需要大量甚至海量数据来获得相关的生物学发现。液相色谱-质谱联用技术将应用范围极广的分离方法-液相色谱法与灵敏、专属、能提供分子量和结构信息的质谱法结合起来，已经成为生物大数据研究中必不可少的一种手段，在生物样本的定性和定量分析、数据挖掘等诸多方面得到广泛应用。生物大数据分析时，样本量巨大，样品的检测可能持续很长时间。液质联用仪是一个十分复杂精密的系统，随着时间的推移会受到诸多客观因素(如温度、湿度、震动、电路板老化等)的综合影响，产生不可避免的系统误差。另外，色谱柱本身的影响(如色谱柱老化，填充不均匀，柱内残留污染物等)、更换色谱柱及仪器误差(如死体积，流速变化，基线漂移等)都会产生一定的误差。此外，人的不确定性也会引入一些误差。为了获得准确和可靠的原始数据，数据使用前需要进行数据质量评价。目前，大量样本数据质控主要在数据采集中通过质控样本(QC样本)进行评价。QC样本一般采用混合标准品溶液或混合样本溶液，它们都属于外标质量评价法。虽然混合标准品溶液法易于操作，但适合的混合标准品选择较难；混合样本溶液在样本量不太大时适用，当样本量大，样品前处理不能同批次完成时难以实现。最重要的是，外标质量评价法的QC样本间隔性地穿插于实测样本间，难以反映仪器的实时误差；并且该方法以轮廓信息评价整体数据的质量，缺乏数据细节质量的反映，易产生“假阴性”结果。生物样本(血浆、尿液、中药提取物、复方制剂等)的化学成分极端复杂，是典型的复杂体系。实验因素对不同性质的化合物的影响不尽相同。因此，数据质量评价时对每个成分逐一评价显然是不现实的。
技术实现思路
根据本申请的一个方面，提供了一种生物样本数据质量评价用内标物和内标液，该内标物和内标液可以准确、方便评价液质联用数据质量。采用内标法将内标物加入到每个实测样本中，可以最大程度地反映每个实测样本数据质量。所述生物样本数据质量评价用内标物，其特征在于，包含5-氟尿嘧啶、没食子酸、原儿茶酸、间硝基苯酚、4-叔丁基苯酚、2,4-二叔丁基苯酚中的至少一种。可选地，所述内标物包含5-氟尿嘧啶，没食子酸，原儿茶酸，间硝基苯酚，4-叔丁基苯酚和2,4-二叔丁基苯酚。可选地，所述生物样本包括血浆、血清、脑脊液、尿液、中药原药材、中药的任一部位、中药的加工品中的至少一种。可选地，所述中药的加工品包括饮片、粉末、制剂中的至少一种。具体地，所述生物样本包括但不局限于血浆，血清，脑脊液，尿液，中药原药材、饮片、粉末、制剂(中药颗粒、中药注射液等)，同时也包含但不局限于中药的不同部位以及它们的各种加工品等等。本申请的另一方面，提供了一种生物样本数据质量评价用内标液，其特征在于，包含上述所述的生物样本数据质量评价用内标物中的至少一种。可选地，所述生物样本数据质量评价用内标液，包含内标物；其中，所述内标物选自5-氟尿嘧啶、没食子酸、原儿茶酸、间硝基苯酚、4-叔丁基苯酚、2,4-二叔丁基苯酚中的至少一种。可选地，所述生物样本数据质量评价用内标液，包含内标物；其中，所述内标物包含5-氟尿嘧啶，没食子酸，原儿茶酸，间硝基苯酚，4-叔丁基苯酚和2,4-二叔丁基苯酚。可选地，所述内标液还包括溶剂；其中，所述溶剂溶解所述内标物。可选地，所述溶剂可以使用任何适合的溶剂。如甲醇、乙醇等有机溶剂都可以。可选地，所述溶剂包含乙腈、水、甲醇、乙醇中的至少一种。可选地，所述溶剂选自乙腈、水、甲醇、乙醇中的至少一种。可选地，所述溶剂选自乙腈、水、甲醇、乙醇中的至少两种以任意比例混合得到的混合物。可选地，所述溶剂选自以任意比例混合的乙腈和水的混合物。可选地，所述溶剂包含乙腈和水的混合物。具体地，所述内标液包括预定浓度的内标物；和用于溶解所述内标物的溶剂。所述预定浓度为内标液中内标物的浓度。可选地，所述内标液中4-叔丁基苯酚的浓度为最高浓度。可选地，所述内标液中间硝基苯酚的浓度为最低浓度。可选地，所述内标液的浓度可有本领域技术人员根据具体的被评价的生物样本进行适应性的选择。可选地，所述内标物和/或内标液用于质谱仪和/或液相色谱仪。可选地，所述内标物和/或内标液用于负离子化模式中。可选地，所述质谱仪为电喷雾质谱仪。具体地，所述内标物和/或内标液用于但不局限于电喷雾质谱仪。本申请的另一方面，提供了一种生物样本数据质量评价的方法，其特征在于，采用上述任一项所述的生物样本数据质量评价用内标物、上述任一项所述的生物样本数据质量评价用内标液中的至少一种。可选地，所述方法用于评价液质联用数据质量。可选地，所述方法为基于内标法的生物样本液质联用仪负离子模式数据质量评价方法。可选地，所述方法包括：(1)获得待分析样本；(2)将所述内标液与步骤(1)中所述待分析样本混合，获得待测样品；(3)将步骤(2)中待测样品加入至测试仪器中，获得待测样品的液质联用色谱图；(4)提取待测样品中内标物的EIC色谱图，测定各内标物的参数；(5)以第一个进样待测样品的内标物的参数为基准，计算其余各待测样本与基准样本的差值是否在设定阈值范围内，获得数据质量评价结果。可选地，步骤(4)中所述内标物的EIC色谱图选自m/z＝129.0110、169.0126、153.0191、138.0186、149.0963、205.1593的EIC色谱图中的至少一种。可选地，步骤(4)中所述内标物的EIC色谱图选自m/z＝129.0110，169.0126，153.0191，138.0186，149.0963，205.1593的EIC色谱图。可选地，步骤(4)中所述内标物的参数包括内标物的保留时间、峰高、峰面积中的至少一种。可选地，步骤(4)中所述内标物的参数包括内标物保留时间和内标物的峰高、内标物保留时间和内标物的峰面积中的一种。可选地，步骤(4)中所述内标物的参数包括内标物保留时间和内标物峰高以及内标物的峰面积。可选地，步骤(5)中所述数据质量评价结果包括合格或不合格。可选地，步骤(5)包括：以第一样进样待测样品的内标物保留时间为基准，计算其余各个样本内标物与基准样本保留时间差的绝对值，各内标物绝对值均小于等于阈值的待测样品的数据质量判定为合格；否则，待测样品的数据质量判定为不合格；和/或以第一个进样待测样品的内标物峰高或峰面积为基准，计算其余各个样本内标物与基准样本峰高或峰面积的比值，各比值范围均小于等于阈值范围的待测样品数据判定为合格；否则，待测样品的数据质量判定为不合格。可选地，本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种生物样本数据质量评价用内标物，其特征在于，包含5-氟尿嘧啶、没食子酸、原儿茶酸、间硝基苯酚、4-叔丁基苯酚、2,4-二叔丁基苯酚中的至少一种。/n

【技术特征摘要】
1.一种生物样本数据质量评价用内标物，其特征在于，包含5-氟尿嘧啶、没食子酸、原儿茶酸、间硝基苯酚、4-叔丁基苯酚、2,4-二叔丁基苯酚中的至少一种。


2.根据权利要求1所述的内标物，其特征在于，所述内标物包含5-氟尿嘧啶，没食子酸，原儿茶酸，间硝基苯酚，4-叔丁基苯酚和2,4-二叔丁基苯酚。


3.一种生物样本数据质量评价用内标液，其特征在于，包含权利要求1或2所述的生物样本数据质量评价用内标物中的至少一种；
优选地，所述内标液还包括溶剂；其中，所述溶剂溶解所述内标物；
优选地，所述溶剂包含乙腈、甲醇、乙醇、水中的至少一种。


4.一种生物样本数据质量评价的方法，其特征在于，采用权利要求1或2所述的生物样本数据质量评价用内标物、权利要求3所述的生物样本数据质量评价用内标液中的至少一种。


5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述方法用于评价液质联用数据质量；
优选地，所述方法为基于内标法的生物样本液质联用仪负离子模式数据质量评价方法；
优选地，所述方法包括：
(1)获得待分析样本；
(2)将所述内标液与步骤(1)中所述待分析样本混合，获得待测样品；
(3)将步骤(2)中待测样品加入至测试仪器中，获得待测样品的液质联用色谱图；
(4)提取待测样品中内标物的EIC色谱图，测定各内标物的参数；
(5)以第一个进样待测样品的内标物的参数为基准，计算其余各待测样本与基准样本的差值是否在设定阈值范围内，获得数据质量评价结果；
优选地，步骤(4)中所述内标物的EIC色谱图选自m/z＝129.0110、169.0126、153.0191、138.0186、149.0963、205.1593的EIC色谱图中的至少一种；
优选地，步骤(4)中所述内标物的EIC色谱图选自m/z＝129.0110，169.0126，153.0191，138.0186，149.0963，205.1593的EIC色谱图；
优选地，步骤(4)中所述内标物的参数包括内标物的保留时间、峰高、峰面积中的至少一种；
优选地，步骤(5)中所述数据质量评价结果包括合格或不合格；
优选地，步骤(5)包括：以第一个进样待测样品的内标物保留时间为基准，计算其余各个样本内标物与基准样本保留时间差的绝对值，各内标物绝对值均小于等于阈值的待测样品的数据质量判定为合格；否则，待测...

【专利技术属性】
技术研发人员：张晓哲，赵楠，程孟春，刘欣欣，
申请(专利权)人：中国科学院大连化学物理研究所，
类型：发明
国别省市：辽宁;21