一种用于高通量测序文库定量检测的试剂盒及检测方法技术

本申请公开了一种用于高通量测序文库定量检测的试剂盒及检测方法。本申请的试剂盒，包括针对待测高通量测序文库接头序列设计的检测引物和检测探针；检测引物的上下游引物为Seq ID No.1和2所示序列，检测探针为Seq ID No.3所示序列；检测探针5’端具有荧光基团修饰，3’端具有荧光淬灭基团修饰。本申请的试剂盒，通过TaqMan探针法对NGS文库进行定量检测，可实现NGS文库的绝对定量，相对于现有染料法QPCR定量检测而言，本申请试剂盒能更准确的获得NGS文库的实际浓度，且无需进行基于NGS文库DNA片段大小的校正，这对高通量测序具有重要意义，可以提高测序质量，从而获得最优的测序数据结果。

A kit and detection method for quantitative detection of high throughput sequencing Library

【技术实现步骤摘要】
一种用于高通量测序文库定量检测的试剂盒及检测方法
本申请涉及高通量测序
，特别是涉及一种用于高通量测序文库定量检测的试剂盒及检测方法。
技术介绍
高通量测序文库(NGS文库)制备的目的是，在片段化后的待测核酸片段上连接特异性的接头序列，让它们能够在高通量测序平台上进行测序。NGS文库的质量对于高通量测序(NGS)产出的数据质量至关重要。因此，NGS文库在上机测序之前，需要对其浓度进行精准测定，以便上机测序时能够调整得到合适的上机测序浓度，最终获得最优的测序数据结果。NGS文库QPCR法定量检测，是使用特异性引物仅定量样品中两端接头连接完整的文库，即可以进行测序的文库，可排除单端或双端都不连接接头的不可测序文库的干扰，是目前行业内进行文库定量的首选方法。目前，市场上针对NGS文库的QPCR法定量检测，均是以染料法为主；其定量检测的基本原理是，将检测待测NGS文库的检测结果，与标准品制备的标准曲线进行比较，通过标准曲线进行相对定量，然后再根据待测NGS文库的片段与标准品片段的大小差异进行定量结果的校正。理论上，现有的NGS文库染料法Q本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于高通量测序文库定量检测的试剂盒，其特征在于：包括针对待测高通量测序文库的接头序列设计的检测引物和检测探针；所述检测引物的上游引物为Seq ID No.1所示序列，下游引物为Seq ID No.2所示序列，所述检测探针为Seq ID No.3所示序列；/nSeq ID No.1：5’-AATGATACGGCGACCACCGA-3’/nSeq ID No.2：5’-CAAGCAGAAGACGGCATACGA-3’/nSeq ID No.3：5’-ACACGACGCTCTTCCGATCT-3’/n所述检测探针的5’端具有荧光基团修饰，3’端具有荧光淬灭基团修饰。/n

【技术特征摘要】
1.一种用于高通量测序文库定量检测的试剂盒，其特征在于：包括针对待测高通量测序文库的接头序列设计的检测引物和检测探针；所述检测引物的上游引物为SeqIDNo.1所示序列，下游引物为SeqIDNo.2所示序列，所述检测探针为SeqIDNo.3所示序列；
SeqIDNo.1：5’-AATGATACGGCGACCACCGA-3’
SeqIDNo.2：5’-CAAGCAGAAGACGGCATACGA-3’
SeqIDNo.3：5’-ACACGACGCTCTTCCGATCT-3’
所述检测探针的5’端具有荧光基团修饰，3’端具有荧光...

【专利技术属性】
技术研发人员：许明炎，张晓妮，杨庆，
申请(专利权)人：深圳海普洛斯医学检验实验室，深圳市海普洛斯生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44