本发明专利技术涉及干细胞领域，提供一种促进间充质干细胞分化的培养基，用于解决干细胞向骨细胞分化效率低的问题。本发明专利技术提供的一种促进间充质干细胞分化的培养基，包括胰岛素6~8μg/ml，转铁蛋白0.03~0.05μg/ml，BMP‑4 0.1~0.3ng/ml，FGF‑2 8~10ng/ml，生长激素4~6ng/ml、谷胱甘肽160~200μg/ml、L‑谷氨酰胺 0.5~2mM，β‑巯基乙醇60~80μM，丙酮酸钠0.1~0.5mM，非必须氨基酸0.1~0.15mM，纳米三氧化二铁10~15μM，余量为DMEM培养基。培养基中未加入生物血清，同时引入了纳米氧化物，可以显著的促进间充质干细胞向骨细胞分化。
A medium for promoting the differentiation of mesenchymal stem cells
【技术实现步骤摘要】
一种促进间充质干细胞分化的培养基
本专利技术涉及干细胞领域，具体涉及一种促进间充质干细胞分化的培养基。
技术介绍
干细胞是一类具有自我更新能力和多向分化潜能的细胞类型，它是人体新生细胞从增殖、迁移、分化直至达到成熟这一系列过程中的第一个细胞。关于干细胞的研究已成为目前生物学上最具挑战性、也最具有吸引力的领域之一。干细胞按其来源可分为胚胎干细胞和成体干细胞。而间充质干细胞(MSCs，mesenehymalstemcells)就是成体干细胞的其中一种。作为一类具有自我更新能力的成体干细胞，间充质干细胞可以向多种细胞组织类型分化。它不仅可以向多种间质来源的细胞谱系分化，例如脂肪细胞、成骨细胞、软骨细胞、肌键细胞等等，也可以向其他的细胞谱系分化，比如星形胶质细胞、肌原细胞、心肌细胞以及神经细胞等。由于体外分离培养的MSCs在细胞表型上没有明显的改变，也无功能缺失，因此被认为其对于细胞疗法和组织修复工程具有重要的意义。干细胞移植治疗各类疾病成为当今医学研究的热点，但如何大规模获取定向分化的细胞是亟待解决的计算问题。
技术实现思路
本专利技术解决的技术问题为解决干细胞向骨细胞分化效率低的问题，提供一种促进间充质干细胞分化的培养基。为了解决上述技术问题，本专利技术提供的技术方案为：一种促进间充质干细胞分化的培养基，包括胰岛素6~8μg/ml，转铁蛋白0.03~0.05μg/ml，BMP-40.1~0.3ng/ml，FGF-28~10ng/ml，生长激素4~6ng/ml、谷胱甘肽160~200μg/ml、L-谷氨酰胺0.5~2mM，β-巯基乙醇60~80μM，丙酮酸钠0.1~0.5mM，非必须氨基酸0.1~0.15mM，纳米三氧化二铁10~15μM，余量为DMEM培养基。将纳米三氧化二铁引入干细胞的培养基中，可以在一定程度上促进干细胞向骨细胞分化。培养基中未加入生物血清，同时引入了纳米氧化物，可以显著的促进间充质干细胞向骨细胞分化。优选地，包括胰岛素7~8μg/ml，转铁蛋白0.04~0.05μg/ml，BMP-40.2~0.3ng/ml，FGF-29~10ng/ml，生长激素5~6ng/ml、谷胱甘肽180~200μg/ml、L-谷氨酰胺0.8~2mM，β-巯基乙醇70~80μM，丙酮酸钠0.4~0.5mM，非必须氨基酸0.12~0.15mM，纳米三氧化二铁12~15μM，余量为DMEM培养基。优选地，包括胰岛素7μg/ml，转铁蛋白0.04μg/ml，BMP-40.2ng/ml，FGF-29ng/ml，生长激素5ng/ml、谷胱甘肽180μg/ml、L-谷氨酰胺0.8mM，β-巯基乙醇70μM，丙酮酸钠0.4mM，非必须氨基酸0.12mM，纳米三氧化二铁12μM，余量为DMEM培养基。优选地，所述纳米三氧化二铁为改性纳米三氧化二铁。改性的三氧化二铁可以更进一步的促进干细胞向骨细胞分化。优选地，所述改性三氧化二铁的制备方法为：取纳米三氧化二铁10~15质量份，氧化石墨烯1~5质量份，尿素3~8质量份；将氧化石墨烯同尿素充分研磨后在氩气环境中焙烧10h后，用稀盐酸洗涤，在60~80摄氏度下干燥12h，得到氮掺杂石墨烯；将纳米三氧化二铁同氮掺杂石墨烯混合均匀，加入20倍量的无水乙醇，超声1h，在500w汞灯条件下搅拌6~10h进行反应，得到混合液，将混合液于80~100摄氏度下干燥24h，用无水乙醇洗涤多次后，再次干燥，得到改性三氧化二铁。加入掺氮的氧化石墨烯，对纳米三氧化二铁进行改性，可以更进一步的促进干细胞向骨细胞分化。优选地，所述纳米三氧化二铁12~15质量份，氧化石墨烯3~5质量份，尿素5~8质量份。优选地，所述纳米三氧化二铁12质量份，氧化石墨烯3质量份，尿素5质量份。优选地，所述氧化石墨烯为改性氧化石墨烯，所述改性氧化石墨烯的制备方法为：取氧化石墨烯1~3质量份，乙二醇30~40质量份，钛酸异丙酯8~15质量份，浓盐酸40~60质量份，去离子水40~60质量份；将氧化石墨烯超声分散到乙二醇中，得到分散液；将钛酸异丙酯加入到浓盐酸中，搅拌过程中加入去离子水，超声分散，得到混合液；将混合液同分散液混合，加热至100~120摄氏度，反应12h后离心、洗涤，在50~80摄氏度烘干，得到改性氧化石墨烯。用于改性的氧化石墨烯先经过钛改性，使得纳米三氧化二铁可以更好促进干细胞向骨细胞分化。优选地，所述氧化石墨烯2~3质量份，乙二醇35~40质量份，钛酸异丙酯7~15质量份，浓盐酸50~60质量份，去离子水50~60质量份。优选地，所述氧化石墨烯2质量份，乙二醇35质量份，钛酸异丙酯7质量份，浓盐酸50质量份，去离子水50质量份。与现有技术相比，本专利技术具有的有益效果为：培养基中未加入生物血清，同时引入了纳米氧化物，可以显著的促进间充质干细胞向骨细胞分化；可以大幅的提高干细胞成骨分化的效率。具体实施方式以下实施列是对本专利技术的进一步说明，不是对本专利技术的限制。实施例1一种促进间充质干细胞分化的培养基，包括胰岛素7μg/ml，转铁蛋白0.04μg/ml，BMP-40.2ng/ml，FGF-29ng/ml，生长激素5ng/ml、谷胱甘肽180μg/ml、L-谷氨酰胺0.8mM，β-巯基乙醇70μM，丙酮酸钠0.4mM，非必须氨基酸0.12mM，纳米三氧化二铁12μM，余量为DMEM培养基。所述纳米三氧化二铁为改性纳米三氧化二铁。所述改性三氧化二铁的制备方法为：取纳米三氧化二铁12质量份，氧化石墨烯3质量份，尿素5质量份；将氧化石墨烯同尿素充分研磨后在氩气环境中焙烧10h后，用稀盐酸洗涤，在70摄氏度下干燥12h，得到氮掺杂石墨烯；将纳米三氧化二铁同氮掺杂石墨烯混合均匀，加入20倍量的无水乙醇，超声1h，在500w汞灯条件下搅拌8h进行反应，得到混合液，将混合液于90摄氏度下干燥24h，用无水乙醇洗涤多次后，再次干燥，得到改性三氧化二铁。所述氧化石墨烯为改性氧化石墨烯，所述改性氧化石墨烯的制备方法为：取氧化石墨烯2质量份，乙二醇35质量份，钛酸异丙酯7质量份，浓盐酸50质量份，去离子水50质量份；将氧化石墨烯超声分散到乙二醇中，得到分散液；将钛酸异丙酯加入到浓盐酸中，搅拌过程中加入去离子水，超声分散，得到混合液；将混合液同分散液混合，加热至110摄氏度，反应12h后离心、洗涤，在60摄氏度烘干，得到改性氧化石墨烯。将纳米三氧化二铁引入干细胞的培养基中，可以在一定程度上促进干细胞向骨细胞分化。培养基中未加入生物血清，同时引入了纳米氧化物，可以显著的促进间充质干细胞向骨细胞分化。改性的三氧化二铁可以更进一步的促进干细胞向骨细胞分化。加入掺氮的氧化石墨烯，对纳米三氧化二铁进行改性，可以更进一步的促进干细胞向骨细胞分化。用于改性的氧化石墨烯先经过钛改性，使得纳米三氧化二铁可以更好促进干细胞向骨细胞分化。实施例2一种促进间充质干细胞分化的培养基，包括胰岛素6μg/ml，转铁蛋白0.03μ本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种促进间充质干细胞分化的培养基，其特征在于，包括胰岛素6~8μg/ml，转铁蛋白0.03~0.05μg/ml，BMP-4 0.1~0.3ng/ml，FGF-2 8~10ng/ml，生长激素4~6ng/ml、谷胱甘肽160~200μg/ml、L-谷氨酰胺 0.5~2mM，β-巯基乙醇60~80μM，丙酮酸钠0.1~0.5mM，非必须氨基酸0.1~0.15mM，纳米三氧化二铁10~15μM，余量为DMEM培养基；/n所述纳米三氧化二铁为改性纳米三氧化二铁；/n所述改性纳米三氧化二铁的制备方法为：取纳米三氧化二铁10~15质量份，氧化石墨烯1~5质量份，尿素3~8质量份；将氧化石墨烯同尿素充分研磨后在氩气环境中焙烧10h后，用稀盐酸洗涤，在60~80摄氏度下干燥12h，得到氮掺杂石墨烯；将纳米三氧化二铁同氮掺杂石墨烯混合均匀，加入20倍量的无水乙醇，超声1h，在500w汞灯条件下搅拌6~10h进行反应，得到混合液，将混合液于80~100摄氏度下干燥24h，用无水乙醇洗涤多次后，再次干燥，得到改性纳米三氧化二铁。/n
【技术特征摘要】
1.一种促进间充质干细胞分化的培养基，其特征在于，包括胰岛素6~8μg/ml，转铁蛋白0.03~0.05μg/ml，BMP-40.1~0.3ng/ml，FGF-28~10ng/ml，生长激素4~6ng/ml、谷胱甘肽160~200μg/ml、L-谷氨酰胺0.5~2mM，β-巯基乙醇60~80μM，丙酮酸钠0.1~0.5mM，非必须氨基酸0.1~0.15mM，纳米三氧化二铁10~15μM，余量为DMEM培养基；
所述纳米三氧化二铁为改性纳米三氧化二铁；
所述改性纳米三氧化二铁的制备方法为：取纳米三氧化二铁10~15质量份，氧化石墨烯1~5质量份，尿素3~8质量份；将氧化石墨烯同尿素充分研磨后在氩气环境中焙烧10h后，用稀盐酸洗涤，在60~80摄氏度下干燥12h，得到氮掺杂石墨烯；将纳米三氧化二铁同氮掺杂石墨烯混合均匀，加入20倍量的无水乙醇，超声1h，在500w汞灯条件下搅拌6~10h进行反应，得到混合液，将混合液于80~100摄氏度下干燥24h，用无水乙醇洗涤多次后，再次干燥，得到改性纳米三氧化二铁。
2.根据权利要求1所述的一种促进间充质干细胞分化的培养基，其特征在于，包括胰岛素7~8μg/ml，转铁蛋白0.04~0.05μg/ml，BMP-40.2~0.3ng/ml，FGF-29~10ng/ml，生长激素5~6ng/ml、谷胱甘肽180~200μg/ml、L-谷氨酰胺0.8~2mM，β-巯基乙醇70~80μM，丙酮酸钠0.4~0.5mM，非必须氨基酸0.12~0.15mM，纳米三氧化二铁12~15μM，余量为DMEM培养基。
3.根据权利要求2所述的一种促进间充质干细胞分化的培养基，其特征在于，包括胰岛素7μg/ml，转铁蛋白0.04μg/...
【专利技术属性】
技术研发人员：陈忠平，
申请(专利权)人：朗姿赛尔生物科技广州有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44
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