细胞培养容器制造技术

细胞培养容器(100)，其包括壁，所述壁包括限定容器的细胞培养室的内表面。非多孔材料的基材(215)位于细胞培养室中并且在细胞培养室的第一区域与细胞培养室的第二区域之间。基材包括多个微腔体(220)，所述多个微腔体中的每个微腔体包括限定孔穴的凹表面以及开口，每个微腔体的凹表面包括至少一个孔，其包含小于或等于约15微米的尺寸，所述孔限定了从孔穴到第二区域的路径。还提供了包括含有多个微腔体和多孔材料层的基材的细胞培养容器。还提供了在所述细胞培养容器中培养细胞的方法。

Cell culture container

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】细胞培养容器相关申请的交叉引用本申请要求2017年7月14日提交的题为“CellCultureContainersandMethodsofCulturingCells(细胞培养容器及培养细胞的方法)”的系列号为62/532,671的美国临时申请的优先权权益，本文以该申请的内容为基础并通过引用将其全部结合入本文。
本公开一般涉及细胞培养容器和培养细胞的方法，更具体地，涉及用于培养三维细胞的具有多孔支承件的细胞培养容器，以及在所述细胞培养容器中培养三维细胞的方法。
技术介绍
在细胞培养容器中容纳三维细胞是已知的。在细胞培养容器中培养三维细胞也是已知的。
技术实现思路
下文给出了本公开的简化归纳，以便提供对具体实施方式所描述的一些示例性实施方式的基本理解。在实施方式中，本公开提供了细胞培养容器，其具有颈缩开口，细胞培养室，顶部，底部，侧壁，与颈缩开口相对的端壁以及用于培养细胞并且具有微腔体阵列的表面。在实施方式中，用于培养细胞并且具有微腔体阵列的表面部分或完全由多孔材料形成。在实施方式中，用于培养细胞的基材在一个表面上具有微腔体阵列并且在另一个表面上具有多孔材料，并且微腔体的壁的一部分由多孔材料提供。在实施方式中，微腔体具有开口以允许气体通过微腔体的壁。在另外的实施方式中，细胞培养容器具有用于以下目的的结构：在多孔材料下方引入及移除培养基或者使培养基通过多孔材料而不会干扰在微腔体阵列的各微腔体中的细胞上方的培养基。在另外的实施方式中，本公开提供了在所述细胞培养容器中培养细胞的方法，以及将细胞和培养基引入容器及从容器移除的方法。以上实施方式是示例性的，并且可单独或与本文提供的任意一个或多个实施方式以任意形式组合来提供而不会偏离本公开的范围。另外，应当理解的是，前面的一般性描述和以下的具体实施方式都呈现了本公开的实施方式，且都旨在提供用于理解所描述和所要求保护的实施方式的性质和特性的总体评述或框架。包括的附图提供了对实施方式的进一步理解，附图结合于本说明书中并构成说明书的一部分。附图例示了本公开的各个实施方式，并与说明书一起用来解释其原理和操作。附图说明当参照附图阅读时，可以进一步理解本公开的这些特征、实施方式和优点以及其他特征、实施方式和优点，附图中：图1根据本公开的实施方式，示意性例示了第一示例性细胞培养容器的侧视图；图2根据本公开的实施方式，示出了第一示例性细胞培养容器沿着图1的线2-2的平面图；图3根据本公开的实施方式，示出了包括细胞培养室并且该细胞培养室具有第一区域和第二区域的细胞培养容器的示例性截面图；图4根据本公开的实施方式，例示了图3的细胞培养容器的微腔体阵列的一个示例性实施方式的放大示意图，其包括含有多个微腔体的基材，所述多个微腔体包括至少一个孔；图5根据本公开的实施方式，例示了以图3的视图5获得的一部分细胞培养容器的示例性实施方式的放大示意图，其包括含有多个微腔体的基材，所述多个微腔体包括至少一个孔；图6根据本公开的实施方式，示出了以图3的视图5获得的细胞培养容器的一部分细胞培养容器部分的替代性实施方式，其包括包含多个微腔体以及多孔材料层的基材；图7根据本公开的实施方式，示出了在多个微腔体中的至少一个微腔体中培养细胞的方法，所述多个微腔体包括细胞培养容器的部分的基材的至少一个孔；图8根据本公开的实施方式，示出了以图3的视图5获得的细胞培养容器的一部分细胞培养容器部分的替代性实施方式，其包括具有多个微腔体以及多孔材料层的基材；图9根据本公开的实施方式，示出了部分的细胞培养容器的替代性实施方式，其包括具有多个微腔体和多孔材料层的基材；图10根据本公开的实施方式，示出了部分的细胞培养容器的替代性实施方式，其包括具有多个微腔体和多孔材料层的基材；图11根据本公开的实施方式，示出了在包括多个微腔体和多孔材料层的部分基材的多个微腔体的至少一个微腔体中培养细胞的方法；图12根据本公开的实施方式，示出了包括端口和透气性过滤器的细胞培养容器的截面图的替代性实施方式；图13根据本公开的实施方式，示出了包括将第一孔连接到第二区域的导管的细胞培养容器的截面图的替代性实施方式；图14根据本公开的实施方式，示出了包括第二孔以及将第二孔连接到第二区域的导管的细胞培养容器的截面图的替代性实施方式；图15根据本公开的实施方式，示出了包括将第一区域连接到第二区域的导管的细胞培养容器的截面图的替代性实施方式。具体实施方式下文将参照附图更完整地描述各个特征，附图中示出了本公开的示例性实施方式。只要可能，在所有附图中使用相同的附图标记来表示相同或类似的部分。但是，本公开可以以许多不同的形式实施并且不应被解读成限于本文中提出的实施方式。细胞培养容器(例如烧瓶)可提供用于培养细胞的无菌室。在一些实施方式中，培养细胞可提供关于疾病和毒理学研究，药剂和治疗的功效，肿瘤特性、生物体、遗传学以及细胞和与细胞相关的其他科学、生物学和化学原理的信息。相比于二维细胞培养物，在一些实施方式中，三维细胞培养物可产生多细胞结构，其在生理学上更精确，并且相比于二维细胞培养物，更逼真地代表细胞可在实际生命应用中存在和生长的环境。例如，发现三维细胞培养物更接近地提供模拟“体内”(即，在活体内，在真实环境中)细胞生长的真实环境；而发现二维细胞培养物提供模拟“体外”(即，在玻璃中，在实验室环境中)细胞生长的环境，其不能那么好地代表实验室外发生的真实环境。通过与三维细胞培养物的相互作用以及观察其性质和行为，可实现关于以下方面的细胞理解的进步，例如，疾病和毒理学研究，药剂和治疗的功效，肿瘤特性、生物体、遗传学以及细胞和与细胞相关的其他科学、生物学和化学原理。在实施方式中，细胞培养容器100可包括底部108、顶部101、以及端壁107和侧壁106，它们各自具有内表面，所述内表面接触液体培养基以及所培养的细胞。这些内表面限定了细胞培养室103。这些表面中的至少一个表面可以更加特别适于细胞生长。例如，细胞培养表面可以用涂层处理，以促进或阻止细胞粘着于表面。或者，为了支持球体细胞的培养，细胞生长表面可包括多个微腔体或隔室(例如，微米尺寸的孔穴、亚毫米尺寸的孔穴)，它们例如以阵列排列。细胞生长表面可与烧瓶一体，或者可以是放置在或固定在细胞生长室中的具有微腔体阵列的单独表面。顶表面、底表面、一个或多个侧表面或它们的组合可包括成阵列的微腔体。例如，在一些实施方式中，在多个微腔体的每个微腔体中可形成单个球体。被引入到容器中的液体培养基中的细胞将通过重力沉降到微腔体中。悬浮在液体培养基中的一个或多个细胞将经过液体落下并沉降在每个微腔体中。微腔体的形状(例如，限定孔穴的凹表面)，以及防止细胞粘附于表面的微腔体的表面涂层也可促进细胞生长成三维形式，从而在每个微腔体中形成球体。例如，微腔体可以波状或正弦形状形成，从而形成具有圆化顶部和圆化底部的微腔体或微孔穴。当液体培养基填充容器时，这本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种细胞培养容器，其包括：/n壁，其包括限定容器的细胞培养室的内表面；/n位于细胞培养室中并且在细胞培养室的第一区域与细胞培养室的第二区域之间的非多孔材料的基材，所述基材包括多个微腔体，所述多个微腔体中的每个微腔体包括限定了孔穴的凹表面以及限定了从第一区域进入到孔穴中的路径的开口，所述每个微腔体的凹表面包括至少一个孔，其包含小于或等于约15微米的尺寸，所述孔限定了从孔穴到第二区域的路径；以及/n延伸通过壁而与第一区域流体连通的第一孔。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170714 US 62/532,6711.一种细胞培养容器，其包括：
壁，其包括限定容器的细胞培养室的内表面；
位于细胞培养室中并且在细胞培养室的第一区域与细胞培养室的第二区域之间的非多孔材料的基材，所述基材包括多个微腔体，所述多个微腔体中的每个微腔体包括限定了孔穴的凹表面以及限定了从第一区域进入到孔穴中的路径的开口，所述每个微腔体的凹表面包括至少一个孔，其包含小于或等于约15微米的尺寸，所述孔限定了从孔穴到第二区域的路径；以及
延伸通过壁而与第一区域流体连通的第一孔。


2.如权利要求1所述的细胞培养容器，其中，所述壁包括与第二区域流体连通的端口，其包含透气性材料。


3.如权利要求1所述的细胞培养容器，其包括将第一孔连接到第二区域的导管。


4.如权利要求1所述的细胞培养容器，其包括延伸通过壁而与第二区域流体连通的第二孔。


5.如权利要求4所述的细胞培养容器，其包括将第二孔连接到第二区域的导管。


6.如权利要求1或权利要求2所述的细胞培养容器，其包括将第一区域连接到第二区域的导管。


7.如权利要求6所述的细胞培养容器，从第一区域引出到第二区域的导管的端部位于第一区域中并且与所述多个微腔体中的每个微腔体的开口间隔开。


8.一种在如权利要求1-7中任一项所述的细胞培养容器中培养细胞的方法，包括：
使气体通过所述多个微腔体中的至少一个微腔体的凹表面中的所述至少一个孔；以及
在所述至少一个微腔体中培养细胞。


9.一种在如权利要求1-7中任一项所述的细胞培养容器中培养细胞的方法，包括：
使液体通过第一孔；以及
在所述多个微腔体的至少一个微腔体中培养细胞。


10.一种在如权利要求1-7中任一项所述的细胞培养容器中培养细胞的方法，包括：
使液体通过第一孔而从容器之外进入到第一区域中；
在所述多个微腔体的至少一个微腔体中沉积至少一部分的液体；以及
在所述至少一个微腔体中沉积至少一部分的液体之后，在所述多个微腔体的所述至少一个微腔体中培养细胞。


11.一种在如权利要求2所述的细胞培养容器中培养细胞的方法，包括：使气体进入到端口的透气性过滤器中，以及在所述多个微腔体的至少一个微腔体中培养细胞。


12.一种在如权利要求3所述的细胞培养容器中培养细胞的方法，包括：使液体通过将第一孔连接到第二区域的导管，以及在所述多个微腔体的至少一个微腔体中培养细胞。


13.一种在如权利要求4所述的细胞培养容器中培养细胞的方法，包括：
使液体通过第二孔；以及
在所述多个微腔体的至少一个微腔体中培养细胞。


14.一种在如权利要求5所述的细胞培养容器中培养细胞的方法，包括：
使液体通过将第二孔连接到第二区域的导管；以及
在所述多个微腔体的至少一个微腔体中培养细胞。


15.一种在如权利要求6或权利要求7所述的细胞培养容器中培养细胞的方法，包括：使气体通过将第一区域连接到第二区域的导管，以及在所述多个微腔体的至少一个微腔体中培养细胞。


16.一种细胞培养容器，其包括：
壁，其包括限定容器的细胞培养室的内表面；
位于细胞培养室中并且在细胞培养室的第一区域与细胞培养室的第二区域之间的基材，所述基材包括多个微腔体和多孔材料层，所述多个微腔体中的每个微腔体包括限定了孔穴的凹表面以及限定了从第一区域进入到孔穴中的路径的开口，所述多孔材料...

【专利技术属性】
技术研发人员：G·R·马汀，A·M·D·P·帕多，M·K·谢弗，A·J·坦纳，
申请(专利权)人：康宁股份有限公司，
类型：发明
国别省市：美国;US