抗MRJP4的配对单克隆抗体、检测MRJP4的ELISA试剂盒和胶体金免疫试纸制造技术

本发明专利技术公开了抗MRJP4的配对单克隆抗体、检测MRJP4的ELISA试剂盒及胶体金免疫试纸。本发明专利技术以MRJP4重组蛋白为抗原采用细胞融合得到阳性细胞株，通过与其它蜂王浆主蛋白交叉反应检测获得MRJP4特异性融合细胞株，根据抗原表位配对检测进行配对初筛，根据配对结果、抗体表位检测和标准曲线绘制及样本测定等，最终确定了有较好线性关系且灵敏度高的抗MRJP4的配对单克隆抗体6H9和8C9。本发明专利技术分别构建了检测MRJP4的ELISA检测试剂盒以及胶体金免疫检测试纸。本发明专利技术试剂盒特异性强，检测范围为1.563‑100ng/mL，检测灵敏度为3.758ng/mL，批内批间CV值小于10％。

Matched monoclonal antibody against mrjp4, ELISA kit for detection of mrjp4 and colloidal gold immunoassay

【技术实现步骤摘要】
抗MRJP4的配对单克隆抗体、检测MRJP4的ELISA试剂盒和胶体金免疫试纸
本专利技术涉及蜂王浆主蛋白4(MRJP4)单克隆抗体的制备及其应用，尤其涉及配对的MRJP4单克隆抗体的制备，本专利技术进一步涉及用所制备的配对的MRJP4单克隆抗体构建的检测MRJP4的ELISA检测试剂盒和胶体金免疫检测试纸及其在定量或定性检测MRJP4中的应用，属于MRJP4的定性和定量检测领域。
技术介绍
蜂王浆是一种具有滋补保健和延年益寿功能的天然功能性蜂产品。蜂王浆成分复杂，营养丰富，其中蛋白质含量为12.0％～15.0％。由于蜂王浆不易保存，极易变质。因而，蜂王浆的品质和其新鲜度紧密相关。目前，国际上缺少一个公认的，可以广泛推广、能如实反映蜂王浆新鲜度的方法，着也是现行蜂王浆质量标准的一个缺陷。中国是世界蜂王浆的第一生产国和第一出口国。因此，探求和建立蜂王浆新鲜度评价方法势在必行。研究表明，蜂王浆主蛋白与蜂王浆的新鲜度呈正相关，即蜂王浆越新鲜其王浆主蛋白含量越高。MRJP4对温度非常敏感，在冷藏或室温包藏条件下，随时间的延长其浓度逐渐降本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一株稳定分泌抗MRJP4单克隆抗体的杂交瘤细胞株6H9，其特征在于，其微生物保藏编号为：CGMCC No.17294。/n

【技术特征摘要】
20190315 CN 20191019629761.一株稳定分泌抗MRJP4单克隆抗体的杂交瘤细胞株6H9，其特征在于，其微生物保藏编号为：CGMCCNo.17294。


2.由权利要求1所述杂交瘤细胞株6H9分泌的抗MRJP4单克隆抗体。


3.一株稳定分泌抗MRJP4单克隆抗体的杂交瘤细胞株8C9，其特征在于，其微生物保藏编号为：CGMCCNo.17295。


4.由权利要求3所述杂交瘤细胞株8C9分泌的抗MRJP4单克隆抗体。


5.权利要求2或4所述的抗MRJP4单克隆抗体在定性检测样品中是否含有MRJP4或定量检测样品中MRJP4含量的用途。


6.一种检测MRJP4含量的酶联免疫试剂盒，包括：抗MRJP4的一抗，生物素标记的抗MRJP4的二抗，标准品，辣根过氧化物酶标记亲和素，生物素标记抗体稀释液，辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液，样本稀释液，浓洗涤液，底物溶液和终止液；其特征在于：所述的一抗是权利要求2所述的抗MRJP4单克隆抗体，所述的二抗是权利要求4所述的抗MRJP4单克隆抗体；或者所述的一抗是权利要求4所述的抗MRJP4单克隆抗体，所述的二抗是权利要求2所述的抗MRJP4单克隆抗体。


7.一种检测MRJP4的胶体金免疫检测...

【专利技术属性】
技术研发人员：胡菡，魏俏红，陈思，冯毛，孟丽峰，韩宾，房宇，马川，李建科，
申请(专利权)人：中国农业科学院蜜蜂研究所，
类型：发明
国别省市：北京;11