治疗癌症的肽制造技术

本发明专利技术涉及癌症治疗或预防领域。特定言之，本发明专利技术提供来自SLIT2蛋白质的肽片段，及其在抑制癌症生长、侵入及转移中的应用。

Cancer peptides

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】治疗癌症的肽
本专利技术涉及癌症治疗或预防。特定言之，本专利技术提供来自SLIT2蛋白质的肽片段，及其在抑制癌症生长、癌症侵入及癌转移中的应用。
技术介绍
近年来，抗癌肽获得更高关注。然而，大部分公知抗癌药物生物活性较低且毒性较高。因此，需要开发具有高生物活性及低毒性的抗癌生物活性肽。
技术实现思路
本专利技术提供一种包含如本文所描述的氨基酸序列的肽。某些实施例包括包含FHIVELLA或FHAVELLA氨基酸序列的肽。某些其他实施例包括如本文所描述的环肽、聚乙二醇化肽及茀基甲氧基羰基-肽。本专利技术提供一种医药组合物，其包含如本文所描述的肽。本专利技术提供一种用于抑制癌症生长、癌症侵入及/或癌转移的方法，其包含投与有效量的如本文所描述的肽。本专利技术提供一种用于预防、治疗或减缓癌症的方法，其包含投与有效量的如本文所描述的肽。图式简单说明图1显示茀基甲氧基羰基(Fmoc)-LT1-3(LT1-3)的丙胺酸取代对细胞增殖的影响。图2显示Fmoc-LT-A3(LT-A3)的碱基取代对细胞增殖的影响。图3显示CL1-5细胞中Fmoc-LT-肽(LT-肽)对生长抑制的剂量影响。图4显示各种肺癌细胞株中Fmoc-LT1-3及Fmoc-LT-A3的生长抑制活性。图5(A)至5(C)显示Fmoc-LT1-3(A)、Fmoc-LT-A3(B)及Fmoc-LT-A3-PEG3(C)对侵入抑制的剂量影响。图6显示经不同量的LT1-3肽治疗的小鼠在第18天的早期肿瘤形成速率。图7显示异种移植模型中Fmoc-LT1-3对肿瘤生长的影响。图8显示经不同量的LT1-3肽治疗的肿瘤的尺寸。图9显示经不同量的Fmoc-LT1-3治疗的动物的相对器官重量。图10显示Fmoc-LT1-3对经由尾部血管注射的CL1-5细胞的肺脏癌转移的影响。图11显示对照组、CDDP、LT1-3、CDDP+LT1-3在维持疗法中的存活比例及CDDP+LT1-3在组合疗法中的存活比例。图12显示LT-1、LT-3、LT-4、LT-5对CL1-5细胞的侵入抑制的影响。图13显示CL1-5细胞中LT1-3肽对细胞侵入抑制的影响。图14显示CL1-5细胞中LT-A3肽对细胞侵入抑制的影响。图15显示CL1-5细胞中C-肽的N端或C端修饰对细胞侵入的影响。图16显示CL1-5细胞中LT-A3-PEG肽对细胞侵入的影响。图17显示CL1-5细胞中LT1-3-PEG对细胞侵入的影响。图18显示A549细胞中LT1-3-PEG对细胞侵入的影响。图19显示H1299细胞中LT1-3-PEG对细胞侵入的影响。图20(A)及20(B)显示CL1-5细胞中肽的N端或C端修饰对细胞增殖的影响；(A)，PEG-LT1-3、PEG-LT-A3及LT-A3-PEG；(B)，LT1-3及LT1-3-PEG。图21显示LT1-3-PEG对各种肺癌细胞株的增殖的影响。图22显示LT1-3未抑制Beas2B、HUVEC及MRC5正常细胞株的生长。图23显示LT1-3-PEG对MCF-7、T-47D、MDA-MB-453及MDA231乳癌细胞的增殖的影响。图24显示PKA抑制剂(H89)提高了CL1-5细胞上LT1-3肽的生长抑制活性。图25显示JNK抑制物(Sp600125)提高了CL1-5细胞上LT1-3肽的生长抑制活性。图26显示PKACA的基因表达阻断提高了CL1-5细胞上LT1-3-PEG参与的生长抑制活性。图27显示JNK1的基因表达阻断提高了CL1-5细胞上LT1-3-PEG参与的生长抑制活性。具体实施方式应理解，本文所描述的各种实施例及实例仅旨在提供说明且不用于限制申请专利范围的范畴。冠词“一种(a/an)”在本文中用于指代一种或多于一种(即至少一种)所述冠词的语法对象。氨基酸的缩写在本专利技术全文中使用，且遵循本领域中已知的标准命名法。举例而言，如本领域普通技术人员将理解，丙胺酸为Ala或A；精胺酸为Arg或R；天冬酰胺为Asn或N；天冬胺酸为Asp或D；半胱胺酸为Cys或C；麸胺酸为Glu或E；麸酰胺酸为Gln或Q；甘胺酸为Gly或G；组胺酸为His或H；异白胺酸为Ile或I；白胺酸为Leu或L；离胺酸为Lys或K；甲硫胺酸为Met或M；苯丙胺酸为Phe或F；脯胺酸为Pro或P；丝胺酸为Ser或S；苏胺酸为Thr或T；色胺酸为Trp或W；酪胺酸为Tyr或Y；且缬胺酸为Val或V。具有疏水性侧链的氨基酸包括以下的非限制性实例：丙胺酸(A)、异白胺酸(I)、白胺酸(L)、甲硫胺酸(M)、苯丙胺酸(F)、色胺酸(W)、酪胺酸(Y)及缬胺酸(V)。具有亲水性侧链的氨基酸包括以下的非限制性实例：甘胺酸(G)、天冬酰胺(N)、麸酰胺酸(Q)、丝胺酸(S)、苏胺酸(T)及半胱胺酸(C)。具有碱性侧链的氨基酸包括以下的非限制性实例：组胺酸(H)、离胺酸(K)及精胺酸(R)。具有酸性侧链的氨基酸包括以下的非限制性实例：天冬胺酸(D)及麸胺酸(E)。在典型生理学条件下，具有带正电侧链的氨基酸包括以下的非限制性实例：精胺酸(R)、组胺酸(H)及离胺酸(K)。在典型生理学条件下，具有带负电侧链的氨基酸包括以下的非限制性实例：天冬胺酸(D)及麸胺酸(E)。具有两极不带电侧链的氨基酸包括以下的非限制性实例：丝胺酸(S)、苏胺酸(T)、天冬酰胺(N)及麸酰胺酸(Q)。非天然氨基酸包括(但不限于)氮杂环丁烷羧酸、2-胺基己二酸、3-胺基己二酸、β-丙胺酸、萘基丙胺酸(“naph”)、胺丙酸、2-胺基丁酸、4-胺基丁酸、6-胺基己酸、2-胺基庚酸、2-胺基异丁酸、3-胺基异丁酸、2-胺基庚二酸、第三丁基甘胺酸(“tBuG”)、2,4-二胺基异丁酸、锁链赖胺酸(desmosine)、2,2'-二胺基庚二酸、2,3-二胺基丙酸、N-乙基甘胺酸、N-乙基天冬酰胺、高脯胺酸(“hPro”或“homoP”)、羟基离胺酸、别-羟基离胺酸、3-羟基脯胺酸(“3Hyp”)、4-羟基脯胺酸(“4Hyp”)、异锁链赖胺酸(isodesmosine)、别-异白胺酸、N-甲基丙胺酸(“MeAla”或“Nime”)、包括N-甲基甘胺酸的N-烷基甘胺酸(“NAG”)、N-甲基异白胺酸、包括N-甲基戊基甘胺酸的N-烷基戊基甘胺酸(“NAPG”)。N-甲基缬胺酸、萘基丙胺酸、正缬胺酸(“Norval”)、正白胺酸(“Norleu”)、辛基甘胺酸(“OctG”)、鸟胺酸(“Orn”)、戊基甘胺酸(“pG”或“PGly”)、六氢烟生佥酸、硫代脯胺酸(“ThioP”或“tPro”)、高离胺酸(“hLys”)及高精胺酸(“hArg”)。如本文所使用，“野生型”(wt)是指一个物种中聚核苷酸、多肽或蛋白质的天然形式(包括序列)的术语。野生型形式与基因突变引起的聚核苷酸、多肽或蛋白质的突变形式不同。...

【技术保护点】
1.一种肽，其包含如下式I中所示的氨基酸序列，/nX

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170428 US 62/491,5641.一种肽，其包含如下式I中所示的氨基酸序列，
X1-X2-X3-X4-X5-X6-X7-X8(I)
其中X1选自具有疏水性侧链的氨基酸；X2选自具有碱性侧链的氨基酸、具有酸性侧链的氨基酸或具有疏水性侧链的氨基酸；X3选自具有疏水性侧链的氨基酸；X4选自具有疏水性侧链的氨基酸；X5选自具有碱性侧链的氨基酸、具有酸性侧链的氨基酸或具有疏水性侧链的氨基酸；X6选自具有疏水性侧链的氨基酸；X7选自具有疏水性侧链的氨基酸或具有亲水性侧链的氨基酸；且X8选自具有疏水性侧链的氨基酸或具有亲水性侧链的氨基酸；
或经修饰的肽或其盐。


2.如权利要求1的肽，其中X1选自F、A、Y及W；X2选自H、K、R、A及E；X3选自I或A；X4选自V及A；X5选自E、D、H、Orn、A及H；X6选自L及A；X7选自L及S且X8选自A及S；或经修饰的肽或其盐。


3.如权利要求1的肽，其包含FHIVELLA(LT1-3)(SEQIDNO:9)、FHAVELLA(LT-A3)(SEQIDNO:10)、FKAVELLA(LT-K2)(SEQIDNO:11)、FRAVELLA(LT-R2)(SEQIDNO:12)、FHAVDLLA(LT-D5)(SEQIDNO:13)、FHAVHLLA(LT-H5)(SEQIDNO:14)、FHAVOLLA(LT-Orn5)(SEQIDNO:15)、AHAVELLA(LT-A13)(SEQIDNO:16)、FHAAELLA(LT-A34)(SEQIDNO:17)、FHAVEALA(LT-A36)(SEQIDNO:18)、FHAAEALA(LT-A346)(SEQIDNO:19)、FAIVALLA(LT-A25)(LT-A2)(SEQIDNO:20)、FEAVHLLA(LT-E2H5)(SEQIDNO:21)、YHAVELLA(LT-Y1)(SEQIDNO:22)、WHAVELLA(LT-W1)(SEQIDNO:23)、FHAVELSA(LT-S7)(SEQIDNO:24)、FHAVELLS(LT-S8)(SEQIDNO:25)、DGNFHIVELLA(LT-11AA)(SEQIDNO:26)、AHIVELLA(LT-A1)(SEQIDNO:27)、FAIVELLA(LT-A2)(SEQIDNO:28)、FHIAELLA(LT-A4)(SEQIDNO:29)、FHIVALLA(LT-A5)(SEQIDNO:30)、FHIVEALA(LT-A6)(SEQIDNO:31)、FHIVELAA(LT-A7)(SEQIDNO:32)，或包含以下氨基酸序列的肽：所述氨基酸序列在阐述于SEQIDNO:9至SEQIDNO:32中任一者中的所述氨基酸序列中具有一种或数种氨基酸取代、缺失及/或添加且其活性等于或高于阐述于SEQIDNO:9至SEQIDNO:32中任一者中的所述氨基酸序列的活性；或经修饰的肽或其盐。


4.如权利要求1的肽，其包含氨基酸序列FHIVELLA(SEQIDNO:9)或FHAVELLA(SEQIDNO:10)；或经修饰的肽或其盐。


5.如权利要求1至4中任一项的肽，其中所述经修饰的肽具有改良的稳定性或溶解性。


6.如权利要求1至4中任一项的肽，其中所述经修饰的肽为环肽、聚乙二醇化肽或茀基甲氧基羰基(Fmoc)-肽。


7.如权利要求1至4中任一项的肽，其中所述经修饰的肽为Fmoc-肽，其中Fmoc结合至包含选自由SEQIDNO:9至SEQIDNO:32组成的群的氨基酸序列的肽的N端或C端...

【专利技术属性】
技术研发人员：菁华·蔡张，龙凤娣，
申请(专利权)人：中山医学大学，东海大学，
类型：发明
国别省市：中国台湾;71