小檗碱在防治牙髓炎中的应用制造技术

本发明专利技术公开了小檗碱在防治牙髓炎中的应用。小檗碱能够促进LPS‑HDPF细胞增殖，降低炎症因子IL‑1β、IL‑6和TNF‑α的表达水平，且上调miR‑21表达水平，下调KBTBD7的表达水平；过表达miR‑21或沉默KBTBD7可加强BBR对LPS‑HDPF细胞增殖的促进作用，显著性抑制炎症因子水平；miR‑21靶向负调节KBTBD7；在BBR处理LPS‑HDPF细胞中，miR‑21inhibitor促进IKK、p65磷酸化水平，抑制IκBα蛋白的表达，沉默KBTBD7抑制IKK、p65磷酸化水平，促进IκBα蛋白的表达。

Application of berberine in prevention and treatment of pulpitis

【技术实现步骤摘要】
小檗碱在防治牙髓炎中的应用
本专利技术属于医药
，具体涉及到一种小檗碱在防治牙髓炎中的应用。
技术介绍
牙髓炎是指发生于牙髓组织的炎性病变。牙髓是主要包含神经血管的疏松结缔组织，位于牙齿内部的牙髓腔内。深龋、楔状缺损等牙体硬组织疾病如不能得到及时有效地控制和治疗，均可引发牙髓炎，成为口腔中最为多发和常见的疾病之一。专利CN107970259A公开了一种治疗急性牙髓炎的药物组合物，其包括吗啉硝唑、人工牛黄和苦参碱，实验结果表明，三种药物具有显著的协同作用，具有良好的抗菌抗炎效果。专利CN106047908B公开了靶向人JNK1基因的小干扰RNA及其应用，该RNA能在JNK1基因的转录后进行干扰，降低炎症牙髓干细胞中p-JNK的表达，特异性降低牙髓干细胞的凋亡，促进牙髓干细胞的成牙本质分化，可为治疗牙髓炎提供新的方案。成纤维细胞是来源于疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来，而牙髓成纤细胞作为牙髓中的主体细胞，故又称为牙髓细胞，它在牙髓组织创伤修复过程中发挥重要作用，其合成的基质包绕和支持着牙髓组织中各种有形成分，并且是血管和细胞之间传递营养和废料的重要介质，同时，对于抵抗外界的细菌和毒素产物，牙髓细胞在牙髓组织中又是一道先天屏障发挥作用。因此，牙髓细胞的健康状态往往反映了牙髓活动及抵御外界有害刺激的潜能。小檗碱(BBR)，是从我国传统中药黄连中提取出的生物碱。小檗碱一直作为抗感染药物应用于临床，其不但具有抗菌作用，对病毒和真菌感染有一定的作用。多年的临床研究发现，小檗碱可用于治疗阿尔兹海默症、帕金森病、抑郁症、肺动脉高压等疾病。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种防治牙髓炎的药物。为了实现上述目的，本专利技术采用以下技术方案：小檗碱在防治牙髓炎中的应用。小檗碱在防治内毒素脂多糖(LPS)诱导的牙髓炎中的应用。小檗碱能够促进LPS-HDPF细胞增殖，降低炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α的表达水平，且上调miR-21表达水平，下调KBTBD7的表达水平；过表达miR-21或沉默KBTBD7可加强BBR对LPS-HDPF细胞增殖的促进作用，显著性抑制炎症因子水平；miR-21靶向负调节KBTBD7；在BBR处理LPS-HDPF细胞中，miR-21inhibitor促进IKK、p65磷酸化水平，抑制IκBα蛋白的表达，沉默KBTBD7抑制IKK、p65磷酸化水平，促进IκBα蛋白的表达。所述小檗碱的有效剂量≥25uM。一种防治牙髓炎的药物，有效成分为小檗碱，小檗碱通过miR-21/KBTBD7轴调控NF-κB信号通路促进LPS-HDPF细胞增殖，抑制细胞炎症水平，达到调控人牙髓成纤维细胞炎症因子的分泌的目的。所述防治牙髓炎的药物还包括药学上可接受的赋型剂，所述药学上可接受的赋型剂是指任何可用于药学领域的稀释剂、辅助剂和/或载体。用于本专利技术药物组合物的赋型剂是药学领域中可得到的常见类型，包括：口服制剂用的粘合剂、润滑剂、崩解剂、助溶剂、稀释剂、稳定剂、悬浮剂、无色素、矫味剂等；可注射制剂用的防腐剂、加溶剂、稳定剂等；局部制剂用的基质、稀释剂、润滑剂、防腐剂等。药物制剂可以经口服或胃肠外方式(例如静脉内、皮下、腹膜内或局部)给药，如果某些药物在胃部条件下是不稳定的，可将其配制成肠衣片剂。本专利技术涉及的药物组合物可配制成若干种剂型，例如，口服制剂(如片剂，胶囊剂，溶液或混悬液)；可注射的制剂(如可注射的溶液或混悬液，或者是可注射的干燥粉末，在注射前加入注射用水可立即使用)；局部制剂(例如软膏或溶液)。本专利技术涉及的药物组合物可以制成药物、食品、保健食品、饮品、肠内营养制剂、膳食补充剂。本专利技术与现有技术相比，小檗碱通过miR-21/KBTBD7轴调控NF-κB信号通路促进LPS-HDPF细胞增殖，抑制细胞炎症水平，这为如何调控人牙髓成纤维细胞炎症因子的分泌提供了新的机制，对防治牙髓炎具有十分重要的意义。附图说明：图1为实施例1中第4代HDPF细胞的显微镜照片，其中(A)显微镜观察分离培养的HDPF细胞形态图；(B)免疫细胞化学检测HDPF中波形蛋白特征图；(C)免疫细胞化学检测HDPF中角蛋白特征图；(D)免疫细胞化学检测FSP的表达图；(E)免疫细胞化学检测Stro-1的表达图。图2为实施例1中不同浓度LPS诱导后HDPF的MTT曲线图。图3为实施例1中不同浓度LPS诱导后HDPF细胞经EdU荧光染色得到的高倍显微镜照片(左)及MetaXpress软件分析细胞平均荧光强度图(右)，定量为EdU阳性细胞数量。图4为实施例1中ELISA检测不同浓度LPS诱导后HDPF细胞上清液中IL-1β、IL-6及TNF-α的含量图，其中，*P<0.05。图5为实施例2不同处理组HDPF细胞的MTT曲线图。图6为实施例2中不同处理组HDPF细胞经EdU荧光染色得到的高倍显微镜照片(左)及MetaXpress软件分析细胞平均荧光强度图(右)，定量为EdU阳性细胞数量。图7为实施例2中ELISA检测不同处理组HDPF细胞上清液中IL-1β、IL-6及TNF-α的含量图。图8为实施例2中不同处理组HDPE细胞经定量RT-PCR检测miR-21(左)和KBTBD7mRNA(右)的表达水平图。图9为实施例2中不同处理组HDPF细胞经Westernblot检测KBTBD7蛋白表达水平图。图10为实施例2中不同处理组HDPF细胞的显微镜照片。图11为实施例3中不同处理组HDPE细胞经定量RT-PCR检测miR-21(左)和KBTBD7mRNA(右)的表达水平图。图12为实施例3中不处理同组HDPF细胞经Westernblot检测KBTBD7蛋白表达水平图。图13为实施例3中不同处理组HDPF细胞的MTT曲线图。图14为实施例3中不同处理组HDPF细胞的MTT曲线图。图15为实施例3中不同处理组HDPF细胞经EdU荧光染色得到的高倍显微镜照片(左)及MetaXpress软件分析细胞平均荧光强度图(右)，定量为EdU阳性细胞数量。图16为实施例3中不同处理组HDPF细胞经EdU荧光染色得到的高倍显微镜照片(左)及MetaXpress软件分析细胞平均荧光强度图(右)，定量为EdU阳性细胞数量。图17为实施例3中ELISA检测不同处理组HDPF细胞上清液中IL-1β、IL-6及TNF-α的含量图。图18为实施例3中ELISA检测不同处理组HDPF细胞上清液中IL-1β、IL-6及TNF-α的含量图。图19为生物信息学软件Starbase预测KBTBD7与miR-21-5p的靶向位点及设计的KBTBD7突变位点。图20为实施例3中经不同处理组HDPE细胞经定量RT-PCR检测miR-21(左)和KBTBD7mRNA(右)的表达水平图。图21为实施例3中经不同处理组HDPF细胞经W本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.小檗碱在防治牙髓炎中的应用。/n

【技术特征摘要】
1.小檗碱在防治牙髓炎中的应用。


2.小檗碱在防治内毒素脂多糖诱导的牙髓炎中的应用。


3.根据权利要求2所述的小檗碱在防治内毒素脂多糖诱导的牙髓炎中的应用，其特征在于，所述小檗碱的...

【专利技术属性】
技术研发人员：辛秉昌，孙德刚，宋佳，吴迪，滕娜娜，
申请(专利权)人：青岛市口腔医院，
类型：发明
国别省市：山东;37