萝卜硫烷的新用途及包含其的药物组合物制造技术

本申请实施例提供了萝卜硫烷用于制备TFEB激活剂以及用于制备治疗和/或预防溶酶体贮积症的药物的新用途，及包含其的药物组合物；本申请的实施例证实萝卜硫烷能够通过激活TFEB，促进溶酶体的生物合成，提高溶酶体的活性，从而降解溶酶体中的贮积物；由于萝卜硫烷具有上述功能，因此可以用于制备治疗和/或预防溶酶体贮积症的药物。

New uses of sulforaphane and pharmaceutical compositions thereof

【技术实现步骤摘要】
萝卜硫烷的新用途及包含其的药物组合物
本申请涉及萝卜硫烷新用途
，特别是涉及萝卜硫烷的新用途及包含其的药物组合物。
技术介绍
转录因子EB(TranscriptionalFactorEB,TFEB)能够通过识别某些溶酶体基因的启动子，促进溶酶体相关基因的表达；TFEB在各种细胞应激条件下调节细胞稳态；正常状态下，TFEB存在于细胞质中，并处于失活状态，当细胞受到某些外界刺激时，TFEB被激活，并迅速转位进入细胞核中，激活其下游靶基因的转录。溶酶体贮积症(Lysosomalstoragedisease，LSD)是一组遗传性代谢疾病，是由于溶酶体功能的异常，导致机体中相应的生物大分子不能正常降解而在溶酶体中贮积，引起细胞组织器官功能的障碍；目前，溶酶体贮积症还没有有效的治疗药物。萝卜硫烷(Sulforaphane，SFN)富含于西兰花、芥兰等多种蔬菜中，结构式如式1所示；已有研究表明，萝卜硫烷具有抗氧化活性，以及很强的抗癌活性，已经证实其对多种癌症具有抑制作用。
技术实现思路
本申请的专利技术人在对萝卜硫烷的深入研究中，意外地发现萝卜硫烷能够激活转录因子EB(TFEB)，可以作为转录因子EB的激活剂，并基于此完成了本申请。具体技术方案如下：本申请第一方面提供了一种转录因子EB激活剂组合物，其包含萝卜硫烷及药学上可接受的载体。在本申请第一方面的一些实施方式中，以所述组合物的总重量为基准，所述萝卜硫烷的含量为1-99重量％，优选为20-80重量％，更优选为40-60重量％。本申请第二方面提供了萝卜硫烷在制备转录因子EB激活剂中的用途。本申请第三方面提供了一种用于治疗和/或预防溶酶体贮积症的药物组合物，其包含萝卜硫烷及药学上可接受的载体。在本申请第三方面的一些实施方式中，所述溶酶体贮积症选自黏多糖贮积症、黏脂质贮积症、神经鞘脂贮积症、寡糖贮积症和糖原贮积症Ⅱ型中的至少一种。在本申请第三方面的一些实施方式中，所述神经鞘脂贮积症为C型尼曼匹克病(Niemann-PicktypeC，NPC)。在本申请第三方面的一些实施方式中，以所述药物组合物的总重量为基准，所述萝卜硫烷的含量为1-99重量％，优选为20-80重量％，更优选为40-60重量％。本申请第四方面提供了萝卜硫烷在制备治疗和/或预防溶酶体贮积症的药物中的用途。在本申请第四方面的一些实施方式中，所述溶酶体贮积症选自黏多糖贮积症、黏脂质贮积症、神经鞘脂贮积症、寡糖贮积症和糖原贮积症Ⅱ型中的至少一种。在本申请第四方面的一些实施方式中，所述神经鞘脂贮积症为C型尼曼匹克病。本申请第五方面还提供了一种治疗有需要的患者的溶酶体贮积症的方法，包括向患者施用本申请第一方面的转录因子EB激活剂组合物或本申请第三方面的药物组合物。在本申请第五方面的一些实施方式中，所述溶酶体贮积症选自黏多糖贮积症、黏脂质贮积症、神经鞘脂贮积症、寡糖贮积症和糖原贮积症Ⅱ型中的至少一种。在本申请第五方面的一些实施方式中，所述神经鞘脂贮积症为C型尼曼匹克病。本申请中所用的术语一般为本领域技术人员常用的术语，如果与常用术语不一致，以本申请中的术语为准。如本文使用的，术语“治疗”具有其一般含义，并且在本文特别地是指对已经罹患溶酶体贮积症进行处理，以期对该疾病产生治疗、治愈、缓解、减轻等作用。类似地，如本文使用的，术语“预防”具有其一般含义，并且在本文特别地是指对可能罹患本申请所述溶酶体贮积症或者对本申请所述溶酶体贮积症具有罹患风险的个体采用本申请的药物进行处理，以期对所述疾病产生防止、预防、阻止、隔断等作用。如本文所用的，“药学上可接受的”表示当以通常用药剂量使用时没有实质的毒性作用，从而可被政府或与其相当的国际组织批准或者已被批准用于动物，更特别地用于人，或者被登录在药典上。本申请公开了萝卜硫烷通过激活TFEB，上调溶酶体相关基因的表达水平，进而促进溶酶体的生物合成以及提高溶酶体活性，促进溶酶体中贮积物的降解，从而起到治疗和/或预防溶酶体贮积症的作用。附图说明为了更清楚地说明本申请实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本申请的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。图1显示了萝卜硫烷诱导的TFEB核迁移以及TFEB下游靶基因的表达；其中a图为萝卜硫烷引起HeLa细胞中TFEB由细胞质向细胞核转移的免疫荧光结果；b图为a图的TFEB入核比例的定量结果；c图为萝卜硫烷诱导1321N1细胞中TFEB核迁移的免疫荧光结果；d图为萝卜硫烷诱导部分TFEB靶基因表达的实时定量PCR结果；图2显示了萝卜硫烷促进溶酶体的生物合成以及提高溶酶体功能；其中a图为LAMP1蛋白的免疫荧光染色结果；b图为a图的荧光强度定量结果；c图为LAMP1蛋白表达的WB结果；d图为c图的定量结果；e图为溶酶体的酸性标记物LysoTracker染色结果；f图为e图的荧光强度定量结果；图3显示了LAMP1蛋白表达对萝卜硫烷具有浓度依赖性；其中a图为不同浓度萝卜硫烷处理HeLa细胞后LAMP1的表达情况；b图为a图的荧光强度定量结果；图4显示了稳定高表达GFP-TFEB的HeLa细胞中，萝卜硫烷促进TFEB核迁移和LAMP1高表达；图5显示了SFN通过TFEB降低NPC细胞中氧化应激水平；其中a图为NPC细胞中siRNA敲低TFEB表达结果；b图为萝卜硫烷处理或未处理的NPC细胞，随机siRNA处理的NPC细胞，以及TFEB敲低表达的NPC细胞中ROS荧光检测的结果；c图为b图的定量分析；图6显示了萝卜硫烷促进NPC细胞中TFEB核迁移；图7显示了萝卜硫烷降低NPC细胞中胆固醇的贮积。具体实施方式以下对本申请的实施方式进行详细说明。转录因子EB激活剂组合物本申请提供的转录因子EB激活剂组合物，其包含萝卜硫烷及药学上可接受的载体。萝卜硫烷是一种已知的化合物，已有研究表明，萝卜硫烷具有抗癌活性，已经证实其对多种癌症具有抑制作用。而本申请的专利技术人通过对萝卜硫烷进行深入研究后，意外地发现，萝卜硫烷能够激活转录因子EB；基于此可以作为活性组分制备出转录因子EB激活剂组合物。在本申请的一些实施方式中，以所述组合物的总重量为基准，所述萝卜硫烷的含量为1-99重量％，优选为20-80重量％，更优选为40-60重量％。针对药学上可接受的载体，本申请没有特别限定。可以采用本领域技术人员公知的任何载体。具体而言，例如可以使用溶剂、稀释剂、分散剂、助悬剂、表面活性剂、等渗剂、增稠剂、乳化剂、防腐剂、粘合剂、润滑剂、稳定剂、水合剂、乳化加速剂、缓冲剂、吸收剂、着色剂、香味剂、甜味剂、离子交换剂、脱模剂、涂布剂、矫味剂和抗氧化剂中的至少一种。上述药学上可接受本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种转录因子EB激活剂组合物，其包含萝卜硫烷及药学上可接受的载体。/n

【技术特征摘要】
1.一种转录因子EB激活剂组合物，其包含萝卜硫烷及药学上可接受的载体。


2.如权利要求1所述的转录因子EB激活剂组合物，其中，以所述组合物的总重量为基准，所述萝卜硫烷的含量为1-99重量％，优选为20-80重量％，更优选为40-60重量％。


3.萝卜硫烷在制备转录因子EB激活剂中的用途。


4.一种用于治疗和/或预防溶酶体贮积症的药物组合物，其包含萝卜硫烷及药学上可接受的载体。


5.如权利要求4所述的药物组合物，其中，所述溶酶体贮积症选自黏多糖贮积症、黏脂质贮积症、神经鞘脂贮积症、寡糖贮积症和糖原贮积症Ⅱ型中的至少一种。

【专利技术属性】
技术研发人员：李丹，徐浩新，
申请(专利权)人：浙江工业大学，密西根大学，
类型：发明
国别省市：浙江;33