基于多层高分子多孔膜的荧光免疫检测方法、装置及应用制造方法及图纸

本发明专利技术涉及基于多层高分子多孔膜的荧光免疫检测方法、装置及应用，配置过量未标记特异性抗体Ab和荧光标记的特异性抗体Ab+，与含待测抗原Ag的检测样本混合获得混合溶液A，倒入第一分离腔、以第一多孔膜层分离得到混合溶液B，导入第二分离腔、以第二多孔膜层分离后检测膜上荧光强度，获得检测样本中待测抗原的浓度；应用于针对大分子量蛋白的双抗体夹心荧光免疫法检测。本发明专利技术利用高分子多孔膜的不同分离尺寸，分离不同颗粒，获取被标记待测物抗原，检测荧光强度获得待测物的浓度信息；通过不同孔径控制反应物的分离，原理简单，配合可分离的多层试剂管，操作简单，结果准确度高，不需大型设备且可以自动化或人工同时完成多组检测。

Fluorescence immunoassay method, device and application based on multilayer polymer porous membrane

【技术实现步骤摘要】
基于多层高分子多孔膜的荧光免疫检测方法、装置及应用
本专利技术涉及利用特殊方法来研究或分析材料的
，特别涉及一种基于多层高分子多孔膜的荧光免疫检测方法、装置及应用。
技术介绍
以荧光物质标记抗体、进行抗原定位的技术称为荧光抗体技术（fluorescentantibodytechnique），用荧光抗体示踪或检查相应抗原的方法称为荧光抗体法；用已知的荧光抗原标记物示踪或检查相应抗体的方法称荧光抗原法，这两种方法总称为免疫荧光技术。现有的荧光免疫检测方法包括免疫层析试纸条技术和免疫磁珠检验技术。免疫层析（lateralflowimmunoassay,LFIA）快速检测试纸条多以胶体金或者荧光色素作为标记物，是利用混合物中各组分的物理性质之差，如吸附力、分子形状和大小、分子极性、分子亲和力、分配系数等而建立来的一种分离技术；层析系统是由固相和流动相组成，当待分离混合物随流动相通过固定相时，由于混合物各组分的理化性质差异，与固定相相互作用弱的组分随流动相移动时受到的阻滞作用小，向前移动速度快，与固定相相互作用强的组分向前移动速度慢本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基于多层高分子多孔膜的荧光免疫检测方法，其特征在于：所述方法包括以下步骤：/n步骤1：获取检测样本，所述检测样本中含有待测抗原Ag；/n步骤2：基于待测抗原，配置过量未标记特异性抗体Ab和进行荧光标记的特异性抗体Ab+；将检测样本和抗体Ab、抗体Ab+混合并充分反应，获得混合溶液A；/n步骤3：将混合溶液A以第一多孔膜层分离，第一多孔膜层分离直径大于预设直径的大细胞和/或大蛋白，得到混合溶液B；/n步骤4：将混合溶液B以第二多孔膜层分离，检测荧光强度，获得检测样本中待测抗原的浓度。/n

【技术特征摘要】
1.一种基于多层高分子多孔膜的荧光免疫检测方法，其特征在于：所述方法包括以下步骤：
步骤1：获取检测样本，所述检测样本中含有待测抗原Ag；
步骤2：基于待测抗原，配置过量未标记特异性抗体Ab和进行荧光标记的特异性抗体Ab+；将检测样本和抗体Ab、抗体Ab+混合并充分反应，获得混合溶液A；
步骤3：将混合溶液A以第一多孔膜层分离，第一多孔膜层分离直径大于预设直径的大细胞和/或大蛋白，得到混合溶液B；
步骤4：将混合溶液B以第二多孔膜层分离，检测荧光强度，获得检测样本中待测抗原的浓度。


2.根据权利要求1所述的一种基于多层高分子多孔膜的荧光免疫检测方法，其特征在于：所述混合溶液B包括检测样本和抗体Ab、抗体Ab+混合并充分反应后得到的双抗夹心蛋白Ab+-Ag-Ab、过量的抗体Ab、过量的抗体Ab+。


3.根据权利要求1所述的一种基于多层高分子多孔膜的荧光免疫检测方法，其特征在于：所述抗体Ab的直径大于抗体Ab+的直径。


4.根据权利要求3所述的一种基于多层高分子多孔膜的荧光免疫检测方法，其特征在于：所述抗体Ab的直径大于等于200nm。


5.根据权利要求3所述的一种基于多层高分子多孔膜的荧光免疫检测方法，其特征在于：步骤4中，第二多孔膜层的膜孔直径小于抗体Ab的直径且大于抗体Ab+的直径。


6.根据权利要求5所述的一种基于多层高分子多孔膜的荧光免疫检测方法，其特征在于：所述步骤4...

【专利技术属性】
技术研发人员：龚培超，蒋凯，张涛，
申请(专利权)人：苏州和迈精密仪器有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32