改进造血移植物的方法技术

本发明专利技术涉及一种制备造血细胞移植物或从细胞群体中富集能够长期多谱系植入和自我更新的造血干细胞的方法。本发明专利技术还涉及包含所述造血干细胞的造血移植物以及它们在疗法中的用途。

Improving the method of hematopoietic transplantation

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】改进造血移植物的方法
本专利技术涉及医学领域，特别是涉及人类造血移植物。具体来说，本专利技术涉及能够长期多谱系植入和自我更新的造血干细胞、即适合于造血移植的造血干细胞的鉴定和选择。
技术介绍
造血干细胞(HSC)是人类骨髓(BM)和血液中的稀有细胞，其在血液疾病中或在放疗/化疗后负责同种异体造血细胞移植的终生治愈性效果。这些细胞可以从包括BM、动员的外周血或人类脐带血的几种来源收获。脐带血提供了几种优点，即对HLA匹配的需求减少和移植物抗宿主疾病的风险降低。然而，尽管在HSC的操作中取得进展，但它们的数目通常仍不足以用于同种异体移植，并且得到的细胞与新鲜分离的HSC相比表现出较低的多谱系和植入潜力。在这些发现的基础上，从非造血来源产生可移植的HSC看来是再生医学中的主要目标之一。已开发了大量方案，它们利用多种细胞类型的直接转化，包括细胞融合、通过转录因子的强制表达引起的分化细胞的重编程，或从人类多能干细胞的定向分化(Wahlster和Daley，Naturecellbiology,2016,18,1111-1117)。在许多情况下，在受本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种制备造血细胞移植物或从细胞群体中富集能够长期多谱系植入和自我更新的造血干细胞的体外方法，所述方法包括：/na)提供包含造血干细胞的细胞群体，以及/nb)在细胞表面抗原CD135和/或CD110的表达的基础上分拣所述群体的细胞，以及/nc)回收CD135+和/或CD110+细胞。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170321 EP 17305318.21.一种制备造血细胞移植物或从细胞群体中富集能够长期多谱系植入和自我更新的造血干细胞的体外方法，所述方法包括：
a)提供包含造血干细胞的细胞群体，以及
b)在细胞表面抗原CD135和/或CD110的表达的基础上分拣所述群体的细胞，以及
c)回收CD135+和/或CD110+细胞。


2.根据权利要求1所述的方法，其中在步骤b)中在细胞表面抗原CD110的表达的基础上分拣细胞，并且在步骤c)中回收的细胞是CD110+。


3.根据权利要求2所述的方法，其中在步骤b)中在细胞表面抗原CD135的表达的基础上进一步分拣细胞，并且在步骤c)中回收的细胞是CD110+CD135+。


4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，所述方法还包括在步骤b)之前、之后或同时，在apelin受体(APLNR)的表达的基础上分拣细胞并回收APLNR+细胞。


5.权利要求1至4中任一项的方法，其中在步骤a)中提供的细胞群体包含从外周血、胎盘血、脐带血、骨髓、肝脏和/或脾脏获得的造血干细胞和/或包含永生化造血干细胞。


6.权利要求1至5中任一项的方法，其中在步骤a)中提供的细胞群体包含从多能干细胞的体外分化获得的造血干细胞，所述多能干细胞优选选自诱导多能干细胞或胚胎干细胞，更优选诱导多能干细胞。


7.权利要求6的方法，其中所述方法在步骤a)之前还包括：
提供多能干细胞，优选诱导多能干细胞，
诱导拟胚体(EB)形成，
在引发所述多能干细胞分化成内皮-造血谱系的液体培养基中培养EB，并且
解离EB细胞，
由此获得在步骤a)中提供的细胞群体。


8.权利要求7的方法，其中所述液体培养基包含干细胞因子(SCF)、血小板生成素(TPO)、FMS样酪氨酸激酶3(FLT3)配体、骨形态发生蛋白4(BMP4)、血管内皮生长因子(VEGF)、白介素3(IL3)、白介素6(IL6)、白介素1(IL1)、粒细胞集落刺激因子(GCSF)和胰岛素样生长因子1(IGF1)。


9.权利要求7和8的方法，其中所述多能干细胞在所述液体培养基中培养14至19天，优选15至18天，更优选17天。


10.CD135和/或CD110作为能够植入、特别是能够长期多谱系植入和自我更新的造血干细胞的标志物的用途。


11.一种造血细胞移植物，其包含细胞和可药用载体，其中至少10％的细胞是CD135+和/或CD110+造血干细胞，优选至少10％的细胞是CD110+造血干细胞。


12.一种根据权利要求1至9中任一项的方法制备的造血细胞移植物。


13.权利要求11或12的造血细胞移植物，其用于治疗恶性疾病例如多发性骨髓瘤、非霍奇金淋巴瘤、霍奇金病、急性髓系白血病、急性成淋巴细胞性白血病、慢性髓系白血病、骨髓增生异常综合征、骨髓增殖性障碍、慢性淋巴细胞性白血病、幼年型慢性髓系白血病、神经母细胞瘤、卵巢癌和生殖细胞肿瘤，或非恶性疾病例如自体免疫性障碍、淀粉样变性、再生障碍性贫血、阵发性睡眠性血红蛋白尿症、范...

【专利技术属性】
技术研发人员：劳伦斯·居约诺哈尔曼德，克里斯托夫·德斯特克，蒂埃里·贾弗雷多，阿兰·查佩尔，卢瓦克·加伦，卢克·杜艾，
申请(专利权)人：法国血液机构，法国国家卫生及研究医学协会，巴黎第十一大学，法国国家科学研究中心，放射防护与核安全研究所，索邦大学，
类型：发明
国别省市：法国;FR