一种检测四水合辅羧酶杂质A含量的方法技术

本发明专利技术提供一种四水合辅羧酶杂质A的检测方法，利用高效液相色谱仪，检测条件为：十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱，流动相A：含己烷磺酸钠或类似效能离子对(如庚烷磺酸钠、辛烷磺酸钠等磺酸钠离子对试剂)的磷酸盐缓冲溶液，流动相B：甲醇、乙腈、流动相A‑甲醇或流动相A‑乙腈中的任一种，流动相A、B按梯度程序进行；流速：0.8‑1.2ml/min，柱温：30‑50℃，检测波长：240‑270nm，进样量：20μl。该检测方法准确度灵敏度高，适于检测四水合辅羧酶原料或维生素制剂中四水合辅羧酶杂质A的含量。

A method for the determination of impurity a in CO carboxylase tetrahydrate

【技术实现步骤摘要】
一种检测四水合辅羧酶杂质A含量的方法
本专利技术属于分析化学领域，具体涉及一种检测四水合辅羧酶中杂质A含量的高效液相分析方法。
技术介绍
四水合辅羧酶为维生素类药，在体内参与糖代谢中丙酮酸和a-酮戊二酸的氧化脱羧反应，是糖类代谢所必需，临床上常用于脚气病或Wernicke脑病的治疗，亦可用于辅羧酶四水合物缺乏引起的周围神经炎、消化不良等的辅助治疗，目前也用作复方维生素制剂产品注射用多种维生素(12)的其中一种原料药。四水合辅羧酶杂质A(硫胺素一磷酸酯)为四水合辅羧酶的降解产物，其结构式为：在国内外药典中并未收载四水合辅羧酶的标准，在国家标(YBH03552014)四水合辅羧酶有关物质检查中，有四水合辅羧酶杂质A的检测，但是适用于原料的检验，不适合于含有四水合辅羧酶的复方制剂产品如注射用多种维生素(12)中四水合辅羧酶杂质A的检验，专属性不符合规定，且检测四水合辅羧酶杂质A的方法为衍生法，检测器为荧光检测器，操作繁琐，且样品处理方法并不适用。
技术实现思路
：为解决上述问题，本专利技术提供一种检测四水合辅羧酶原本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种检测四水合辅羧酶杂质A含量的方法，其特征在于，采用高效液相色谱仪测定，色谱条件为：/n色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱；/n流动相A：含己烷磺酸钠或类似效能的离子对磷酸盐缓冲溶液；/n流动相B：甲醇、乙腈、流动相A-甲醇或流动相A-乙腈中的任一种；/n流动相A、B按梯度程序进行，所述梯度洗脱程序为：/n

【技术特征摘要】
1.一种检测四水合辅羧酶杂质A含量的方法，其特征在于，采用高效液相色谱仪测定，色谱条件为：
色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱；
流动相A：含己烷磺酸钠或类似效能的离子对磷酸盐缓冲溶液；
流动相B：甲醇、乙腈、流动相A-甲醇或流动相A-乙腈中的任一种；
流动相A、B按梯度程序进行，所述梯度洗脱程序为：



流速：0.8-1.2ml/min；
柱温：30-50℃；
检测波长：240-270nm；
进样量：20μl。


2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述色谱柱为AgelaVenusilXBPC18(L)，250mm×4.6mm,5μm或与所述色谱柱效能相当的色谱柱。


3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述流动相A中己烷磺酸钠的浓度为1g/L-4g/L，磷酸盐缓冲溶液浓度为0.01mol/L-0.1mol/L；所述流动...

【专利技术属性】
技术研发人员：翟雪梅，许庆栋，陈俏，于珊珊，陶冶，王卫，张颖，
申请(专利权)人：济南康和医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37