一种重组siMACF1及其生产方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种重组siMACF1，所述重组siMACF1的序列如SEQ ID NO：1所示，或者为与SEQ ID NO：1所示序列相似度达90％以上的序列。另外，本发明专利技术还公开了该重组siMACF1的生产方法及应用。本发明专利技术通过检测骨肉瘤患者肿瘤组织及正常骨组织样本，发现MACF1在骨肉瘤组织中高表达，且MACF1表达水平与肿瘤细胞迁移及侵袭能力密切相关，提示MACF1可作为骨肉瘤治疗靶点；设计MACF1的siRNA后，以tRNA为支架，嵌合siMACF1序列，在大肠杆菌中表达重组siMACF1。本发明专利技术制备的重组siMACF1为通过生物工程技术获得，具有设备简便、产量高、成本低、功能性好等优势。

A recombined simacf1 and its production method and Application

【技术实现步骤摘要】
一种重组siMACF1及其生产方法和应用
本专利技术属于分子生物学及医学
，具体涉及一种重组siMACF1及其生产方法和应用。
技术介绍
骨肉瘤是最恶性的骨肿瘤之一，特别是发病人群主要集中于少年和青年阶段，约占整个年龄段的75％左右。骨肉瘤的转移性强，80％的患者都有侵袭周围组织的症状，会特异性的发生肺转移。目前，非转移性骨肉瘤患者的5年生存率已到70％，而发生肺转移的骨肉瘤患者的5年生存率只有20-30％，并成为骨肉瘤治疗的主要挑战。MACF1是细胞骨架交联蛋白，在不同细胞中广泛表达，参与了细胞定位运动，细胞极化，迁移，细胞信号转导和紧密连接等细胞生理功能，在胚胎发育、组织特异性功能以及人类的疾病中发挥着众多的功能。特别是最近几年，MACF1在肿瘤的发生和发展以及转移过程中的作用受到越来越多的关注，如神经胶质母细胞瘤、结肠癌，肺癌和乳腺癌。特别是Duhamel,S.,etal.研究表明MACF1通过参与乳腺癌细胞上皮型到间充质型的转换，促进癌细胞的转移。而对于MACF1在骨肉瘤的发生发展和转移过程中的功能，以及其在骨肉瘤治疗中的本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种重组siMACF1，其特征在于，所述重组siMACF1的序列如SEQ ID NO：1所示，或者为与SEQ ID NO：1所示序列相似度达90％以上的序列。/n

【技术特征摘要】
1.一种重组siMACF1，其特征在于，所述重组siMACF1的序列如SEQIDNO：1所示，或者为与SEQIDNO：1所示序列相似度达90％以上的序列。


2.一种如权利要求1所述重组siMACF1的生产方法，其特征在于，包括：以MACF1为靶基因，设计其小干扰RNAsiMACF1，将设计的小干扰RNAsiMACF1嵌合于tRNA支架，在大肠杆菌中重组表达；所述小干扰RNAsiMACF1的序列如SEQIDNO：2所示。


3.根据权利要求2所述的生产方法，其特征在于，所述tRNA支架的序列为与人丝氨酸tRNA序列相似度达90％以上的序列，所述人丝氨酸tRNA序列如SEQIDNO：3所示。


4.根据权利要求2所述的生产方法，其特征在于，小干扰RNAsiMACF1的前体序列为成熟序列部分被siMACF1序列取代的hsa-miR-34a前体序列，所述小干扰RNAsiMACF1的前体序列如SEQIDNO：4所示。


5.根据权利要求2至4中任一权利要求所述的生产方法，其特征在于，所述生产方法的具体步骤包括：

【专利技术属性】
技术研发人员：骞爱荣，杨超飞，田野，赵帆，王雪，黄倩，裴佳伟，陈志浩，骞婧，
申请(专利权)人：西北工业大学，西安荣清畅生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：陕西;61