一种鱼肉中土腥味物质的测定方法技术

本发明专利技术公开了一种鱼肉中土腥味物质的测定方法，该测定方法是以顺式‑十氢‑1‑萘酚溶液为内标制备的鱼肉为样品，采用顶空固相微萃取法提取样品中的土臭味素和2‑甲基异莰醇，再通过气相色谱质谱联用法进行的测定过程。采用顶空固相微萃取法提取鱼肉中的土腥味物质，以顺式‑十氢‑1‑萘酚为内标，气相色谱质谱联用法进行定性和定量测定，旨在建立鱼肉中土臭味素和2‑甲基异莰醇的检测方法，为养殖水产品异味物质脱除提供检测方法依据。

A method for the determination of earthy smell substance in fish meat

【技术实现步骤摘要】
一种鱼肉中土腥味物质的测定方法
本专利技术是一种鱼肉中土腥味物质的测定方法，具体涉及鱼肉中土腥味物质土臭味素和2-甲基异莰醇的提取、富集及检测方法，属于食品检测领域。
技术介绍
水产品是人类食品中优质动物蛋白的主要来源之一。我国是水产养殖第一大国，2018年全国水产品总产量为6457.66万吨，其中养殖产量为4991.06万吨。然而，部分养殖水产品的异味令消费者很难接受，是困扰水产养殖业已久的问题，直接影响到水产品的消费和养殖经济效益。据研究报道，土臭味素（土臭素）和2-甲基异莰醇是易引起水产品肉质产生异味最常见的两种化合物，是放线菌、蓝藻、蛋白细菌和真菌等微生物的次级代谢产物在萜烯合成酶的作用下产生的，参与这些生物合成的酶和基因最早是在链霉菌上发现的，后来也在蓝藻中发现了[1~3]。研究表明，人体对土臭味素和2-甲基异莰醇的嗅觉阈值分别为0.9μg/kg和0.6μg/kg[4,5]，水体中4~10ng/L的土臭味素和9~42ng/L的2-甲基异莰醇就能够使水体及水产品产生异味，当鱼肉组织中的这两种化合物浓度超过0.7μg/kg时，这样的鱼类就不再适合零售[6]。国内外相关从业者采用臭氧、乙酸、暂养等方法脱除或降低养殖水产品中的土腥味物质[7-11]。目前，有关土臭味素和2-甲基异莰醇的检测方法主要为气相色谱质谱联用法，GB/T32470-2016规定了顶空固相微萃取-气相色谱质谱联用法测定生活饮用水及其水源水中的土臭味素和2-甲基异莰醇。报告[13]记载了采用自动固相微萃取-气相色谱质谱联用法对饮用水中土臭味素和2-甲基异莰醇的高灵敏度检测，2-甲基异莰醇和土臭味素的方法检出限（MDL）分别可达到0.1343ppt和0.0937ppt，方法定量限（MQL）分别为0.4029ppt和0.2811ppt。由于鱼肉组织成分复杂，其中挥发性风味物质种类多，土腥味物质作为一类影响鱼肉品质的挥发性成分，具有提取和吸附难度大，干扰物质繁多，样品基质复杂的特点，检测难度较大。现有技术中，针对鱼肉组织中土臭味素和2-甲基异莰醇的提取和检测方法，如文献[14-16]报道的采用微波蒸馏－固相微萃取－气相色谱质谱联用法测定鲶鱼、罗非鱼肌肉中的土臭味素和2-甲基异莰醇，但由于微波蒸馏提取过程复杂、操作要求高，不易标准化，重复性、稳定性差。又如E.D.Ruan[17]采用SBSE-TD-GC-MS（搅拌棒吸收萃取－热脱附－气相色谱质谱联用仪）测定大西洋鲑肌肉中的土臭味素和2-甲基异莰醇含量，该方法需要用到热脱附装置，仪器投入大，土臭味素加标回收率达93~96%，但2-甲基异莰醇加标回收率仅为23~30%，2-甲基异莰醇回收率太低、不满足检测要求。参考文献DickschatJS,BodeHB,MahmudT，etal.Anoveltypeofgeosminbiosynthesisinmyxobacteria.JOURNALOFORGANICCHEMISTRY,2007,70（13）：5174-5182；[2]LudwigF.,MedgerA.,BörnickH.,etal.IdentificationandexpressionanalysesofputativesesquiterpenesynthasegenesinPhormidiumsp.andprevalenceofgeoA-likegenesinadrinkingwaterreservoir.Appl.Environ.Microbiol.2007.73（21）：6988–6993；[3]CaneD.E.,HeX.,Kobayashi,etal.GeosminbiosynthesisinStreptomycesavermitilis.MolecμLarcloning,expression,andmechanisticstudyofthegermacradienol/geosminsynthase.JOURNALOFANTIBIOTICS,2006,59（8）：471–479；[4]RobertsonRF,JaunceyK,BeveridgeMCMeta1.Depurationratesandthesensorythresholdconcentrationofgeosminresponsibleforearthy-mustytaintinrainbowtrout,Onchorhynchusmykiss[J]．AquacμLture，2005，245（4）：89—99；[5]Per-EdvinPersson.Sensorypropertiesandanalysisoftwomuddyodourcompounds,geosminand2-methylisoborneol,inwaterandfish.WaterResearch,1980,14（8）：1113-1118；[6]徐立蒲.鱼池中二甲基异莰醇和土臭味素的含量、来源及产生影响因素的研究[D].华中农业大学，2009；[7]KevinK.Schrader,JohnW.Davidson,AgnesM.Rimando,etal.Evaluationofozonationonlevelsoftheoff-flavorcompoundsgeosminand2-methylisoborneolinwaterandrainbowtroutOncorhynchusmykissfromrecircμLatingaquacμLturesystems[J].AquacμLturalEngineering,2010,43：46-50；[8]王国超.罗非鱼腥味物质成分检测及脱除方法的研究[D].中国海洋大学，2012；[9]ZhangT，XueY，LiZJ，etal.Effectsofozoneontheremovalofgeosminandthephysicochemicalpropertiesoffishmeatfrombigheadcarp（Hypophthalmichthysnobilis）［J］.InnovativeFoodScience&EmergingTechnologies，2016，34：16－23；[10]王赛.水质、藻类变化对罗非鱼异味产生的影响及异味去除初步探讨[D].广东海洋大学，2012；[11]P.C.Lindholm-Lehto,S.Suurnäkki,J.T.PμLkkinen,etal.Effectofperaceticacidonlevelsofgeosmin,2-methylisoborneol,andtheirpotentialproducersinarecircμLatingaquacμLturesystemforrearingrainbowtrout（Oncorhynchusmykiss）[J].AquacμLturalEngineering,2019,85：56-64；[12]国家质量监督检验检疫总局.GB/T32470-本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种鱼肉中土腥味物质的测定方法，其特征在于：该测定方法是以顺式-十氢-1-萘酚溶液为内标制备的鱼肉为样品，采用顶空固相微萃取法提取样品中的土臭味素和2-甲基异莰醇，再通过气相色谱质谱联用法进行的测定过程。/n

【技术特征摘要】
1.一种鱼肉中土腥味物质的测定方法，其特征在于：该测定方法是以顺式-十氢-1-萘酚溶液为内标制备的鱼肉为样品，采用顶空固相微萃取法提取样品中的土臭味素和2-甲基异莰醇，再通过气相色谱质谱联用法进行的测定过程。


2.根据权利要求1所述的一种鱼肉中土腥味物质的测定方法，其特征在于：所述样品制备包括：将鱼肉、顺式-十氢-1-萘酚溶液、水混合后，经均质、破碎而制备得到样品。


3.根据权利要求1所述的一种鱼肉中土腥味物质的测定方法，其特征在于：采用顶空固相微萃取法提取前，对其使用的萃取头进行老化，老化时间0.5~2h，温度250℃。


4.根据权利要求1所述的一种鱼肉中土腥味物质的测定方法，其特征在于：采用顶空固相微萃取法提取时，控制搅拌速度为800~1200r/min，萃取时间为30~40min。


5.根据权利要求1所述的一种鱼肉中土腥味物质的测定方法，其特征在于：采用顶空固相微萃取法提取结束后，对萃取头进行解吸，解吸时间5~10min，解吸后通过气相色谱质谱联用法进行测定。


6.根据权利要求1所述的一种鱼肉中土腥味物质的测定方法，其特征在于：所述气相色谱质谱联用法的检测条件满足以下指标：
色谱柱：HP-5ms弹性毛细管柱，柱温程序升温至250℃，进样口温度：25...

【专利技术属性】
技术研发人员：张艳红，李德祥，张凤枰，邹昌健，
申请(专利权)人：四川威尔检测技术股份有限公司，通威股份有限公司，
类型：发明
国别省市：四川;51