紫甘薯原飞燕草素在制备抗乳腺癌药物中的应用制造技术

本发明专利技术公开了紫甘薯原飞燕草素在制备抗乳腺癌药物中的应用。该紫甘薯原飞燕草素是从宁紫4号紫甘薯中提取得到的，细胞实验表明，紫甘薯原飞燕草素Y3对乳腺癌细胞MCF‑7细胞增殖具有明显抑制作用，且呈剂量依赖性；对乳腺癌细胞MDA‑MB‑436、MDA‑MB‑231细胞增殖具有一定抑制作用，且呈剂量依赖性；对乳腺癌细胞MDA‑MB‑435、BT483、ZR75‑1抑制作用不明显。本发明专利技术拓宽了紫甘薯原飞燕草素的应用领域，为开发天然活性抗肿瘤药物提供了物质基础，具有潜在的社会效益和经济效益。

Application of delphinidin from purple sweet potato in the preparation of anti breast cancer drugs

【技术实现步骤摘要】
紫甘薯原飞燕草素在制备抗乳腺癌药物中的应用
本专利技术属于医药
，涉及一种甘薯原飞燕草素的应用，具体涉及一种紫甘薯原飞燕草素在制备抗乳腺癌药物中的应用。
技术介绍
乳腺癌是女性发病率最高的恶性肿瘤，是危害居民生命健康的最主要的恶性肿瘤之一。2011年中国女性乳腺癌发病人数约24.9万，发病率37.86/10万,近10年发病呈上升趋势，每年死亡约6.0万,死亡率9.21/10万，近10年乳腺癌死亡率呈上升趋势。化疗可使乳腺癌死亡相对危险度下降三分之一，但化疗引起的副作用严重制约了化疗药物应用。近年来，天然活性产物抗肿瘤的研究已成为新的热门研究方向，其抗肿瘤活性倍受关注，成为了抗肿瘤研究的中心课题。天然产物与其他抗肿瘤药物，特别是化疗药物相比，具有低毒高效、多途径、多靶点、物美价廉、并且能调节机体免疫力等优点，其在临床上的应用和发展潜力将非常广阔。原飞燕草素(Prodelphinidins)是原花色素(Proanthocyanidins)的一种，而原花色素是一种具有C6·C3·C6结构框架的黄烷-3-醇类物质。根据原花色素组成结构单元的不同，可以将其分为原花青素和原飞燕草素等，它们对应的组成结构单元分别为(表)儿茶素和(表)桔儿茶素等，其结构单元的C3位置可与桔酸发生酯化，生成相应的桔酸酯，如(表)桔儿茶素桔酸酯。目前研究表明植物界分布最多的原花色素为原花青素，而其他原花色素相对较少且往往与原花青素共同存在，单独存在的相对较少。紫甘薯又称紫薯，属旋花科甘薯属蔓生草本植物，薯肉呈紫至深紫色，是一种容易栽培、药食兼用的作物。紫甘薯的茎叶和根块中除含有各种营养成分外，还含有丰富的花青素。花青素具有广泛的生物学活性、天然安全、细胞毒性较小，因而目前对紫甘薯花青素的研究较多。原飞燕草素主要存在于黑枸杞、葡萄籽、银杏叶、柏树、松树皮、杨树叶、沙棘等植物中，还没有从紫甘薯中提取原飞燕草素的研究报道。原飞燕草素的药理作用是目前的研究热点，其抗肿瘤活性的研究需要进一步深入研究。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种紫甘薯原飞燕草素在制备抗乳腺癌药物中的应用，为治疗乳腺癌提供一种新的途径。为实现上述目的，本专利技术提供一种紫甘薯原飞燕草素在制备抗乳腺癌药物中的应用。本专利技术还提供上述紫甘薯原飞燕草素在制备乳腺癌细胞生长抑制剂或乳腺癌细胞增殖抑制剂中的应用。优选的，所述紫甘薯原飞燕草素从宁紫4号紫甘薯中提取得到。进一步地，所述紫甘薯原飞燕草素的提取方法是：超声波提取；AB-8大孔树脂吸附解吸；浓缩后使用制备型高效液相色谱进行分离纯化；使用分析型高效液相色谱测定收集的紫甘薯原飞燕草素产品纯度。优选的，解吸液采用体积浓度80％乙醇水溶液，解吸液流速为2.0mL/min。优选的，分离纯化条件为：60％甲醇水溶液，pH＝4.6，等度洗脱，流速2.0mL/min，收集20～24min范围内的液体。优选的，所述乳腺癌细胞为人乳腺癌细胞系MCF-7。细胞实验表明，紫甘薯原飞燕草素Y3对乳腺癌细胞MCF-7细胞增殖具有明显抑制作用，且呈剂量依赖性；对乳腺癌细胞MDA-MB-436、MDA-MB-231细胞增殖具有一定抑制作用，且呈剂量依赖性；对乳腺癌细胞MDA-MB-435、BT483、ZR75-1抑制作用不明显。细胞实验表明，紫甘薯原飞燕草素Y3具有低毒性的特点，对人正常乳腺细Hs578Bst、人脐静脉内皮细胞HUVEC、小鼠肺上皮细胞MLE-12和小鼠肺泡巨噬细胞MH-s的没有明显的生长抑制作用。与现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果：1.本专利技术提供了紫甘薯原飞燕草素在制备抗乳腺癌药物方面的新用途(对乳腺癌细胞MCF-7细胞增殖具有明显抑制作用，对正常细胞抑制作用不明显)，拓宽了紫甘薯原飞燕草素的应用领域，为开发天然活性抗肿瘤药物提供了物质基础，具有潜在的社会效益和经济效益；2.本专利技术的紫甘薯多糖来源于农产品，直接提取纯化即可获得，成本低，无污染，可产业化生产。附图说明图1为实施例1中提取的紫甘薯原飞燕草素Y3的液相色谱图；图2为实施例2中紫甘薯原飞燕草素Y3对不同乳腺癌细胞的抑制作用；图3为实施例3中紫甘薯原飞燕草素Y3对正常细胞的抑制作用；图4为实施例4中紫甘薯原飞燕草素Y3对乳腺癌细胞MCF-7的抑制作用；图5为实施例5中紫甘薯原飞燕草素Y3、化疗常用药物紫杉醇Paclitaxel对乳腺癌细胞MCF-7、人脐静脉内皮细胞HUVEC的抑制作用。具体实施方式下面结合附图和具体实施例对本专利技术作进一步详细说明。实施例1原飞燕草素的提取、纯化将紫甘薯宁紫4号样品洗净、切块，烘干、粉碎，过80目筛，得到紫薯干粉；取适量紫薯干粉样品2g左右于250mL锥形瓶，加入100mL0.1mol/L柠檬酸水溶液，超声半个小时后过滤。取澄清滤液进行下一步分析。将AB-8大孔树脂用无水乙醇充分浸泡24小时，赶出空气泡。浸泡之后，用水冲洗取代乙醇，再分别用0.5mol/LNaCl和0.5mol/LNa2CO3溶液冲洗，除去树脂中痕量的防腐剂和残留的单体化合物，最后再用蒸馏水冲洗至无醇味，滤去水分备用。将提取的色素溶液上样，上样流速为2.0mL/min，通过装好的AB-8树脂柱，待色素溶液完全吸附后，用体积浓度80％乙醇水溶液进行解吸，流速2.0mL/min。获得的80％洗脱液浓缩，使用制备型高效液相色谱进行分离纯化，纯化条件为：60％甲醇水溶液(pH＝4.6)，等度洗脱，流速2.0mL/min，收集20～24min范围内的液体，反复纯化，利用分析型高效液相色谱进行纯度检验，结果如图1所示，产品纯度98.7％，其分子式为C30H26O13，结构式如式(1)所示，命名为紫甘薯原飞燕草素Y3。实施例2紫甘薯原飞燕草素Y3对人乳腺癌细胞增殖抑制作用为了研究紫甘薯原飞燕草素Y3对人乳腺癌细胞生长和增殖的作用，采用MTT法测试实施例1所提取的Y3对人三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231、人三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-436、人乳腺癌高转移细胞MDA-MB-435、人乳腺导管癌细胞BT483、人乳腺癌细胞MCF-7和人乳腺导管癌贴壁细胞ZR75-1(购自中科院上海细胞库)的抑制作用。具体操作如下：1、将解冻复苏的肿瘤细胞株MDA-MB-231、MDA-MB-435、MCF-7和ZR75-1分别接种于含10％新生牛血清的DMEM培养基中，将解冻复苏的肿瘤细胞株MDA-MB-436、BT-483分别接种于含10％新生牛血清的1640培养基中，置于37℃、5％CO2、饱和湿度的培养箱中培养；2、取对数生长期的待试肿瘤细胞制成1×104/mL单细胞悬液，接种于96孔板中，每孔200μL，置37℃、5％CO2条件下培养24h，待细胞贴壁；3、弃去原培养液，加入不同浓度的待测Y3的培养基处理细胞，另设空白对照组；将培养板置于3本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.紫甘薯原飞燕草素在制备抗乳腺癌药物中的应用。/n

【技术特征摘要】
1.紫甘薯原飞燕草素在制备抗乳腺癌药物中的应用。


2.紫甘薯原飞燕草素在制备乳腺癌细胞生长抑制剂或乳腺癌细胞增殖抑制剂中的应用。


3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述紫甘薯原飞燕草素从宁紫4号紫甘薯中提取得到。


4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述紫甘薯原飞燕草素的提取方法是：超声波提取；AB-8大孔树脂吸附解吸；浓缩后使用制备型高效液相色谱进行分离纯化；使用分析型高效液...

【专利技术属性】
技术研发人员：李荣鹏，董国凯，袁博，曹清河，蒋继宏，布会敏，王萌，
申请(专利权)人：江苏师范大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32