一种从娃娃鱼中提取脑黄金的方法技术

本发明专利技术属于生物制药技术领域，公开一种从娃娃鱼中提取脑黄金的方法，该方法包括如下步骤：将娃娃鱼原料进行处理得到粗鱼油；将粗鱼油依次经过脱酸、脱臭、脱脂处理后，得到精制鱼油；将精制鱼油采用尿素包埋法分离、萃取得到含有DHA的高度不饱和脂肪酸；将含有DHA的高度不饱和脂肪酸放入含有脂肪酶的超临界萃取反应釜中，在超声波磁场中进行亚临界酶促反应，将反应产物进行超临界萃取、精馏处理，得到DHA的脂肪酸甘油三酯。本发明专利技术一方面解决了现有大鲵产品，特别是深层次加工产品种类单一，从而限制大鲵养殖业的长远发展的问题；另一方面同时利用尿素包埋法与超临界法，解决了现有技术从鱼油中提取DHA存在的纯度低的问题。

A method of extracting brain gold from giant salamander

【技术实现步骤摘要】
一种从娃娃鱼中提取脑黄金的方法
本专利技术涉及生物制药
，具体涉及一种从娃娃鱼中提取脑黄金的方法。
技术介绍
二十二碳六烯酸，即DHA，通常称为脑黄金，其是人体所必需的一种多不饱和脂肪酸，鱼油中含量较多。但是它属于热和化学不稳定的物质，将其分离提纯及其困难，现有常用的分离纯化技术有精馏分离技术、分子蒸馏技术、色谱分离技术、低温冷冻技术、金属盐沉淀技术和于油交酯化，但都或多或少的存在各自的不足。例如，精馏分离技术，操作温度较高，时间较长，致使不饱和脂肪酸发生热敏反应，影响产品质量和收率。分子蒸馏技术一次性投资较大，且维护费用较高。超临界流体技术设备投资大，抽提压力高，无法实现将EPA、DHA与其他分子量接近的饱和或低浓度不饱和脂肪酸分离。色谱分离技术耗能大，操作成本高。低温冷冻技术需回收大量溶剂，分离效率不高，需要极低温的冷却设备，成本较高。金属盐沉淀技术因为使用硝酸银，造成成本高，且回收困难。鱼油交酯化技术，是指在碱性催化剂存在时，通过乙醇置换油脂中的甘油，制取乙酯化的高不饱和脂肪酸(EPA和DHA)。乙酯型ω-3PUFA在人体中消化和吸收比较困难，而且可能存在安全隐患。大鲵俗称娃娃鱼，是世界上最大的两栖类动物。《本草纲目》、《本草经集注》和《本草拾遗》等药典中，对大鲵有“麟目、滋阴补肾、补血行气治痴疾”和“治痴疾、治顽疾”等药用功效的描述，被誉为“水中活人参”和“软黄金”，在东南亚有“吃一鲵肉长一甲子功力”之说，是一种高级滋补保健珍品。目前大鲵深层次的开发利用很少，现有的大鲵深层次的开发利用大多着眼于大鲵蛋白的分解等方法类，或者直接将分解得到的大鲵蛋白肽作为保健品进行售卖，这就导致大鲵蛋白类的产品种类过于单一，不利于大鲵养殖业的长远发展。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术提供一种从娃娃鱼中提取脑黄金的方法，旨在解决现有大鲵产品，特别是深层次加工产品种类单一，从而限制大鲵养殖业的长远发展的问题，解决现有技术从鱼油中提取DHA存在的纯度低的问题。本专利技术采用如下技术方案：一种从娃娃鱼中提取脑黄金的方法，该方法包括如下步骤：S1、将娃娃鱼原料进行处理得到粗鱼油；S2、将所述S1中的粗鱼油依次经过脱酸、脱臭、脱脂处理后，得到精制鱼油；S3、将所述S2中的精制鱼油采用尿素包埋法分离、萃取得到含有DHA的高度不饱和脂肪酸；S4、将所述S3中的含有DHA的高度不饱和脂肪酸放入含有脂肪酶的超临界萃取反应釜中，在超声波磁场中进行亚临界酶促反应，将反应产物进行超临界萃取、精馏处理，得到DHA的脂肪酸甘油三酯。优选的，所述S1的具体方法为：将娃娃鱼绞碎成肉浆，加水和抗氧化剂，使用枯草杆菌蛋白酶进行第一次酶解处理，酶解后进行固液分离，收集滤液，得到粗鱼油；优选的，所述枯草杆菌蛋白酶的比酶活520U/g～550U/g，用量为娃娃鱼原料重量的0.65％～0.85％。优选的，所述抗氧化剂的加入量为娃娃鱼原料重量的0.005％～0.015％，所述抗氧化剂为TBHQ、茶多酚或Vc。优选的，所述第一次酶解处理的酶解条件：酶解液pH为7～8，酶解温度为35℃～40℃，酶解时间为2h～3h。优选的，所述S3中的所述尿素包埋法分离步骤为：S31、将S2中的精制鱼油中加入脂肪酶进行第二酶解反应，得到游离的脂肪酸；S32、将所述S31得到的脂肪酸与尿素的乙醇饱和溶液进行混合，降温至0℃～5℃，并保温结晶处理10h～12h后升至室温，过滤得到滤液；S33、将所述S32的所述滤液进行萃取，并对收集的有基层进行减压蒸馏，得到浓缩的含有DHA的高度不饱和脂肪酸。优选的，所述S32中，在50℃～65℃下将所述S31中的所述脂肪酸与尿素的乙醇饱和溶液按照重量比为1：(1～3)混合。优选的，所述S33中，所述萃取时采用的萃取体系为用量比为10ml:(1～2)g:(2～3)g的滤液、正己烷、蒸馏水体系；萃取压力为20MPa～30MPa，萃取温度为35℃～40℃。优选的，所述S4中的所述亚临界酶促反应的条件为：所述超临界萃取反应釜的压力为4MPa～8MPa，超声波振动磁场为2Hz～10Hz，反应温度为30℃～60℃，反应时间为1h～12h。优选的，所述脂肪酶为脂肪酶Novozym435。与现有技术相比，采用上述方案本专利技术的有益效果为：本专利技术中通过选用娃娃鱼为原料，首先将娃娃鱼制备成精制鱼油；然后通过尿素包埋法分离、萃取得到含有DHA的高度不饱和脂肪酸；最后，再通过亚临界酶促反应得到DHA的脂肪酸甘油三酯；即本专利技术一方面解决了现有大鲵产品，特别是深层次加工产品种类单一，从而限制大鲵养殖业的长远发展的问题；另一方面同时利用尿素包埋法与超临界法，解决了现有技术从鱼油中提取DHA存在的纯度低的问题。附图说明图1是本专利技术提供的一种从娃娃鱼中提取脑黄金的方法的工艺流程图。具体实施方式为了使本专利技术的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合具体实施例，对本专利技术进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。本专利技术提供一种从娃娃鱼中提取脑黄金的方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：S1、将娃娃鱼原料进行处理得到粗鱼油；S2、将S1中的粗鱼油依次经过脱酸、脱臭、脱脂处理后，得到精制鱼油；S3、将S2中的精制鱼油采用尿素包埋法分离、萃取得到含有DHA的高度不饱和脂肪酸；S4、将S3中的含有DHA的高度不饱和脂肪酸放入含有脂肪酶的超临界萃取反应釜中，在超声波磁场中进行亚临界酶促反应，将反应产物进行超临界萃取、精馏处理，得到DHA的脂肪酸甘油三酯。下面结合具体实施例对本专利技术的方法进行具体说明：实施例1一种从娃娃鱼中提取脑黄金的方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：S1、将娃娃鱼绞碎成肉浆，加水和抗氧化剂，使用枯草杆菌蛋白酶进行第一次酶解处理，酶解后进行固液分离，收集滤液，得到粗鱼油；其中，枯草杆菌蛋白酶的比酶活520U/g，用量为娃娃鱼原料重量的0.65％；抗氧化剂为TBHQ，加入量为娃娃鱼原料重量的0.005％。第一次酶解处理的酶解条件：酶解液pH为7，酶解温度为35℃，酶解时间为2h；S2、将S1中的粗鱼油依次经过脱酸、脱臭、脱脂处理后，得到精制鱼油；S3、将S2中的精制鱼油采用尿素包埋法分离、萃取得到含有DHA的高度不饱和脂肪酸，具体包括如下步骤：S31、将S2中的精制鱼油中加入脂肪酶进行第二酶解反应，得到游离的脂肪酸；S32、将S31得到的脂肪酸与尿素的乙醇饱和溶液进行混合，降温至0℃，并保温结晶处理10h后升至室温，过滤得到滤液；S33、将S32的滤液进行萃取，并对收集的有基层进行减压蒸馏，得到浓缩的含有DHA的高度不饱和脂肪酸；其中，S32中，在50℃下将S31中的所述脂肪酸与尿素的本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种从娃娃鱼中提取脑黄金的方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：/nS1、将娃娃鱼原料进行处理得到粗鱼油；/nS2、将所述S1中的粗鱼油依次经过脱酸、脱臭、脱脂处理后，得到精制鱼油；/nS3、将所述S2中的精制鱼油采用尿素包埋法分离、萃取得到含有DHA的高度不饱和脂肪酸；/nS4、将所述S3中的含有DHA的高度不饱和脂肪酸放入含有脂肪酶的超临界萃取反应釜中，在超声波磁场中进行亚临界酶促反应，将反应产物进行超临界萃取、精馏处理，得到DHA的脂肪酸甘油三酯。/n

【技术特征摘要】
1.一种从娃娃鱼中提取脑黄金的方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：
S1、将娃娃鱼原料进行处理得到粗鱼油；
S2、将所述S1中的粗鱼油依次经过脱酸、脱臭、脱脂处理后，得到精制鱼油；
S3、将所述S2中的精制鱼油采用尿素包埋法分离、萃取得到含有DHA的高度不饱和脂肪酸；
S4、将所述S3中的含有DHA的高度不饱和脂肪酸放入含有脂肪酶的超临界萃取反应釜中，在超声波磁场中进行亚临界酶促反应，将反应产物进行超临界萃取、精馏处理，得到DHA的脂肪酸甘油三酯。


2.如权利要求1所述的从娃娃鱼中提取脑黄金的方法，其特征在于，所述S1的具体方法为：
将娃娃鱼绞碎成肉浆，加水和抗氧化剂，使用枯草杆菌蛋白酶进行第一次酶解处理，酶解后进行固液分离，收集滤液，得到粗鱼油；


3.如权利要求2所述的从娃娃鱼中提取脑黄金的方法，其特征在于，所述枯草杆菌蛋白酶的比酶活520U/g～550U/g，用量为娃娃鱼原料重量的0.65％～0.85％。


4.如权利要求2所述的从娃娃鱼中提取脑黄金的方法，其特征在于，所述抗氧化剂的加入量为娃娃鱼原料重量的0.005％～0.015％；所述抗氧化剂为TBHQ、茶多酚或Vc中的至少一种。


5.如权利要求2所述的从娃娃鱼中提取脑黄金的方法，其特征在于，所述第一次酶解处理的酶解条件：酶解液pH为7～8，酶解温度为35℃～40℃，酶解时间为2h～3h。

【专利技术属性】
技术研发人员：付俊，夏豫忠，吉建国，杨斌，
申请(专利权)人：付俊，湖北世厚耀榜纪田农业发展有限公司，夏豫忠，吉建国，杨斌，
类型：发明
国别省市：湖北;42