一种SNK细胞的培养方法技术

技术编号:23553119 阅读:62 留言:0更新日期:2020-03-25 00:32
本发明专利技术提供了一种SNK细胞的培养方法,属于医学、免疫学、细胞生物学和分子生物学技术领域,包括将携带有IL‑2基因的PBMC和携带有41BBL基因、MICA基因的PBMC进行共培养,得到SNK细胞。携带有41BBL基因和MICA基因能够刺激CD56+CD16+NK细胞的增殖,使获得的SNK细胞对多种实体瘤的杀伤效果好,携带有IL‑2基因的PBMC在满足PBMC生长的条件下,不断表达IL‑2,无需再向培养体系中添加IL‑2。

A culture method of SNK cells

【技术实现步骤摘要】
一种SNK细胞的培养方法
本专利技术属于医学、免疫学、细胞生物学和分子生物学
,尤其涉及一种SNK细胞的培养方法。
技术介绍
外周血分离的外周血单个核细胞(以下简称PBMC)体外培养时需要适量的细胞因子IL-2的诱导,使其分化成NK细胞,因此PBMC的细胞培养基中IL-2的作用相当关键。现有的NK细胞培养基OKM-100和OKM-200由于成本较高,细胞培养周期较长,从经济方面不利于生产使用。通用的RPMI-1640培养基价格虽低,但由于其不含细胞因子IL-2,因此需要每天向培养体系中补加适量的IL-2,造成实验操作繁琐和不便,因此寻找简便又经济的新型细胞培养体系变得尤为重要。
技术实现思路
有鉴于此,本专利技术的目的在于提供一种SNK细胞的培养方法,不需要每天向培养体系中添加IL-2,就能够获得SNK细胞。为了实现上述专利技术目的,本专利技术提供了以下技术方案:本专利技术提供了一种SNK细胞的培养方法,包括以下步骤:1)将IL-2基因连接到载体中,经慢病毒包装后感染PBMC,得到携带有IL-2本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种SNK细胞的培养方法,其特征在于,包括以下步骤:/n1)将IL-2基因连接到载体中,经慢病毒包装后感染PBMC,得到携带有IL-2基因的PBMC;/n2)将41BBL基因和MICA基因连接到载体中,经慢病毒包装后感染PBMC,得到携带有41BBL基因、MICA基因的PBMC;/n3)将所述步骤1)得到的携带有IL-2基因的PBMC和步骤2)得到的携带有41BBL基因、MICA基因的PBMC进行共培养,得到SNK细胞。/n

【技术特征摘要】
1.一种SNK细胞的培养方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)将IL-2基因连接到载体中,经慢病毒包装后感染PBMC,得到携带有IL-2基因的PBMC;
2)将41BBL基因和MICA基因连接到载体中,经慢病毒包装后感染PBMC,得到携带有41BBL基因、MICA基因的PBMC;
3)将所述步骤1)得到的携带有IL-2基因的PBMC和步骤2)得到的携带有41BBL基因、MICA基因的PBMC进行共培养,得到SNK细胞。


2.根据权利要求1所述的培养方法,其特征在于,所述步骤1)IL-2基因的核苷酸序列如SEQIDNo.1所示。


3.根据权利要求1所述的培养方法,其特征在于,所述步骤2)41BBL基因的核苷酸序列如SEQIDNo.2所示。


4.根据权利要求1所述的培养方法,其特征在于,所述步骤2)MICA基因的核苷酸序列如SEQIDNo.3所示。


5.根据权利要求1、3或4所述的培养方法,其特征在于,...

【专利技术属性】
技术研发人员:焦顺昌张嵘李营营
申请(专利权)人:北京鼎成肽源生物技术有限公司
类型:发明
国别省市:北京;11

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