一种以11β-HSD2为靶点筛选发育毒性外源化合物的细胞模型、其构建方法及应用技术

本发明专利技术提供一种以11β‑HSD2为靶点筛选发育毒性外源化合物的细胞模型、其构建方法及其应用。本发明专利技术采用人WJ‑MSCs作为目的细胞，将含有11β‑HSD2启动子的荧光素酶报告基因转染入目的细胞，得到所述细胞模型，所述模型具有两个指标：11β‑HSD2基因表达和报告系统的荧光素酶活性。利用本发明专利技术模型，受试化合物处理组的11β‑HSD2基因表达及荧光素酶活性降低，提示受试物具有发育毒性。本发明专利技术所建立的发育毒性外源化合物筛选细胞模型具有高特异性、高灵敏性、高稳定性、高可行性等特点，可用于高通量筛选，对于快速筛选具有发育毒性的外源化合物具有重要意义。

A cell model for screening exogenous compounds with developmental toxicity targeting at 11 \u03b2 - HSD2, its construction method and Application

【技术实现步骤摘要】
一种以11β-HSD2为靶点筛选发育毒性外源化合物的细胞模型、其构建方法及应用
本专利技术属于药物毒理学领域，涉及一种以11β-HSD2为靶点筛选发育毒性外源化合物的细胞模型、其构建方法及应用。
技术介绍
外源化合物发育毒性是指外源化合物引起的子代宫内到性成熟前出现的结构或功能损害，包括结构畸形、功能障碍、生长迟缓甚至死亡。发育毒性是外源化合物安全性评价的重要内容之一。目前的评价手段大多是将整体动物生殖实验结果作为外源化合物发育毒性的衡量指标，但存在动物用量大、实验周期长、特异性差、灵敏度低、无法从细胞或分子水平阐明其发生机制等缺点。即便是近年来逐步发展起来的发育毒性体外评价体系，如全胚胎培养、微团培养法和胚胎干细胞培养，也存在培养难度大、成本高、时间有限或检测指标特异性低等问题。综上，外源化合物发育毒性体外评价体系存在较大局限，主要与外源化合物发育毒性表现不清及发生机制理论体系缺乏有关，因此基于毒性机制及分子靶标的高通量外源化合物发育毒性体外评价体系尚待开发。基础糖皮质激素(glucocorticoid，GC)水平是决定宫内胎本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种以11β-HSD2为靶点筛选发育毒性外源化合物的细胞模型，其特征在于：采用人WJ-MSCs作为目的细胞，将含有11β-HSD2启动子的荧光素酶报告基因转染入目的细胞，得到所述以11β-HSD2为靶点筛选发育毒性外源化合物的细胞模型。/n

【技术特征摘要】
1.一种以11β-HSD2为靶点筛选发育毒性外源化合物的细胞模型，其特征在于：采用人WJ-MSCs作为目的细胞，将含有11β-HSD2启动子的荧光素酶报告基因转染入目的细胞，得到所述以11β-HSD2为靶点筛选发育毒性外源化合物的细胞模型。


2.如权利要求1所述的以11β-HSD2为靶点筛选发育毒性外源化合物的细胞模型，其特征在于：所述以11β-HSD2为靶点筛选发育毒性外源化合物的细胞模型具有两个指标，11β-HSD2基因表达和报告系统的荧光素酶活性。


3.一种如权利要求1所述的以11β-HSD2为靶点筛选发育毒性外源化合物的细胞模型的构建方法，其特征在于：包含以下步骤：
步骤1：提取人WJ-MSCs，37℃±1、5％CO2培养箱培养并扩增传3-5代；
步骤2：构建含11β-HSD2启动子的荧光素酶报告基因；
步骤3：将步骤2构建的含11β-HSD2启动子的荧光素酶报告基因转染入步骤1传代...

【专利技术属性】
技术研发人员：汪晖，陈廖斌，徐丹，文印宪，齐勇建，李斌，张棋，
申请(专利权)人：武汉大学，
类型：发明
国别省市：湖北;42