一种克隆异戊烯转移酶基因家族成员群的方法技术

本发明专利技术涉及分子生物学领域，尤其涉及一种克隆异戊烯转移酶基因家族成员群的方法。本发明专利技术的克隆异戊烯转移酶基因家族成员群的方法，包括步骤：1)选取细菌一；2)扩增细菌一的部分异戊烯转移酶基因引物采用第一简并引物，模板为细菌一的基因组；3)将扩增得到的部分异戊烯转移酶基因做比对，获得亲缘关系最近的菌种并获得其的完整异戊烯转移酶的基因序列；4)根据亲缘关系最近菌种的完整异戊烯转移酶基因序列设计第二简并引物，扩增细菌一的完整异戊烯转移酶基因，模板为细菌一的基因组；5)按照该方法依次得到多个细菌的完整异戊烯转移酶基因，建构异戊烯转移酶基因家族成员群。本发明专利技术的方法能够获取大量的异戊烯转移酶基因家族成员。

A method of cloning isopentenyltransferase gene family members

【技术实现步骤摘要】
一种克隆异戊烯转移酶基因家族成员群的方法
本专利技术涉及分子生物学领域，尤其涉及一种克隆异戊烯转移酶基因家族成员群的方法。
技术介绍
异戊烯转移酶是他汀类药物生产的重要催化剂，获取异戊烯转移酶基因家族成员群能为异戊烯转移酶基因研究和他汀类药物生产提供丰富的候选基因资源。目前，克隆异戊烯转移酶基因家族成员的方法是首先在基因库中寻找异戊烯转移酶基因序列，然后根据异戊烯转移酶基因序列设计引物克隆异戊烯转移酶基因；这种方法获取的异戊烯转移酶基因十分有限，仅局限于基因库中已公开的异戊烯转移酶基因，不能获取未公开在基因库中异戊烯转移酶基因，不能全面获取异戊烯转移酶基因家族成员。
技术实现思路
为了解决以上问题，本专利技术的目的是提供一种克隆异戊烯转移酶基因家族成员群的方法，能够获取大量的异戊烯转移酶基因家族成员，为异戊烯转移酶基因研究和他汀类药物生产提供丰富的候选基因资源。为实现上述目的，本专利技术所设计的克隆异戊烯转移酶基因家族成员群的方法，包括步骤：(1)选取细菌一；(2)利用PCR技术扩增细菌一的部分异戊烯本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于克隆异戊烯转移酶基因家族成员群的简并引物，其特征在于，所述简并引物的上游引物如SEQ ID NO.1所示，下游引物如SEQ ID NO.2所示。/n

【技术特征摘要】
1.一种用于克隆异戊烯转移酶基因家族成员群的简并引物，其特征在于，所述简并引物的上游引物如SEQIDNO.1所示，下游引物如SEQIDNO.2所示。


2.一种克隆异戊烯转移酶基因家族成员群的方法，其特征在于，包括步骤：
(1)选取细菌一；
(2)利用PCR技术扩增细菌一的部分异戊烯转移酶基因，PCR扩增技术中引物采用第一简并引物，第一简并引物的上游引物如SEQIDNO.1所示，下游引物如SEQIDNO.2所示，模板为细菌一的基因组DNA；
(3)将扩增得到的部分异戊烯转移酶基因做BLAST比对，获得亲缘关系最近的菌种并获得亲缘关系最近菌种的完整异戊烯转移酶的基因序列；
(4)根据步骤(3)亲缘关系最近菌种的完整异戊烯转移酶基因序列设计第二简并引物，利用PCR技术扩增细菌一的完整异戊烯...

【专利技术属性】
技术研发人员：宫春杰，王崇鞠，
申请(专利权)人：湖北工业大学，
类型：发明
国别省市：湖北;42