抗人claudin 18.2单克隆抗体及其应用制造技术

本发明专利技术涉及生物医药领域，尤其涉及抗人claudin18.2单克隆抗体及其应用，抗体，具有三个重链互补决定区(重链CDR1、重链CDR2、重链CDR3)和三个轻链互补决定区（轻链CDR1、轻链CDR2、轻链CDR3），具有良好特异性、较高的亲和性和稳定性。

Monoclonal antibody against human claudin 18.2 and its application

【技术实现步骤摘要】
抗人claudin18.2单克隆抗体及其应用
本专利技术涉及生物医药领域，尤其涉及抗人claudin18.2单克隆抗体及其应用。
技术介绍
Claudins家族是上皮细胞间紧密连接的骨架蛋白，参与紧密连接的构成，紧密连接有维持细胞极向排列和屏障功能，其表达异常而导致紧密连接结构和功能的破坏是许多疾病的病例基础。研究表明，多种上皮来源的肿瘤中Claudins家族异常表达，并与这些肿瘤的发生、发展关系密切，在诊断、治疗以及预后的判断等方面有广泛的应用前景，因此Claudins家族成为肿瘤研究的新热点。人源性Claudin18基因具有2个不同的第一个外显子，所以可以产生两种亚型Claudin18.1和Claudin18.2。这两个分子的N端69个氨基酸的结构不同，其位于第一个胞外区的环状结构内。Claudin18的两种亚型分别在不同的组织中进行转录扩增，其中，Claudin18.1主要表达在肺组织，而Claudin18.2则特异性表达于胃组织。2006年，Sanada等发现claudin-18基因在57％的胃癌中表达下调，通过免疫组化分析，正常胃黏膜和十二指肠潘氏细胞的胞膜上表达claudin-18，但在一些肠化和90％的胃腺瘤中，claudin-18表达减少，同时在肠型胃癌中表达减少较其他型胃癌更常见，推测其可能参与了早期胃癌的发生。生存分析表明，胃癌中claudin-18表达减少与晚期患者的预后差有关，认为claudin-18表达减少是胃癌患者预后不佳的因素。2008年，Sahin等研究证实77％原发性胃腺癌组织中存在Claudin18.2的表达，极为重要的是其中56％的组织表达量达到60％以上。与上述研究结果一致的是肠型胃癌中Claudin18.2蛋白的表达下调，而弥散型胃癌中Claudin18.2蛋白的表达较高。但是，胰腺、食道、卵巢等组织在正常状态下没有Claudin18.2蛋白表达，而相应的肿瘤组织中可以大量表达Claudin18.2蛋白。所以，Claudin18.2蛋白可以作为临床肿瘤诊断和治疗的靶位。但，目前尚未见以该蛋白为靶位研制的抗体。
技术实现思路
本专利技术的提供一种具有良好特异性、较高的亲和性和稳定性的抗人claudin18.2单克隆抗体。本专利技术的第一目的是提供抗人claudin18.2单克隆抗体的氨基酸序列，具体如下：一种抗人claudin18.2单克隆抗体，具有三个重链互补决定区(重链CDR1、重链CDR2、重链CDR3)和三个轻链互补决定区（轻链CDR1、轻链CDR2、轻链CDR3），重链CDR1选自：SEQIDNO:1、SEQIDNO:7、SEQIDNO:13、SEQIDNO:19、SEQIDNO:25、SEQIDNO:31、SEQIDNO:37、SEQIDNO:43、SEQIDNO:49、SEQIDNO:55、SEQIDNO:61、SEQIDNO:67、SEQIDNO:73中的一种或者与其中一种同源性大于50%的相似序列；重链CDR2选自：SEQIDNO:2、SEQIDNO:8、SEQIDNO:14、SEQIDNO:20、SEQIDNO:26、SEQIDNO:32、SEQIDNO:38、SEQIDNO:44、SEQIDNO:50、SEQIDNO:56、SEQIDNO:62、SEQIDNO:68、SEQIDNO:74中的一种或者与其中一种同源性大于50%的相似序列；重链CDR3选自：SEQIDNO:3、SEQIDNO:9、SEQIDNO:15、SEQIDNO:21、SEQIDNO:27、SEQIDNO:33、SEQIDNO:39、SEQIDNO:45、SEQIDNO:51、SEQIDNO:57、SEQIDNO:63、SEQIDNO:69、SEQIDNO:75中的一种或者与其中一种同源性大于50%的相似序列；轻链CDR1选自：SEQIDNO:4、SEQIDNO:10、SEQIDNO:16、SEQIDNO:22、SEQIDNO:28、SEQIDNO:34、SEQIDNO:40、SEQIDNO:46、SEQIDNO:52、SEQIDNO:58、SEQIDNO:64、SEQIDNO:70、SEQIDNO:76中的一种或者与其中一种同源性大于50%的相似序列；轻链CDR2选自：SEQIDNO:5、SEQIDNO:11、SEQIDNO:17、SEQIDNO:23、SEQIDNO:29、SEQIDNO:35、SEQIDNO:41、SEQIDNO:47、SEQIDNO:53、SEQIDNO:59、SEQIDNO:65、SEQIDNO:71、SEQIDNO:77中的一种或者与其中一种同源性大于50%的相似序列；轻链CDR3选自：SEQIDNO:6、SEQIDNO:12、SEQIDNO:18、SEQIDNO:24、SEQIDNO:30、SEQIDNO:36、SEQIDNO:42、SEQIDNO:48、SEQIDNO:54、SEQIDNO:60、SEQIDNO:66、SEQIDNO:72、SEQIDNO:78中的一种或者与其中一种同源性大于50%的相似序列。作为优选，重链CDR1为SEQIDNO:1、重链CDR2为SEQIDNO:2、重链CDR3为SEQIDNO:3，且轻链CDR1为SEQIDNO:4、轻链CDR2为SEQIDNO:5、轻链CDR3为SEQIDNO:6；或者重链CDR1为SEQIDNO:7、重链CDR2为SEQIDNO:8、重链CDR3为SEQIDNO:9，且轻链CDR1为SEQIDNO:10、轻链CDR2为SEQIDNO:11、轻链CDR3为SEQIDNO:12；或者重链CDR1为SEQIDNO:13、重链CDR2为SEQIDNO:14、重链CDR3为SEQIDNO:15，且轻链CDR1为SEQIDNO:16、轻链CDR2为SEQIDNO:17、轻链CDR3为SEQIDNO:18；或者重链CDR1为SEQIDNO:19、重链CDR2为SEQIDNO:20、重链CDR3为SEQIDNO:21，且轻链CDR1为SEQIDNO:22、轻链CDR2为SEQIDNO:23、轻链CDR3为SEQIDNO:24；或者重链CDR1为SEQIDNO:25、重链CDR2为SEQIDNO:26、重链CDR3为SEQIDNO:27，且轻链CDR1为SEQIDNO:28、轻链CDR2为SEQIDNO:29、轻链CDR3为SEQIDNO:30；或者重链CDR1为SEQIDNO:31、重链CDR2为SEQIDNO:32、重链CDR3为SEQIDNO:33，且轻链CDR1为SEQIDNO:34、轻链CDR2为SEQIDNO:35、轻链CDR3为SEQIDNO:36；或者重链CDR1为SEQIDNO:37、重链CDR2为SEQIDNO:38、重链CDR3为SEQIDNO:39，且轻链CDR1为SEQIDNO:40、轻链CDR2为SEQIDNO:41、轻链CDR3为SEQIDNO:42；或者重链CD本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.抗人claudin 18.2单克隆抗体，具有三个重链CDR和三个轻链CDR，其特征在于，/n重链CDR1选自：SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 7、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 19、SEQ IDNO:25、SEQ ID NO: 31、SEQ ID NO: 37、SEQ ID NO: 43、SEQ ID NO:49、SEQ ID NO:55、SEQID NO:61、SEQ ID NO:67、SEQ ID NO:73中的一种或者与其中一种同源性大于50%的相似序列；/n重链CDR2选自：SEQ ID NO: 2、SEQ ID NO: 8、SEQ ID NO: 14、SEQ ID NO:20、SEQ IDNO:26、SEQ ID NO: 32、SEQ ID NO: 38、SEQ ID NO: 44、SEQ ID NO:50、SEQ ID NO:56、SEQID NO:62、SEQ ID NO:68、SEQ ID NO:74中的一种或者与其中一种同源性大于50%的相似序列；/n重链CDR3选自：SEQ ID NO: 3、SEQ ID NO: 9、SEQ ID NO: 15、SEQ ID NO: 21、SEQ IDNO:27、SEQ ID NO: 33、SEQ ID NO: 39、SEQ ID NO: 45、SEQ ID NO:51、SEQ ID NO:57、SEQID NO:63、SEQ ID NO:69、SEQ ID NO:75中的一种或者与其中一种同源性大于50%的相似序列；/n轻链CDR1选自：SEQ ID NO: 4、SEQ ID NO: 10、SEQ ID NO: 16、SEQ ID NO:22、SEQ IDNO:28、SEQ ID NO: 34、SEQ ID NO: 40、SEQ ID NO: 46、SEQ ID NO:52、SEQ ID NO:58、SEQID NO:64、SEQ ID NO:70、SEQ ID NO:76中的一种或者与其中一种同源性大于50%的相似序列；/n轻链CDR2选自：SEQ ID NO: 5、SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 17、SEQ ID NO:23、SEQ IDNO:29、SEQ ID NO:35、SEQ ID NO: 41、SEQ ID NO: 47、SEQ ID NO:53、SEQ ID NO:59、SEQID NO:65、SEQ ID NO:71、SEQ ID NO:77中的一种或者与其中一种同源性大于50%的相似序列；/n轻链CDR3选自：SEQ ID NO: 6、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 18、SEQ ID NO:24、SEQ IDNO:30、SEQ ID NO: 36、SEQ ID NO: 42、SEQ ID NO: 48、SEQ ID NO:54、SEQ ID NO:60、SEQID NO:66、SEQ ID NO:72、SEQ ID NO:78中的一种或者与其中一种同源性大于50%的相似序列。/n...

【技术特征摘要】
20180822 CN 20181095867021.抗人claudin18.2单克隆抗体，具有三个重链CDR和三个轻链CDR，其特征在于，
重链CDR1选自：SEQIDNO:1、SEQIDNO:7、SEQIDNO:13、SEQIDNO:19、SEQIDNO:25、SEQIDNO:31、SEQIDNO:37、SEQIDNO:43、SEQIDNO:49、SEQIDNO:55、SEQIDNO:61、SEQIDNO:67、SEQIDNO:73中的一种或者与其中一种同源性大于50%的相似序列；
重链CDR2选自：SEQIDNO:2、SEQIDNO:8、SEQIDNO:14、SEQIDNO:20、SEQIDNO:26、SEQIDNO:32、SEQIDNO:38、SEQIDNO:44、SEQIDNO:50、SEQIDNO:56、SEQIDNO:62、SEQIDNO:68、SEQIDNO:74中的一种或者与其中一种同源性大于50%的相似序列；
重链CDR3选自：SEQIDNO:3、SEQIDNO:9、SEQIDNO:15、SEQIDNO:21、SEQIDNO:27、SEQIDNO:33、SEQIDNO:39、SEQIDNO:45、SEQIDNO:51、SEQIDNO:57、SEQIDNO:63、SEQIDNO:69、SEQIDNO:75中的一种或者与其中一种同源性大于50%的相似序列；
轻链CDR1选自：SEQIDNO:4、SEQIDNO:10、SEQIDNO:16、SEQIDNO:22、SEQIDNO:28、SEQIDNO:34、SEQIDNO:40、SEQIDNO:46、SEQIDNO:52、SEQIDNO:58、SEQIDNO:64、SEQIDNO:70、SEQIDNO:76中的一种或者与其中一种同源性大于50%的相似序列；
轻链CDR2选自：SEQIDNO:5、SEQIDNO:11、SEQIDNO:17、SEQIDNO:23、SEQIDNO:29、SEQIDNO:35、SEQIDNO:41、SEQIDNO:47、SEQIDNO:53、SEQIDNO:59、SEQIDNO:65、SEQIDNO:71、SEQIDNO:77中的一种或者与其中一种同源性大于50%的相似序列；
轻链CDR3选自：SEQIDNO:6、SEQIDNO:12、SEQIDNO:18、SEQIDNO:24、SEQIDNO:30、SEQIDNO:36、SEQIDNO:42、SEQIDNO:48、SEQIDNO:54、SEQIDNO:60、SEQIDNO:66、SEQIDNO:72、SEQIDNO:78中的一种或者与其中一种同源性大于50%的相似序列。


2.根据权利要求1所述的抗体，其特征在于，重链可变区包含重链CDR1、CDR2和CDR3；轻链可变区包含轻链CDR1、CDR2和CDR3。


3.根据权利要求2所述的抗体，其特征在于，重链可变区氨基酸序列选自：SEQIDNO:79、SEQIDNO:81、SEQIDNO:83、SEQIDNO:85；SEQIDNO:87、SEQIDNO:89、SEQIDNO:91、SEQIDNO:93、SEQIDNO:95、SEQIDNO:97、SEQIDNO:99、SEQIDNO:101或SEQIDNO:103中的一种；
轻链可变区氨基酸序列选自：SEQIDNO:80、SEQIDNO:82、SEQIDNO:84、SEQIDNO:86；SEQIDNO:88、SEQIDNO:90、SEQIDNO:92、SEQIDNO:94、SEQIDNO:96、SEQIDNO:98、SEQIDNO:100、SEQIDNO:102或SEQIDNO:104中的一种。


4.根据权利要求3所述的抗体，其特征在于，
所述重链可变区为SEQIDNO:79且所述轻链可变区为SEQIDNO:80；或
所述重链可变区为SEQIDNO:81且所述轻链可变区为SEQIDNO:82；或
所述重链可变区为SEQIDNO:83且所述轻链可变区为SEQIDNO:84；或
所述重链可变区为SEQIDNO:85且所述轻链可变区为SEQIDNO:86；或
所述重链可变区为SEQIDNO:87且所述轻链可变区为SEQIDNO:88；或
所述重链可变区为SEQIDNO:89且所述轻链可变区为SEQIDNO:90；或
所述重链可变区为SEQIDNO:91且所述轻链可变区为SEQIDNO:92；或
所述重链可变区为SEQIDNO:93且所述轻链可变区为SEQIDNO:94；或
所述重链可变区为SEQIDNO:95且所述轻链可变区为SEQIDNO:96；或
所述重链可变区为SEQIDNO:97且所述轻链可变区为SEQIDNO:98；或
所述重链可变区为SEQIDNO:99且所述轻链可变区为SEQIDNO:100；或
所述重链可变区为SEQIDNO:101且所述轻链可变区为SEQIDNO:102；或
所述重链可变区为SEQIDNO:103且所述轻链可变区为SEQIDNO:104。


5.根据权利要求2所述的抗体，其特征在于，重链可变区氨基酸的序列为与序列a具有至少50%的同源性的相似序列，所述序列a为SEQIDNO:79、SEQIDNO:81、SEQIDNO:83、SEQIDNO:85；SEQIDNO:87、SEQIDNO:89、SEQIDNO:91、SEQIDNO:93、SEQIDNO:95、SEQIDNO:97、SEQIDNO:99、SEQIDNO:101或SEQIDNO:103中的一种。


6.根据权利要求2所述的抗体，其特征在于，轻链可变区氨基酸的序列为与序列b具有至少50%的同源性的相似序列，所述序列b为SEQIDNO:80、SEQIDNO:82、SEQIDNO:84、SEQIDNO:86；SEQIDNO:88、SEQIDNO:90、SEQIDNO:92、SEQIDNO:94、SEQIDNO:96、SEQIDNO:98、SEQIDNO:100、SEQIDNO:102或SEQIDNO:104中的一种。


7.根据权利要求1所述的抗体，其特征在于，重链CDR1为SEQIDNO:1、重链CDR2为SEQIDNO:2、重链CDR3为SEQIDNO:3，且轻链CDR1为SEQIDNO:4、轻链CDR2为SEQIDNO:5、轻链CDR3为SEQIDNO:6；或者
重链CDR1为SEQIDNO:7、重链CDR2为SEQIDNO:8、重链CDR3为SEQIDNO:9，且轻链CDR1为SEQIDNO:10、轻链CDR2为SEQIDNO:11、轻链CDR3为SEQIDNO:12；或者
重链CDR1为SEQIDNO:13、重链CDR2为SEQIDNO:14、重链CDR3为SEQIDNO:15，且轻链CDR1为SEQIDNO:16、轻链CDR2为SEQIDNO:17、轻链CDR3为SEQIDNO:18；或者
重链CDR1为SEQIDNO:19、重链CDR2为SEQIDNO:20、重链CDR3为SEQIDNO:21，且轻链CDR1为SEQIDNO:22、轻链CDR2为SEQIDNO:23、轻链CDR3为SEQIDNO:24；或者
重链CDR1为SEQIDNO:25、重链CDR2为SEQIDNO:26、重链CDR3为SEQIDNO:27，且轻链CDR1为SEQIDNO:28、轻链CDR2为SEQIDNO:29、轻链CDR3为SEQIDNO:30；或者
重链CDR1为SEQIDNO:31、重链CDR2为SEQIDNO:32、重链CDR3为SEQIDNO:33，且轻链CDR1为SEQIDNO:34、轻链CDR2为SEQIDNO:35、轻链CDR3为SEQIDNO:36；或者
重链CDR1为SEQIDNO:37、重链CDR2为SEQIDNO:38、重链CDR3为SEQIDNO:39，且轻链CDR1为SEQIDNO:40、轻链CDR2为SEQIDNO:41、轻链CDR3为SEQIDNO:42；或者
重链CDR1为SEQIDNO:43、重链CDR2为SEQIDNO:44、重链CDR3为SEQIDNO:45，且轻链CDR1为SEQIDNO:46、轻链CDR2为SEQIDNO:47、轻链CDR3为SEQIDNO:48；或者
重链CDR1为SEQIDNO:49、重链CDR2为SEQIDNO:50、重链CDR3为SEQIDNO:51，且轻链CDR1为SEQIDNO:52、轻链CDR2为SEQIDNO:53、轻链CDR3为SEQIDNO:54；或者
重链CDR1为SEQIDNO:55、重链CDR2为SEQIDNO:56、重链CDR3为SEQIDNO:57，且轻链CDR1为SEQIDNO:58、轻链CDR2为SEQIDNO:59、轻链CDR3为SEQIDNO:60；或者
重链CDR1为SEQIDNO:61、重链CDR2为SEQIDNO:62、重链CDR3为SEQIDNO:63，且轻链CDR1为SEQIDNO:64、轻链CDR2为SEQIDNO:65、轻链CDR3为SEQIDNO:66；或者
...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴燕燕，崔文俊，胡琛霏，
申请(专利权)人：瑞阳苏州生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32