【技术实现步骤摘要】
一种有效提高嗜酸性氧化亚铁硫杆菌浸矿能力的方法
本专利技术属于基因工程领域,具体涉及一种有效提高浸矿优势菌嗜酸性氧化亚铁硫杆菌浸矿能力的方法。
技术介绍
嗜酸性氧化亚铁硫杆菌(Axidithiobacillusferrooxidans,简称A.ferrooxidans),是专性化能自养,革兰氏阴性菌,能够固定二氧化碳、氧化亚铁离子、单质硫和还原性无机硫化合物获得能量,是第一个被发现的具有矿石氧化能力的微生物,同时也是浸矿微生物的优势菌株。嗜酸性氧化亚铁硫杆菌独特的生理代谢机制使得该菌在生物冶金工业中得到广泛的应用和比较深入的研究。近年来,生物冶金工业迅速发展,通过利用微生物回收重金属得到广泛应用,与传统的物理化学方法相比,在矿石加工冶炼提取有价金属的工业中使用微生物具有一些明显的优势。几乎无一例外,生物冶金更加环保、可持续,低成本,不需要在焙烧或熔炼过程中使用大量的能量并且不产生硫、二氧化碳或其他有害环境的气体,同时对于低品位矿和尾矿的处理具有明显的优势。然而,由于对微生物生长代谢的理解不充分,大多数生物冶金工厂远离 ...
【技术保护点】
1.一种有效提高嗜酸性氧化亚铁硫杆菌浸矿能力的方法,步骤是:/n(1)以野生型A.ferrooxidans ATCC No.23270基因组序列设计用于扩增密度感应系统AfeI/R操纵子的引物;/nQS sen:CCGCTCGAGGGGTACCCGGGAAAATGCGTCACGTC/nQS ant:TGGACTAGTGCTCTAGAGAGCAGCCCTTCAAATGGT/n以野生型A.ferrooxidans基因组为模板,以QS sen和QS ant为引物,PCR扩增获得含有三个基因afeR,orf3,afeI的核苷酸序列如SEQ No.1所示的AfeI/R操纵子基因片段; ...
【技术特征摘要】
1.一种有效提高嗜酸性氧化亚铁硫杆菌浸矿能力的方法,步骤是:
(1)以野生型A.ferrooxidansATCCNo.23270基因组序列设计用于扩增密度感应系统AfeI/R操纵子的引物;
QSsen:CCGCTCGAGGGGTACCCGGGAAAATGCGTCACGTC
QSant:TGGACTAGTGCTCTAGAGAGCAGCCCTTCAAATGGT
以野生型A.ferrooxidans基因组为模板,以QSsen和QSant为引物,PCR扩增获得含有三个基因afeR,orf3,afeI的核苷酸序列如SEQNo.1所示的AfeI/R操纵子基因片段;将该基因片段连接到载体pJRD215上,随后将连接产物转化到大肠杆菌(E.coli)SM10中,挑选阳性克隆PCR和测序验证后获得重组质粒pJRD215-QS;
以含有重组质粒pJRD215-QS的大肠杆菌SM10为供体菌,以野生型A.ferrooxidans为受体菌,通过接合转移的方式将重组质粒pJRD215-QS转移进入A.ferrooxidans,获得同时增加AfeI/R操纵子三个基因afeI,orf3,afeR的拷贝数的重组工程菌A.ferrooxidans(pJRD215-QS);
(2)将重组工程菌A.ferrooxidans(pJRD21...
【专利技术属性】
技术研发人员:陈林旭,高雪彦,林建群,林建强,刘相梅,庞昕,
申请(专利权)人:山东大学,
类型:发明
国别省市:山东;37
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