【技术实现步骤摘要】
生物体粒子测定用方法、装置及试剂盒、及非特异信号的检测方法
在本说明书中公开了涉及生物体粒子的测定方法、非特异信号的检测方法、粒子测定装置及用于检测生物体粒子的试剂盒的技术。
技术介绍
在生物体内,已知淀粉样凝集体等的凝集体或称为外泌体或微颗粒的各种细胞外小泡等的生物体粒子从细胞内向细胞外释放。近年,这些生物体粒子作为反映组织的病态生理学的信息的生物标志物而受到关注。作为测定细胞外小泡的方法的一例,可举出非专利文献1。在此文献中公开了由作为标记抗体的阴性对照的同种型对照抗体的散点图的荧光强度设定背景信号的阈值,确定CD41阳性的细胞外小泡的方法。【现有技术文献】【非专利文献】【非专利文献1】Aflowcytometricmethodforcharacterizationofcirculatingcell-derivedmicroparticlesinplasma.,NielsenMHetal.,JExtracellVesicles.2014;3.doi:10.3402/jev.v3.20795.eCollection201)【专利技术的概要】【专利技术要解决的课题】本专利技术人发现,在非专利文献1记载的方法中,不能与通过荧光染料标记抗体与细胞外小泡以外的混杂物非特异性地结合而发生的信号区别开有无法正确地检测细胞外小泡的担忧。本公开以判别来源于测定对象的生物体粒子的特异性信号和非特异性的信号,提高生物体粒子的测定精度作为一课题。【用 ...
【技术保护点】
1.生物体粒子的测定方法,其包括:/n(a)将下列试样供于信号检测的检测工序:/n通过将从受试体分取的含生物体粒子的第1试样和能与上述生物体粒子结合并且含标记物质的检测体在能与上述生物体粒子结合并且不含上述标记物质的抑制物质的存在下混合而调制的第1测定试样、及/n通过将从与上述受试体相同的受试体与上述第1试样独立地分取的第2试样和上述检测体在上述抑制物质实质上不存在的条件下混合而调制的第2测定试样,/n其中,在上述检测工序中检测到来源于上述第1测定试样中所含的上述标记物质的信号和来源于上述第2测定试样中所含的上述标记物质的信号,及/n(b)从来源于上述第1测定试样中所含的上述标记物质的信号的检测结果和来源于上述第2测定试样中所含的上述标记物质的信号的检测结果算出上述生物体粒子的测定结果的算出工序。/n
【技术特征摘要】
20180727 JP 2018-1415221.生物体粒子的测定方法,其包括:
(a)将下列试样供于信号检测的检测工序:
通过将从受试体分取的含生物体粒子的第1试样和能与上述生物体粒子结合并且含标记物质的检测体在能与上述生物体粒子结合并且不含上述标记物质的抑制物质的存在下混合而调制的第1测定试样、及
通过将从与上述受试体相同的受试体与上述第1试样独立地分取的第2试样和上述检测体在上述抑制物质实质上不存在的条件下混合而调制的第2测定试样,
其中,在上述检测工序中检测到来源于上述第1测定试样中所含的上述标记物质的信号和来源于上述第2测定试样中所含的上述标记物质的信号,及
(b)从来源于上述第1测定试样中所含的上述标记物质的信号的检测结果和来源于上述第2测定试样中所含的上述标记物质的信号的检测结果算出上述生物体粒子的测定结果的算出工序。
2.权利要求1所述的生物体粒子的测定方法,其中上述标记物质是荧光物质。
3.权利要求1或2所述的生物体粒子的测定方法,其中抑制:
上述检测体与存在于上述生物体粒子的目标分子中所含的目标部位结合,
上述抑制物质的至少一部分与上述目标部位结合,
上述检测体与上述目标部位结合。
4.权利要求3所述的生物体粒子的测定方法,其中上述目标分子是蛋白质或糖链。
5.权利要求3或4所述的生物体粒子的测定方法,其中上述检测体含与上述目标部位结合的抗体。
6.权利要求3~5之任一项所述的生物体粒子的测定方法,其中上述抑制物质含与上述目标部位结合的抗体。
7.权利要求5所述的生物体粒子的测定方法,其中上述检测体含与上述目标部位结合的凝集素。
8.权利要求1~7之任一项所述的生物体粒子的测定方法,其中在上述第1测定试样的调制中,将上述第1试样和上述抑制物质混合,上述抑制物质的至少一部分与上述生物体粒子结合之后,将上述检测体混合而调制上述第1测定试样。
9.权利要求1~7之任一项所述的生物体粒子的测定方法,其中在上述第1测定试样的调制中,以上述检测体和上述抑制物质竞争结合的方式将上述检测体、上述抑制物质和上述第1试样混合而调制上述第1测定试样。
10.权利要求1~9之任一项所述的生物体粒子的测定方法,其中在上述算出工序中,通过从来源于上述第2测定试样中所含的上述标记物质的信号的检测结果减去来源于上述第1测定试样中所含的上述标记物质的信号的检测结果而算出上述生物体粒子的测定结果。
11.权利要求1~10之任一项所述的生物体粒子的测定方法,其中上述受试体选自:全血、血浆、血清、脑脊髓液、淋巴液、及细胞间质液。
12.权利要求1~11之任一项所述的生物体粒子的测定方法,其中上述生物体粒子的大小是30nm以上、并且1,000nm以下。
13.权利要求1~12之任一项所述的生物体粒子的测定方法,其中上述生物体粒子是选自下列的至少一种:外...
【专利技术属性】
技术研发人员:饭野琢也,吉川景子,松本和也,
申请(专利权)人:希森美康株式会社,
类型:发明
国别省市:日本;JP
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