一种检测赭曲霉毒素A的荧光生物传感器的制备方法技术

本发明专利技术属于生物传感检测技术领域，公开了一种检测赭曲霉毒素A的荧光生物传感器的制备方法。本发明专利技术属于一种基于能量共振转移作用的生物传感器，通过利用适配体与CoOOH纳米片的相互作用以及与apt耦合的g‑CNQDs(g‑CNQDs‑apt)和CoOOH纳米片之间的能量共振转移作用，同时引入适配体作为生物识别元件，运用其可与目标物OTA特异性结合的特性，实现实际样品中OTA的快速、低成本、特异性检测。本发明专利技术构建的荧光适配体传感器对OTA的响应范围为1.00×10

Preparation of a fluorescent biosensor for detection of ochratoxin A

【技术实现步骤摘要】
一种检测赭曲霉毒素A的荧光生物传感器的制备方法
本专利技术属于生物传感检测
，具体涉及一种检测赭曲霉毒素A的荧光生物传感器的制备方法，并将其用于对赭曲霉毒素A(OTA)的选择性检测。
技术介绍
谷物生长、收获、储存环节中容易受到真菌侵染引起腐烂变质，在适宜温湿度下会产生具有强毒性的化合物-真菌毒素。真菌毒素是世界各地农产品的主要污染物之一，目前已被发现的真菌毒素共有400余种。赭曲霉毒素A(OTA)是由赭曲霉或青霉菌产生的化合物，广泛分布于玉米、大麦、小麦等谷物中。由于其具有肾毒性、致畸性和免疫毒性作用，OTA被国际癌症研究机构归类为潜在致癌物(2B组)，中国国家标准要求谷物及其制品中OTA含量最高不可超过5μgKg-1。因此，有必要发展一种准确、可靠的分析方法来实现谷物中OTA的分析，以此保障人类身体健康。目前，现有的OTA检测方法各有其优缺点。如高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)和薄层色谱法(TLC)具有较高的准确性和可靠性，但成本相对较高且耗时，操作时必须由专业工作人员在专业实验室中进行。酶联免疫吸附测定法(ELISA本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种检测赭曲霉毒素A的荧光生物传感器的制备方法，其特征在于包含步骤如下：/n(1)合成g-CNQDs；/n(2)g-CNQDs的羧基与OTA适配体修饰的氨基之间发生酰胺反应合成g-CNQDs-apt：/n按比例将步骤(1)制备的g-CNQDs和PBS溶液混合搅拌，在搅拌下缓慢加入OTA适配体溶液，并将混合物溶液连续搅拌一定时间后，制得g-CNQDs-apt，在一定温度下储存备用；/n(3)合成CoOOH纳米片；/n(4)混合g-CNQDs-apt与CoOOH纳米片：/n按比例将步骤(2)制备的g-CNQDs-apt和步骤(3)制备的CoOOH纳米片溶液混合，用PBS溶液调节pH后作用一段时...

【技术特征摘要】
1.一种检测赭曲霉毒素A的荧光生物传感器的制备方法，其特征在于包含步骤如下：
(1)合成g-CNQDs；
(2)g-CNQDs的羧基与OTA适配体修饰的氨基之间发生酰胺反应合成g-CNQDs-apt：
按比例将步骤(1)制备的g-CNQDs和PBS溶液混合搅拌，在搅拌下缓慢加入OTA适配体溶液，并将混合物溶液连续搅拌一定时间后，制得g-CNQDs-apt，在一定温度下储存备用；
(3)合成CoOOH纳米片；
(4)混合g-CNQDs-apt与CoOOH纳米片：
按比例将步骤(2)制备的g-CNQDs-apt和步骤(3)制备的CoOOH纳米片溶液混合，用PBS溶液调节pH后作用一段时间，得到检测赭曲霉毒素A的荧光生物传感器。


2.根据权利要求1所述的一种检测赭曲霉毒素A的荧光生物传感器的制备方法，其特征在于：步骤(1)中，合成g-CNQDs的具体方法为：将1.68mmol柠檬酸三钠和10.08mmol尿素混合并在玛瑙研钵中研磨成细粉；将粉末混合物倒入20mL聚四氟乙烯衬里的高压釜中并在180℃下加热1h后冷却至室温；将固体产物分散在30mL水中并以10000rpm离心10min以除去不溶性杂质；随后，得到的上层溶液用100Da的透析袋在二次水中透析24h移除未反应的前体；烘干称重后溶于二次水中，并在4℃下储存。


3.根据权利要求1所述的一种检测赭曲霉毒素A的荧光生物传感器的制备方法，其特征在于：步骤(2)中，g-CNQDs和PBS的体积比为2:1，混合搅拌的时间为15-30min，其中，g-CNQDs浓度为4mg·mL-1，PBS浓度为100mM，其中，pH＝7.4，含有10mMEDC和5mMNHS；
g-CNQDs与OTA适配体溶液的体积比为1:1；其中，OTA适配体溶液的浓度为1μM；混合物溶液连续搅拌的时间为2-4h；制得的g...

【专利技术属性】
技术研发人员：由天艳，毕晓雅，李丽波，刘晓红，陈柏年，
申请(专利权)人：江苏大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32