【技术实现步骤摘要】
一种马血清去除脂蛋白的生产方法
本专利技术涉及脂蛋白的分离方法，具体涉及马血清去除脂蛋白的生产方法。
技术介绍
人和动物血液中富含蛋白质和酶，能够治疗和挽救生命。有些蛋白质在红细胞中，有些蛋白质存在于血清中。从上世纪中叶，蛋白质的提纯和分离已经成为研究的重要方向。迄今为止，可实现分离的蛋白质有：白蛋白、脂蛋白、纤维蛋白、免疫球蛋白G等。马血清是细胞及微生物培养中用量较大的天然培养基，含有丰富的细胞及微生物生长必须的营养成份，常用于动物细胞的体外培养和细菌、支原体等培养，具有极为重要的功能。但目前市售的马血清均来源于成年马，常含有一定量不利于细胞及微生物生长的物质，例如脂蛋白，既增大了血清的粘稠度，降低了澄清度，同时在使用时常会影响细胞及微生物生长，目前资料显示，没有马血清去除脂蛋白的工业化生产方法。而血浆和血清中含有蛋白质以及其他例如酶等化合物，当血液从动物身上流出暴露在空气或容器中，会变得很不稳定。即使添加柠檬酸钠等化学试剂，也仅能够在一定程度上增加其稳定性，防止凝结。从血清中分离蛋白所用的任何方法都要考虑...
【技术保护点】
1.本专利技术提供一种马血清去除脂蛋白的生产方法，其特征在于，包括以下步骤：/n1)粗过滤，马血清通过多层无菌纱布粗过滤，滤除部分高密度纤维蛋白，/n得滤液A；/n2)初滤，将滤液A通过过滤柱进行初滤，进一步滤除的高密度纤维蛋白和少量高密度脂蛋白，收集滤液B；/n3)将上述滤液B通过孔径为0.05～1um改性醋酸纤维素过滤膜，滤除小分子脂蛋白，收集滤液C；/n4)超滤，将得到的滤液C再通过截留分子量低于100kD的中空纤维超滤柱进行超滤，滤除大分子脂蛋白，将透过液回收无菌保存；/n5)层析，将超滤得到的透过液置于C18树脂中进行层析，流速为60cm/小时，得层析流出液；/n...
【技术特征摘要】
1.本发明提供一种马血清去除脂蛋白的生产方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)粗过滤，马血清通过多层无菌纱布粗过滤，滤除部分高密度纤维蛋白，
得滤液A；
2)初滤，将滤液A通过过滤柱进行初滤，进一步滤除的高密度纤维蛋白和少量高密度脂蛋白，收集滤液B；
3)将上述滤液B通过孔径为0.05～1um改性醋酸纤维素过滤膜，滤除小分子脂蛋白，收集滤液C；
4)超滤，将得到的滤液C再通过截留分子量低于100kD的中空纤维超滤柱进行超滤，滤除大分子脂蛋白，将透过液回收无菌保存；
5)层析，将超滤得到的透过液置于C18树脂中进行层析，流速为60cm/小时，得层析流出液；
6)乙醇沉淀，层析流出液置于反应罐中，加乙醇沉淀，调pH，控制温度，控制反应时间，然后进行离心分离，得上清液A；
7)在上清液A中加入Celite503吸附剂，在设定温度下搅拌一定时间，过滤，去除血清中不稳定的纤维蛋白原和凝血因子，离心，得上清液B；
8)在上清液B中加入多糖微球吸附剂，通过流速至少为3cm/min的吸附柱，以吸附和去除血清中的低密度脂蛋白，得到上清液C，制得去除脂蛋白的马血清成品。
2.根据权利要求1所述的一种马血清去除脂蛋白的生产方法，其特征在于，步骤2)中的初滤利用20英寸孔径为0.45um的过滤柱进行。
3.根据权利要求1所述的一种马血清去除脂蛋白的生产方法，其特征在于，在步骤6)中，离心分离过程中，...
【专利技术属性】
技术研发人员：张永明，李世明，田元元，王旭，姚丽娜，
申请(专利权)人：内蒙古维克生生物技术股份有限公司，
类型：发明
国别省市：内蒙;15
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