一种贴壁细胞的提取方法及用于该方法的提取装置制造方法及图纸

本发明专利技术涉及一种贴壁细胞的提取方法，包括聚丙烯酰胺水凝胶预处理，贴壁细胞的培养，细胞及粘连凝胶的整体挖取以及去表面凝胶等步骤。同时本发明专利技术还设置一种适用于上述提取方法的贴壁细胞的提取装置。本发明专利技术提取方法操作方便易行，不需要繁琐的步骤便可以完成对于贴壁细胞的提取，减少了出错的可能性；同时采用的提取装置结构简单，成本低廉。另外本发明专利技术对于贴壁细胞的破坏很小，对于细胞研究具有重要意义。

An extraction method of adherent cells and its extraction device

【技术实现步骤摘要】
一种贴壁细胞的提取方法及用于该方法的提取装置
本专利技术涉及生物细胞领域，尤其涉及一种贴壁细胞的提取方法及用于该方法的提取装置。
技术介绍
贴壁细胞（Adherentcells），这类细胞的生长必须有可以贴附的支持物表面，细胞依靠自身分泌的或培养基中提供的贴附因子才能在该表面上生长，繁殖。故而该类细胞的分离和提取比较困难和麻烦，目前的提取方法要么步骤繁多，操作麻烦且容易出错；要么细胞伤害较大；因此，提供一种操作简单，对细胞伤害小的贴壁细胞的提取方法及适用于该方法的提取装置对于细胞研究具有重要意义。
技术实现思路
本专利技术克服了现有技术的不足，提供一种操作简单，对细胞伤害小的贴壁细胞的提取方法及适用于该方法的提取装置。为达到上述目的，本专利技术采用的技术方案为：提供了一种贴壁细胞的提取方法，其特征在于：包括以下步骤：在细胞培养孔板上铺上聚丙烯酰胺水凝胶，并使用磷酸缓冲盐溶液浸泡聚丙烯酰胺水凝胶；将聚丙烯酰胺水凝胶在磷酸缓冲盐溶液浸泡的条件下，在紫外线下照射；之后吸走磷酸缓冲盐溶液，采用Sulfo-Sa本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种贴壁细胞的提取方法，其特征在于：包括以下步骤：/n在细胞培养孔板上铺上聚丙烯酰胺水凝胶，并使用磷酸缓冲盐溶液浸泡聚丙烯酰胺水凝胶；/n将聚丙烯酰胺水凝胶在磷酸缓冲盐溶液浸泡的条件下，在紫外线下照射；之后吸走磷酸缓冲盐溶液，采用Sulfo-Sanpah溶液处理所述聚丙烯酰胺水凝胶；之后紫外线照射，再静置；之后吸走Sulfo-Sanpah溶液，采用无血清培养基孵育水凝胶，最后将细胞种在水凝胶上进行稀释培养；/n细胞贴壁后，通过倒置显微镜物镜选取单个细胞；调节取样针到所述细胞位置；将取样针插入所述细胞周围的水凝胶中；移动取样针，破坏所述细胞周围的水凝胶，最终将所述细胞以及粘连在其上的水凝胶整...

【技术特征摘要】
1.一种贴壁细胞的提取方法，其特征在于：包括以下步骤：
在细胞培养孔板上铺上聚丙烯酰胺水凝胶，并使用磷酸缓冲盐溶液浸泡聚丙烯酰胺水凝胶；
将聚丙烯酰胺水凝胶在磷酸缓冲盐溶液浸泡的条件下，在紫外线下照射；之后吸走磷酸缓冲盐溶液，采用Sulfo-Sanpah溶液处理所述聚丙烯酰胺水凝胶；之后紫外线照射，再静置；之后吸走Sulfo-Sanpah溶液，采用无血清培养基孵育水凝胶，最后将细胞种在水凝胶上进行稀释培养；
细胞贴壁后，通过倒置显微镜物镜选取单个细胞；调节取样针到所述细胞位置；将取样针插入所述细胞周围的水凝胶中；移动取样针，破坏所述细胞周围的水凝胶，最终将所述细胞以及粘连在其上的水凝胶整体取出；
采用培养液将所述细胞以及粘连在其上的水凝胶从取样针上冲洗到指定位置；之后采用胰蛋白酶消化处理，去除所述水凝胶；最后将含有细胞的胰蛋白酶移到培养基对细胞进行培养。


2.根据权利要求1所述的贴壁细胞的提取方法，其特征在于：所述聚丙烯酰胺水凝胶由丙烯酰胺、甲叉双丙烯酰胺、过硫酸铵、四甲基乙二胺和水制成。


3.根据权利要求2所述的贴壁细胞的提取方法，其特征在于：所述聚丙烯酰胺水凝胶由30-45wt%的丙烯酰胺水溶液、1.5-3wt%的甲叉双丙烯酰胺水溶液、5-15wt%的过硫酸铵水溶液、四甲基乙二胺和水制成；所述丙烯酰胺水溶液、甲叉双丙烯酰胺水溶液以及水的总体积和过硫酸铵水溶液、四甲基乙二胺的体积比为1000：10-20：0.5-2；所述丙烯酰胺水溶液、甲叉双丙烯酰胺水溶液与水的体积比为1：0.8-2.5：0.8-1.5。


4.根据权利要求3所述的贴壁细胞的提取方法，其特征在于：所述聚丙烯酰胺水凝胶通过以下步骤制成：
a.分别配置丙烯酰胺的水溶液、甲叉双丙烯酰胺的水溶液以及过硫酸铵的水溶液；
b.按比例称取丙烯酰胺溶液...

【专利技术属性】
技术研发人员：罗宗平，郭江博，陈曦，赛吉拉夫，刘智慧，王觉鸣，
申请(专利权)人：苏州博习医疗科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32