rhIL-1Ra在制备治疗急性肝衰竭药物中的应用制造技术

本发明专利技术提供了rhIL‑1Ra在制备治疗急性肝衰竭药物中的应用。与对照组对照发现，rhIL‑1Ra可以显著抑制血清中丙氨酸氨基转移酶和天冬氨酸氨基转移酶的活性，减少肝细胞死亡，促进肝细胞增殖，这显示rhIL‑1Ra具有显著的保护肝损伤及促进肝再生的治疗效果。此外，rhIL‑1Ra通过减少线粒体细胞色素c的释放、caspase‑3、caspase‑8、caspase‑9在肝脏组织的活化介导的抗凋亡作用。综上所述，rhIL‑1Ra为制备减少肝细胞凋亡来治疗APAP诱导的急性肝衰竭和肝损伤的候选药物提供策略。

RhIL-1ra in the preparation of drugs for the treatment of acute liver failure

【技术实现步骤摘要】
rhIL-1Ra在制备治疗急性肝衰竭药物中的应用
本专利技术涉及医药领域，具体涉及rhIL-1Ra在制备治疗急性肝衰竭药物中的应用。
技术介绍
肝脏是一种重要的脏器，承担着代谢调节和储存作为三大营养素的糖、蛋白质和脂质以及分解和解毒机体不需要的物质等各种功能。酒精的过度摄取、病毒感染、不均衡的饮食习惯、压力和吸烟等会引起这些功能受到急性或慢性损伤，并且当该损伤发展时，会出现例如急性肝炎、慢性肝炎、肝硬化、酒精性脂肪肝、乙型病毒肝炎、肝癌、急性肝衰竭等疾病。急性肝衰竭(Acuteliverfailure)是一种危及生命的疾病，以肝功能突然丧失为特征，既往无肝脏疾病病史，肝细胞大量死亡，仅有少量肝脏再生。对乙酰氨基酚(APAP)诱导的急性肝衰竭患者的细胞死亡模式仍存在争议。然而，近年来的许多研究表明，肝细胞凋亡在肝衰竭中起着比肝细胞坏死更重要的作用。目前，APAP是西方国家急性肝衰竭最常见的病因。N-acetyl-L-半胱氨酸，可用于临床治疗APAP引起的急性肝衰竭，但也只有当治疗是在急性肝衰竭进展的相对早期阶段才是有效的。而且，针对其他病原体诱导的急性肝衰竭，除了紧急肝移植之外，目前仍然没有有效的治疗方法。而且，肝移植技术的应用非常有限，因为肝脏供体来源有限，而且治疗费用昂贵。因此，确定治疗急性肝衰竭病的有效药物疗法是很重要的。白细胞介素(IL)1家族由11个成员组成，包括2个激动剂，即IL-1a和IL-1β，2个受体，即具有生物活性的IL-1RI和惰性的IL-1RII，以及一个特异性受体拮抗剂，即IL-1受体拮抗剂(IL-1Ra)。IL-1Ra在结构上与IL-1相似，IL-1Ra可以与IL-1受体紧密结合，从而阻断IL-1/IL-1RI的信号通路传导。IL-1和IL-1Ra在各种炎症状态下均由各种细胞如中性粒细胞、巨噬细胞和纤维原细胞大量产生。2001年，rhIL-1Ra被批准用于临床治疗顽固性类风湿性关节炎患者，而传统药物对这些患者的疗效非常有限。用IL-1Ra阻断IL-1活性可有效阻断渐进性关节间隙狭窄。许多研究表明，IL-1Ra在对抗炎症中发挥重要作用。Fujioka等报道，以灭活的acnesPropioniobacteRaum和lipopolyside的相继处理导致肝坏死，IL-1ra和IL-1的肝内表达增强，使用中和IL-1ra的方法则进一步加重了肝损伤。目前已知，在APAP诱导的肝损伤中，IL-1和IL-1Ra在组织中的表达明显增强，肝内IL-1水平与器官损伤的严重程度相关。因此，针对肝损伤疾病或急性肝衰竭，本专利技术拟提供重组人白细胞介素-1受体拮抗剂(rhIL-1Ra)在制备治疗其药物中的应用。
技术实现思路
本专利技术针对现有技术的不足，提供了rhIL-1Ra在制备治疗急性肝衰竭药物中的应用。通过研究APAP诱导的急性肝衰竭小鼠中rhIL-1Ra的生物活性，rhIL-1Ra对肝损伤的保护作用和肝再生的促进作用，以及急性肝衰竭过程中的细胞死亡模式，发现重组人白细胞介素-1受体拮抗剂(rhIL-1Ra)可显著提高APAP诱导的急性肝衰竭小鼠的存活率，rhIL-1Ra可以显著抑制血清中丙氨酸氨基转移酶和天冬氨酸氨基转移酶的活性，减少肝细胞死亡，促进肝细胞增殖。因此，rhIL-1Ra为制备治疗急性肝衰竭和肝损伤提供了新的靶点。为实现上述目的，本专利技术采用以下技术方案：本专利技术第一方面提供了rhIL-1Ra在制备治疗急性肝衰竭药物中的应用。进一步地，该急性肝衰竭是由乙酰氨基酚诱导的。本专利技术的第二方面提供了rhIL-1Ra在制备抑制肝细胞凋亡药物中的应用。本专利技术的第三方面提供了一种治疗急性肝衰竭的药物，该药物的有效成分为rhIL-1Ra。本专利技术的第四方面提供了一种抑制血清转氨酶活性的药物，该药物的有效成分为rhIL-1Ra。本专利技术的第五方面提供了一种抑制肝细胞凋亡的药物，该药物的有效成分为rhIL-1Ra。本专利技术的第六方面提供了一种促进肝细胞增殖的药物，该药物的有效成分为rhIL-1Ra。本专利技术的第七方面提供了一种抑制Caspase活性的药物，该药物的有效成分为rhIL-1Ra。本专利技术采用以上技术方案，与现有技术相比，具有如下技术效果：根据rhIL-1Ra可以促进肝细胞增殖、抑制肝细胞凋亡等特性可以看出，rhIL-1Ra为制备治疗肝损伤和急性肝衰竭的药物提供了新的策略，克服肝移植过程中肝脏供体来源有限、治疗费用昂贵的缺点。附图说明图1为本专利技术一实施例中治疗组ALF小鼠与对照组的生存率对比图(其中，图A为皮下注射650mg/kgAPAP诱导的ALF小鼠，图B为皮下注射550mg/kgAPAP诱导的ALF小鼠)；图2为本专利技术一实施例中治疗组ALF小鼠与对照组中的血清ALT、AST活力水平的比较图(其中，图a为血清ALT活力水平的比较图(n＝10，**p<0.01)，图b为血清AST活力水平的比较图(**p<0.01))；图3为本专利技术一实施例中治疗组的ALF小鼠与对照组的小鼠在APAP诱导后3h和6h的肝脏坏死面积对比图(其中，图A为治疗组和对照组肝脏大体图；图B为各组具有代表性的肝脏病理切片图(HE染色，×100)；图C为各组肝脏坏死面积(100倍镜下视野面积统计)的比较(n＝10，**p<0.01))；图4为本专利技术一实施例中治疗组的ALF小鼠与对照组的小鼠在APAP诱导后3h和6h的肝细胞凋亡数量对比图(其中，图A为各组肝细胞凋亡检测具有代表性的图片(TUNEL，×200)；图B为各组细胞凋亡数量(200倍镜下视野统计)的比较(n＝10，**p<0.01))。图5为本专利技术一实施例中APAP诱导后48h存活的治疗组的ALF小鼠与对照组死亡小鼠的肝脏比较图(其中，第一排为肝脏宏观图；第二排为肝脏的显微镜图像(HE染色，×100)；第三排为肝细胞凋亡检测对比图(TUNEL染色，×200)；a组为治疗组；b组为对照死亡组)；图6为本专利技术一实施例中通过PCNA检测，治疗组与对照组小鼠的肝细胞增殖的对比图(其中，图a为免疫组化的对比图(×100)；图b为100倍镜下视野中PCNA阳性细胞数量的对比图(**P<0.01)；C3、C6分别代表3、6h时的NS组，T3、T6分别代表3、6h时的rhIL-1Ra组)；图7为本专利技术一实施例中治疗组与对照组APAP诱导后24h存活的小鼠的肝细胞随时间增殖的对比图(其中，图A为各组(24h、48h、96h及168h时间点)PCNA阳性细胞检测具有代表性的图片(免疫组化，×100)；图B为肝细胞增殖速率对比图(n＝10，**p<0.01))；图8为本专利技术一实施例中rhIL-1Ra对550mg/kgAPAP诱导的ALF小鼠肝细胞凋亡通路的影响图(其中，图a为细胞色素c和Bax的凝胶电泳图；图b-d分别为caspase-3、caspase-8和caspase-9活性对比图(**P<0.01))本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.rhIL-1Ra在制备治疗急性肝衰竭药物中的应用。/n

【技术特征摘要】
1.rhIL-1Ra在制备治疗急性肝衰竭药物中的应用。


2.根据权利要求1所述的rhIL-1Ra在制备治疗急性肝衰竭药物中的应用，其特征在于，所述急性肝衰竭是由乙酰氨基酚诱导的。


3.一种治疗急性肝衰竭的药物，其特征在于，所述药物的有效成分为rhIL-1Ra。


4.一种抑制血清转氨酶活性的药物，其特...

【专利技术属性】
技术研发人员：胡建军，
申请(专利权)人：上海市第六人民医院，
类型：发明
国别省市：上海;31