一种阿托西班的制备方法技术

本发明专利技术提供了一种阿托西班的制备方法，方法中采用了特殊的保护氨基酸片段：Mpr(R)‑D‑Tyr(Et)，提高了规模化制备中产品的纯度和收率。

A preparation method of atoxicam

【技术实现步骤摘要】
一种阿托西班的制备方法
本专利技术涉及医药合成领域，具体涉及一种阿托西班的制备方法。
技术介绍
阿托西班(Atosiban)一种合成的肽类物质，可在受体水平对人催产素产生竞争性抑制作用。大鼠和豚鼠的动物试验结果显示本品与催产素受体结合后可降低子宫的收缩频率和张力，抑制子宫收缩。本品也与加压素受体结合抑制加压素的作用。阿托西班具有以下的结构：有关阿托西班的制备方法，目前国内现有技术的一般做法为Fmoc固相合成法，采用氨基树脂为开始的载体树脂，依次接入保护氨基酸，所得阿托西班碘氧化后裂解，获得阿托西班。但是，上述现有工艺在粗肽纯度方面以及总收率方面都存在不足。此外，在本产品结构中有D-Tyr(Et)，由于Fmoc-D-Tyr(Et)在接肽过程中容易发生消旋反应，产生[Tyr(Et)2]-阿托西班杂质，该杂质与阿托西班自身的极性相近，通过纯化很难完全去掉，从而影响了产品质量。
技术实现思路
本专利技术提供一种阿托西班的制备方法，目的制备高纯度的阿托西班，为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：本专利技术提供了一种阿托西班的制备方法，包括：采用氨基树脂为起始树脂，固相合成阿托西班线性肽树脂，阿托西班线性肽树脂酸解后获得阿托西班线性肽，阿托西班线性肽采用醋酸溶液溶解，然后搅拌下滴加碘至完全环化，获得阿托西班粗品，阿托西班粗品纯化后获得纯品。其中阿托西班多树脂的合成过程中除了使用其他常规的保护氨基酸，同时使用了以下特殊保护氨基酸片段Mpr(R)-D-Tyr(Et)。阿托西班树脂为：Mpr(R)-D-Tyr(Et)-Ile-Thr(tBu)-Asn(Trt)-Cys(Trt)-Pro-Orn(Boc)-Gly-氨基树脂上述阿托西班的制备方法中，所述的氨基树脂，其氨基取代值为0.3～1.5mmol/g树脂，优选的取代值为0.5～1.0mmol/g树脂。上述阿托西班的制备方法中，所述氨基树脂为RinkMBHA树脂、RinkAmide树脂或RinkAmideAM树脂中的一种，优选为RinkAmideMBHA树脂。上述阿托西班的制备方法中，所述的Fmoc-保护氨基酸或保护氨基酸片段的用量为所投料树脂总摩尔数的1.2～6倍；优选为2.5～3.5倍。作为本专利技术优选的方案，上述阿托西班树脂经酸解同时脱去树脂及侧链保护基，得到阿托西班素线性肽粗品。进一步地，所述阿托西班树脂酸解时采用的酸解剂为三氟醋酸(TFA)、1，2-乙二硫醇(EDT)和水混合溶剂，混合溶剂的配比为：TFA的比列为80-95％(V/V)，EDT的比例为1～10％(V/V)，余量为水。优选的配比TFA为89-91％、EDT4-6％、余量为水。最优的，配比为90％、EDT5％、余量为水。所述酸解剂用量为每克阿托西班树脂需要4～15ml酸解剂，优选的，每克阿托西班树脂需要9～11ml酸解剂。使用酸解剂裂解的时间为室温条件下1～5小时，优选的为2小时。进一步的，阿托西班线性肽粗品用醋酸溶解，过滤后用氧化剂氧化环化，得到阿托西班粗品溶液。醋酸的体积百分比浓度为20～40％，优选为30％。氧化剂为碘、H2O2或DMSO，优选为碘。氧化剂采用滴定方式加入，到氧化终点时停止加入。进一步的，阿托西班粗品经高效液相色谱纯化、冻干得到阿托西班纯品，具体方法为：采用高效液相色谱法进行纯化，纯化用色谱填料为10μm的反相C18，采用种流动相系统为0.1％TFA/水溶液-0.1％TFA/乙腈溶液，77mm*250mm的色谱柱流速为90mL/min，采用梯度系统洗脱，循环进样纯化，取粗品溶液上样于色谱柱中，启动流动相洗脱，收集主峰蒸去乙腈后，用0.45μm滤膜滤过，得阿托西班纯化中间体浓缩液；采用高效液相色谱法进行换盐，流动相系统为1％醋酸/水溶液-乙腈，纯化用色谱填料为10μm的反相C18，77mm*250mm的色谱柱流速为90mL/min(可根据不同规格的色谱柱，调整相应的流速)；采用梯度洗脱，循环上样方法，上样于色谱柱中，启动流动相洗脱，采集图谱，观测吸收度的变化，收集换盐主峰并用分析液相检测纯度，合并换盐主峰溶液，减压浓缩，得到阿托西班醋酸水溶液，冷冻干燥，得阿托西班纯品。具体实施方式本专利技术公开了一种合成阿托西班的方法，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本专利技术。本专利技术的方法已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本
技术实现思路
、精神和范围内对本文所述方法进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本专利技术技术。在本专利技术具体实施方式中，申请文件中所用英文缩写对应的中文含义见表1。表1英文缩写释义英文缩写中文名称英文缩写中文名称Fmoc9-芴甲氧羰基Acm乙酰氨甲基tBu叔丁基Trt三苯甲基Boc叔丁氧羰基Asn门冬酰胺Gly甘氨酸Thr苏氨酸Orn鸟氨酸Ile异亮氨酸Pro脯氨酸D-Tyr(Et)O-乙基-D-酪氨酸Cys半胱氨酸Mpr巯基丙酸下面结合实施例，进一步阐述本专利技术。实施例1：阿托西班肽树脂的合成阿托西班树脂为：Mpr(R)-D-Tyr(Et)-Ile-Thr(tBu)-Asn(Trt)-Cys(Trt)-Pro-Orn(Boc)-Gly-氨基树脂使用RinkAmideMBHA树脂为起始树脂，通过去Fmoc保护和偶联反应，依次与表2所示的保护氨基酸偶联，制得阿托西班树脂。本实施例使用的保护氨基酸相对应的保护氨基酸或片段如下所示：表2接肽顺序n＝保护氨基酸1Fmoc-Gly-OH2Fmoc-Orn(Boc)3Fmoc-Pro4Fmoc-Cys(Trt)5Fmoc-Asn(Trt)6Fmoc-Thr(tBu)7Fmoc-Ile8Mpr(R)-D-Tyr(Et)1、接入第1个保护氨基酸取0.15mol第1个保护氨基酸和0.15molHOBt，用适量DMF溶解；另取0.15molDIC，搅拌下慢慢加入至保护氨基酸DMF溶液中，于室温环境中搅拌反应30分钟，得到活化后的保护氨基酸溶液，备用。取0.05mol的RinkAmideMB本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种阿托西班的制备方法，其特征在于，包括：采用氨基树脂为起始树脂，固相合成阿托西班线性肽树脂，阿托西班线性肽树脂酸解后获得阿托西班线性肽，阿托西班线性肽采用醋酸溶液溶解，然后搅拌下滴加碘至完全环化，获得阿托西班粗品，阿托西班粗品纯化后获得纯品：/n

【技术特征摘要】
1.一种阿托西班的制备方法，其特征在于，包括：采用氨基树脂为起始树脂，固相合成阿托西班线性肽树脂，阿托西班线性肽树脂酸解后获得阿托西班线性肽，阿托西班线性肽采用醋酸溶液溶解，然后搅拌下滴加碘至完全环化，获得阿托西班粗品，阿托西班粗品纯化后获得纯品：

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2.根据权利要求1所述阿托西班的制备方法，其特征在于：在接入第1位Mpr和第2位D-Tyr时一并接入，对应的保护氨基酸为Mpr(R)-D-Tyr(Et)。


3.根据权利要求1所述阿托西班的制备方法，其特征在于，所述的氨基树脂，其氨基取代值为0.3～1.5mmol/g树脂，优选的取代值为0.5～1.0mmol/g树脂。


4.根据权利要求1所述阿托西班的制备方法，其特征在于，所述氨基树脂为RinkMBHA树脂、RinkAmide树脂或RinkAmid...

【专利技术属性】
技术研发人员：董华建，郭德文，文永均，
申请(专利权)人：成都圣诺生物制药有限公司，
类型：发明
国别省市：四川;51