柴胡皂苷a在制备防治银屑病的药物中的应用制造技术

本发明专利技术提供了涉及柴胡皂苷a在制备防治银屑病的药物中的应用，属于生物医药技术领域，所述药物以柴胡皂苷a为活性成分，以生理盐水为溶剂溶解柴胡皂苷a获得。采用本发明专利技术所述药物适当的剂量灌胃治疗咪喹莫特银屑病模型小鼠，能够抑制小鼠皮损的炎症反应，改善鳞屑和皮损厚度，能够抑制人表皮角质形成细胞HEKa细胞系的过度增殖；柴胡皂苷a通过诱导细胞线粒体跨膜电位Δψ降低和氧自由基ROS产生来减缓银屑病的进展以及促进皮损恢复正常。相比其它治疗银屑病药物，作用机制更加明确；安全性更好。

Application of saikosaponin a in the preparation of drugs for the prevention and treatment of psoriasis

【技术实现步骤摘要】
柴胡皂苷a在制备防治银屑病的药物中的应用
本专利技术属于生物医药
，尤其涉及柴胡皂苷a在制备防治银屑病的药物中的应用。
技术介绍
银屑病是一种常见的免疫介导的慢性复发性炎症性皮肤病，其特征是表皮增生、免疫细胞浸润、皮肤血管生成增加和局部各种炎症介质上调。银屑病的典型皮损表现为鳞屑性红斑或斑块，其反复发作和长期病程对于患者的身体、心理、精神等均造成严重的影响。银屑病组织病理主要表现为角化过度和角化不全，角化不全区域常可见中性粒细胞集聚，称Munro微脓肿。表皮突延伸，真皮乳头上延成杵状，其上方棘层变薄。乳头内毛细血管迂曲扩张充血，管周炎细胞浸润。对于银屑病的治疗，轻度以外用药物为主，中重度可使用系统治疗，对传统系统性药物治疗效果欠佳的患者可适当选择靶向生物制剂治疗。但由于一些药物的副作用及价格等因素，银屑病的治疗仍然面临困难，是研究的重点所在。柴胡，属于伞形科植物柴胡或狭叶柴胡的干燥根，具有多种药理作用，如免疫调节、抗炎保肝、抗肿瘤及抗细胞黏附等。柴胡的主要成分根据其化学结构不同可分为柴胡皂苷a、b、c和d，以柴胡皂苷a和柴胡皂苷d为主，具有多种生物学活性，是评价柴胡质量的重要指标。柴胡皂苷a属于五烷三萜类齐果烷型衍生物，其化学结构式为C42H68O13，分子量为780.98，其化学结构式如图1。柴胡皂苷a具有抗炎、免疫调节、抗病毒等多种药理作用。目前对于柴胡皂苷a防治银屑病的机理和效果尚不明确。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术的目的在于提供柴胡皂苷a在制备防治银屑病的药物中的应用。为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供了以下技术方案：本专利技术提供了柴胡皂苷a在制备防治银屑病的药物中的应用，所述药物以柴胡皂苷a为活性成分，以生理盐水为溶剂溶解柴胡皂苷a获得。优选的，所述药物中柴胡皂苷a的浓度为10～20mg/ml。优选的，所述药物中柴胡皂苷a的浓度为12～18mg/ml。优选的，所述生理盐水为质量浓度0.9％的NaCl溶液。本专利技术提供了柴胡皂苷a在制备抑制人表皮角质形成细胞过度增殖的药物中的应用。本专利技术提供了柴胡皂苷a在制备降低银屑病小鼠模型中炎症因子mRNA表达的药物中的应用。优选的，所述炎症因子包括TNF-a、IL-17A、IL-8和IL-1β。本专利技术提供了柴胡皂苷a在制备诱导细胞中线粒体跨膜电位Δψ降低药物中的应用。本专利技术提供了柴胡皂苷a在制备诱导细胞中氧自由基ROS产生的药物中的应用。本专利技术的有益效果：本专利技术提供的柴胡皂苷a在制备防治银屑病的药物中的应用，所述药物以柴胡皂苷a为活性成分，以生理盐水为溶剂溶解柴胡皂苷a获得。采用本专利技术所述药物适当的剂量灌胃治疗咪喹莫特银屑病模型小鼠，能够抑制小鼠皮损的炎症反应，改善鳞屑和皮损厚度；所述药物能够抑制人表皮角质形成细胞HEKa细胞系的过度增殖，从而抑制银屑病。柴胡皂苷a通过诱导细胞线粒体跨膜电位Δψ降低和氧自由基ROS产生来减缓银屑病的进展以及促进皮损恢复正常。柴胡皂苷a通过诱导银屑病发病通路中ROS产生，下调炎症因子表达水平来抑制银屑病，相比其它治疗银屑病药物，作用机制更加明确；所述药物中柴胡皂苷a及其辅料生理盐水都对身体无毒副作用，具有良好的安全性。附图说明图1为柴胡皂苷a的分子结构式；图2为不同剂量的柴胡皂苷a灌胃治疗咪喹莫特小鼠的临床照片，其中阳性对照组为0.5mg/kg/d甲氨蝶呤，阴性对照组质量浓度0.9％的生理盐水，治疗组为37.5mg/kg/d、75mg/kg/d和150mg/kg/d的柴胡皂苷a；图3为对照组及治疗组咪喹莫特小鼠的PASI评分，其中a为红斑的PASI评分，b为鳞屑的PASI评分，c为皮肤厚度的PASI评分，d为总的PASI评分；图4为对照组和治疗组咪喹莫特小鼠皮损的组织学照片；图5为对照组和治疗组咪喹莫特小鼠皮损的HPSS评分，其中a为表皮(Epidermis)的评分，b为血管(Vascularity)变化的评分，c为浸润(Infiltration)情况的评分；图6为提取对照组和治疗组咪喹莫特小鼠皮损总的RNA，real-timePCR检测银屑病相关炎症因子的相对表达变化；其中a为白介素-17，b为肿瘤坏死因子(TNF-a)，c为白介素-1β。图7为在HEKa细胞应用不同浓度的柴胡皂苷a刺激24h、48h及72h后，应用MTT法检测对HEKa细胞增殖的影响；图8为不同浓度柴胡皂苷a刺激HEKa细胞24h后，各组线粒体膜电位Δψ的变化；图9为不同浓度柴胡皂苷a刺激HEKa细胞24h后，各组活性氧ROS含量变化。具体实施方式本专利技术提供了柴胡皂苷a在制备防治银屑病的药物中的应用，所述药物以柴胡皂苷a为活性成分，以生理盐水为溶剂溶解柴胡皂苷a获得。在本专利技术中，所述药物中柴胡皂苷a的浓度优选为10～20mg/ml，更优选为12～18mg/ml，最优选为15mg/ml。在本专利技术中，所述生理盐水优选为质量浓度0.9％的NaCl溶液。本专利技术对所述柴胡皂苷a和生理盐水的来源和规格没有特殊限定，采用本领域常规市售产品即可；所述生理盐水优选的自行制备获得。在本专利技术中，所述药物的制备方法优选的如下：将柴胡皂苷a粉末离心后溶于生理盐水中获得悬浊液。在本专利技术中所述离心的转速优选为1500～2500rpm，更优选为2000rpm；所述离心的时间优选为50～70s，更优选为60s；本专利技术中所述离心的目的是使附壁药物离心至管底，充分溶解。本专利技术提供了柴胡皂苷a在制备抑制人表皮角质形成细胞过度增殖的药物中的应用。在本专利技术中，所述人表皮角质形成细胞优选的选择HEKa细胞进行试验，本专利技术优选的应用不同浓度的柴胡皂苷a刺激HEKa细胞24h、48h及72h后，应用MTT法检测对HEKa细胞增殖的影响。本专利技术实验结果表明柴胡皂苷a能够抑制人表皮角质形成细胞的过度增殖。本专利技术提供了柴胡皂苷a在制备降低银屑病小鼠模型中炎症因子mRNA表达的药物中的应用。在本专利技术中，所述炎症因子优选的包括TNF-a、IL-17A、IL-8和IL-1β；所述炎症因子的mRNA表达优选的通过real-timePCR进行检测。本专利技术提供了柴胡皂苷a在制备诱导细胞中线粒体跨膜电位Δψ降低药物中的应用。本专利技术采用不同浓度的柴胡皂苷a刺激aHEKa细胞24h、48h及72h后，检测线粒体跨膜电位Δψ，所述线粒体跨膜电位Δψ显著降低。本专利技术还提供了柴胡皂苷a在制备诱导细胞中氧自由基ROS产生的药物中的应用。本专利技术采用不同浓度的柴胡皂苷a刺激aHEKa细胞24h、48h及72h后，检测细胞中氧自由基ROS，所述细胞中氧自由基ROS的水平显著升高。下面结合实施例对本专利技术提供的技术方案进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本专利技术保护范围的限定。实施例11)对照组和实验组动物模型的建立及PASI评分从西安交通大学医学院动物实本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.柴胡皂苷a在制备防治银屑病的药物中的应用，其特征在于，所述药物以柴胡皂苷a为活性成分，以生理盐水为溶剂溶解柴胡皂苷a获得。/n

【技术特征摘要】
1.柴胡皂苷a在制备防治银屑病的药物中的应用，其特征在于，所述药物以柴胡皂苷a为活性成分，以生理盐水为溶剂溶解柴胡皂苷a获得。


2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物中柴胡皂苷a的浓度为10～20mg/ml。


3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述药物中柴胡皂苷a的浓度为12～18mg/ml。


4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述生理盐水为质量浓度0.9％的NaCl溶液。

【专利技术属性】
技术研发人员：郑焱，刘萌，邵永平，
申请(专利权)人：西安交通大学，
类型：发明
国别省市：陕西;61