Fc融合蛋白的纯化方法技术

本发明专利技术公开了一种Fc融合蛋白的纯化方法，涉及生物技术领域。本发明专利技术公开的Fc融合蛋白的纯化方法包括将含有Fc融合蛋白的洗脱液的pH值调节至4.9‑5.1。本发明专利技术提供的纯化方法可以显著降低产物中的高聚集体Fc融合蛋白，提高Fc融合蛋白的纯度。

Purification of Fc fusion protein

【技术实现步骤摘要】
Fc融合蛋白的纯化方法
本专利技术涉及生物
，具体而言，涉及Fc融合蛋白的纯化方法。
技术介绍
白细胞介素-10(IL-10)细胞因子，由Mosmannand等于1989年首次报道，是一种多效细胞因子，对免疫系统具有双向调节作用，其通过T细胞、B细胞、巨噬细胞和抗原呈递细胞调节多种免疫应答。一方面，IL-10可通过抑制活化的单核细胞和活化的巨噬细胞中IL-1α，IL-1β，IL-6，IL-8，TNF-α，GM-CSF和G-CSF的表达来抑制主要与炎症相关的免疫应答；另一方面，JohnB.Mumm等发现IL-10可诱导并刺激肿瘤浸润性CD8+T分泌细胞毒细胞因子γ干扰素(IFN-γ)，并进一步介导细胞毒物质颗粒酶B(GranzymeB)和穿孔素(perfolin)等的产生，从而抑制并杀伤肿瘤细胞，表现出相应的免疫刺激作用。ARMOBIOSCIENCES,INC.报道了其聚乙二醇化IL-10(PEG-IL-10，AM0010)剂量依赖性抗肿瘤活性。鉴于IL-10相关疾病，病症和病症的患病率以及严重程度，调节IL-10功能方面的IL-1本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种Fc融合蛋白的纯化方法，其特征在于，其包括：将含有Fc融合蛋白的洗脱液的pH值调节至4.9-5.1。/n

【技术特征摘要】
1.一种Fc融合蛋白的纯化方法，其特征在于，其包括：将含有Fc融合蛋白的洗脱液的pH值调节至4.9-5.1。


2.根据权利要求1所述的纯化方法，其特征在于，所述纯化方法还包括：
从亲和层析柱上洗脱所述Fc融合蛋白，以得到含有所述Fc融合蛋白的所述洗脱液；
优选地，使用初始洗脱液从亲和层析柱上洗脱所述Fc融合蛋白，收集洗脱后的初始洗脱液，以得到含Fc融合的所述洗脱液，其中，所述初始洗脱液的pH值为2-3.5；
优选地，所述初始洗脱液的pH值为3.4；
优选地，所述亲和层析柱选自ProteinA或ProteinG或ProteinL。


3.根据权利要求2所述的纯化方法，其特征在于，在收集洗脱后的初始洗脱液时，所用的收集容器中加入有中和缓冲液以使洗脱后的初始洗脱液与所述中和缓冲液混合后的溶液pH为6-7，即得到含有所述Fc融合蛋白的所述洗脱液；
优选地，所述中和缓冲液为Tris溶液，pH为7.5-8.5，浓度为0.8-1.2M。


4.根据权利要求3所述的纯化方法，其特征在于，所述初始洗脱液选自醋酸钠溶液、柠檬酸钠和甘氨酸溶液中的任意一种；
优选地，所述初始洗脱液为醋酸钠溶液，更优选地，所述醋酸钠溶液的浓度为18-22mM。


5.根据权利要求3所述的纯化方法，其特征在于，所述纯化方法还包括：在使用所述初始洗脱液进行洗脱前，先用PBS缓冲液清洗所述亲和层析柱；
所述PBS缓冲液的浓度含有：9-11mMPB，140-160mMNaCl，pH为7.2-7.4。

【专利技术属性】
技术研发人员：刘云鹏，芦迪，刘恒嘉，
申请(专利权)人：深圳市菲鹏生物制药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44