地中海贫血病基因治疗载体构建方法及其用途技术

本发明专利技术涉及一种表达人β球蛋白HBB基因的重组慢病毒载体及其制备。其中，该载体是自身失活的第三代慢病毒载体，所述的HBB基因的序列如SEQ ID NO：1所示。本发明专利技术还提供了该载体的制备方法，以及该载体在制备治疗地中海贫血病药物中的用途。

Construction and application of gene therapy vector for thalassemia

【技术实现步骤摘要】
地中海贫血病基因治疗载体构建方法及其用途
本专利技术涉及一种重组人β珠蛋白及其表达载体构建方法，属于基因工程

技术介绍
地中海贫血(Thalassemia)，又称作珠蛋白生成障碍性贫血或海洋性贫血，这是一种因血红蛋白A合成异常导致的遗传性血液类疾病。血红蛋白A是血红细胞中的含铁蛋白，是人体内负责氧运输的关键，它的异常会导致血红细胞存活时间变短且无法有效的携氧，重度患者甚至不能有效制造血红细胞导致长期的溶血性贫血，完全无法正常生活。血红蛋白A是由两种珠蛋白肽链(α珠蛋白和β珠蛋白)的四条肽链组合而成(α2β2)，根据受影响的珠蛋白肽链的不同，地中海贫血主要可分为α地中海贫血和B地中海贫血两大类。地中海贫血是一类最常见的人类单基因遗传病，据估计，携带有α地中海贫血相关突变的人群比例为5％，在我国南方的某些地区，α地中海贫血相关突变的携带者比例甚至高达40％。而每年新生儿中地中海贫血的发病率为0.44/千人。根据携带突变的不同，地中海贫血的患者症状也有很大差异，轻度患者的生活接近正常人群，然而重度患者由于血红素的不足和血红细胞的低携本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种重组载体，其特征在于，该重组载体包含自身失活的慢病毒载体序列和HBB编码多核苷酸基因序列的至少一部分，其中所述HBB编码多核苷酸基因序列如SEQ ID NO：1所示。/n

【技术特征摘要】
1.一种重组载体，其特征在于，该重组载体包含自身失活的慢病毒载体序列和HBB编码多核苷酸基因序列的至少一部分，其中所述HBB编码多核苷酸基因序列如SEQIDNO：1所示。


2.如权利要求1所述的重组载体，其特征在于，所述重组载体的序列如SEQIDNO：2-4中任一个序列所示。


3.如权利要求1所述的重组载体，其特征在于，所述重组载体使用的启动子选自UbC启动子、EF1α启动子和CAG启动子中的一种。


4.如权利要求1所述的重组载体，其特征在于，所述重组载体包括WPRE元件。


5.如权利要求1至4任一项所述的重组载体，其特征在于，所述重组载体是在所述自身失活的慢病毒载体的多克隆位点中连接了HBB基因序列。


6.一种重组载体的制备方法，其特征在于，
将HBB编码多核苷酸的至少一部分连接到自身失活的慢病毒载体的多克隆位点中构建重组载体，再将阳性重组载体转染宿主细胞培养，获得重组载体，所述HBB编码多核苷酸基因序列如SEQIDNO：1所示。


7.如权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述重组载体的序列如SEQIDNO：2-4中任一个所示。


8.如权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述重组载体的启动子选自UbC启动子、EF1α启动子和CAG启动子中的一种。


9.如权利要求6所述的制备方法，其特征在于，在所述HBB编码多核苷酸连接入慢病毒载体所采用的酶切位点为B...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨侃，
申请(专利权)人：合肥瑞灵生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：安徽;34