一种EV71病毒核酸质粒及其构建方法及应用技术

本发明专利技术公开了一种EV71病毒核酸质粒，其中所述EV71病毒核酸质粒包括EV71病毒全长cDNA序列和真核表达质粒序列。本发明专利技术还提供了所述EV71病毒核酸质粒的构建方法，该病毒核酸质粒能够在肿瘤细胞中包装出活体病毒并引发肿瘤细胞的凋亡。本发明专利技术还提供了所述EV71病毒核酸质粒用于制备抑制实体瘤药物的用途。本发明专利技术的EV71病毒核酸质粒通过运载工具能够进入到肿瘤细胞中包装出活体病毒，引发肿瘤细胞的凋亡，有效提高病毒溶瘤的功能。

A nucleic acid plasmid of EV71 virus and its construction and Application

【技术实现步骤摘要】
一种EV71病毒核酸质粒及其构建方法及应用
本专利技术涉及生物医药领域，具体涉及一种EV71病毒核酸质粒，以及该EV71病毒核酸质粒的构建方法，以及该EV71病毒核酸质粒用于制备抑制实体瘤药物的用途。
技术介绍
目前，大多数癌症治疗采用传统的手术、放疗、化疗方法，传统的癌症治疗技术存在副作用大的缺点，严重影响了癌症患者的生存质量。特别是当患者发展到癌症的中晚期时，传统的治疗技术效果不明显，预后较差，严重的副作用也影响到患者的生存质量。目前治疗癌症采用了免疫节点技术，取得一定的治疗效果。副作用小，在PD-1和PD-L1蛋白高表达的肿瘤患者中有效率可以达到50％，有效改善了患者的生存质量。但是近年来开始发现很多的癌症患者对PD-1单抗药物产生耐药性，特别是用了1年以上的患者。总体而言，癌症疾病是一种进化性复杂性疾病，单一靠一种治疗方法是无法解决的。溶瘤病毒发展多年，可以算是治疗肿瘤的新奇治疗的方法，该方法利用病毒直接凋亡肿瘤细胞的功能以及免疫刺激的作用。但是传统的溶瘤病毒治疗方法存在的一些瓶颈问题，比如免疫屏障、耐药等。由于人体天然的免疫屏本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种EV71病毒核酸质粒，其特征在于：所述EV71病毒核酸质粒包括EV71病毒全长cDNA序列和真核表达质粒序列。/n

【技术特征摘要】
1.一种EV71病毒核酸质粒，其特征在于：所述EV71病毒核酸质粒包括EV71病毒全长cDNA序列和真核表达质粒序列。


2.根据权利要求1所述的EV71病毒核酸质粒，其特征在于：所述EV71病毒是A型、B型或C型EV71病毒中的任意一种。


3.根据权利要求1或2所述的EV71病毒核酸质粒，其特征在于：所述真核表达质粒是pcDNA-3.1、pcDNA-3.1-E、pcDNA3.1/Zeo(+/-)、pcDNA4、pcDNA4/HisMAX、pRc/RSV中的任意一种。


4.根据权利要求1或2所述的EV71病毒核酸质粒，其特征在于：所述真核表达质粒是pcDNA-3.1。


5.根据权利要求1至4所述的EV71病毒核酸质粒的构建方法，所述方法包括以下步骤：提取EV71病毒RNA核酸，将所述EV71病毒RNA反转录为cDNA，然后再将EV71病毒cDNA全长序列利用同源重组的方法连接到真核质粒载体上，从而构建所述EV71病毒核酸质粒。


6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述构建方法的步骤具体如下：
步骤1：提取EV71病毒的RNA；
步骤2：将EV71病毒的R...

【专利技术属性】
技术研发人员：王长兵，田新贵，游爱萍，刘文宽，周志超，李潇，周荣，
申请(专利权)人：广州医科大学附属第一医院，
类型：发明
国别省市：广东;44