一种酶解法制备枳椇子提取物的方法技术

本发明专利技术提供了一种酶解法制备枳椇子提取物的方法。包括枳椇子粉加入去离子水搅拌，加入复合酶，50‑60℃提取，过滤；滤液于60℃经高速离心机过滤，于58‑60℃下，真空浓缩；浓缩液真空烘干，即得溶化性较好的枳椇子提取物。本发明专利技术采用生物酶解技术，能选择性地破坏植物细胞壁，有利于有效成分的溶出，极大地改善了提取物的澄清度，显著提高枳椇子总黄酮的回收率。枳椇子提取物产品可广泛应用于食品、饮料及保健食品，实用性强。本发明专利技术方法操作简单、工艺条件温和，极大地节约成本，易于工业化生产，有较大的应用价值。

A method of enzymatic preparation of Hovenia dulcis extract

【技术实现步骤摘要】
一种酶解法制备枳椇子提取物的方法
本专利技术涉及植物提取
，具体地，涉及一种酶解法制备枳椇子提取物的方法。
技术介绍
枳椇子为鼠李科枳椇属植物北枳椇HoveniadulcisThunnb.枳椇HoveniaacerbaLindl.和毛果枳椇HoveniatrichocarpaChunetTsiang的成熟种子。亦有用带花序轴的果实。植物北枳椇，分布于中国华北、西北、华东、中南、西南及台湾。植物枳椇，分布于华北、华东、中南、西南及陕西、甘肃等地。植物毛果枳椇，分布于浙江、江西、湖北、湖南、广东及贵州。具有解酒毒，止渴除烦，止呕，利大小便之功效。主治醉酒，烦渴，呕吐，二便不利。枳椇子含有大量的黄酮类成分，如槲皮素(quecetin)、杨梅素(myricitin)、双氢槲皮素(dihydroquercetin)、(2R,3R)-二氢杨梅素[(2R,3R)-dihydromyricitin]、(-)-没食子儿茶素[(-)-gallocatechin]、斯皮诺素(spinosin)、异牡荆素2″-O-β-D-葡萄糖苷(isovitexin2″-O-β-D-glucopyranoside)等，研究表明，黄酮类物质可作用于肝代谢酶系，加速乙醇及其代谢产物的消除速率，减轻其对组织的细胞损害，还能抑制酒精的胃肠吸收，加强乙醇在胃肠道的首过效应，降低血中的乙醇浓度从而起到解酒醒酒的功效。由于黄酮类物质在纯水中溶解性较差，而易溶于乙醇、甲醇或者氢氧化钠溶液，因此现有技术中对枳椇子的提取主要采用乙醇提取法或酸碱提取法。但是这些方法在提取黄酮类物质的同时，也将大量其他水不溶性成分溶出，如皂苷、油脂等。另外，得到的枳椇子提取物的水溶解性较差，水溶液浑浊，很难直接应用到饮料行业；并且操作步骤繁琐、成本较高。CN200810226063.3公开了一种枳椇子提取物及其制备方法与在制备抗肿瘤药物中的应用。该方法是用水和/或有机溶剂作为提取剂，从枳椇子中提取得到。所用有机溶剂为甲醇、乙醇、石油醚、氯仿、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇、苯或甲苯。回流提取时的温度为60-100℃；提取次数至少为1次，每次提取时间为1-4小时。而该方法使用了大量的有机溶剂，成本高，工艺复杂，得到的枳椇子提取物的水溶解性较差，水溶液浑浊，很难直接应用到食品饮料行业。CN201310617256.2公开了一种半仿生提取技术制备枳椇子提取物的方法，其制备方法为：一、净制枳椇子药材；二、称量药材及提取溶剂、酸碱；三、粉碎药材；四：配制提取溶液；五、采用半仿生技术提取枳椇子；六、浓缩药液；七、烘干提取流浸膏；八、气流粉碎干浸膏，过120目筛；九、混匀干浸膏粉，即得。该专利技术使用了酸碱，环境不友好，成本较高，无法直接应用于食品饮料行业。而且，大部分药用植物的有效成分都是包裹在细胞壁内，植物细胞壁是由纤维素、半纤维素、果胶质、木脂素等物质构成的致密结构。在提取药用植物有效成分过程中，有效成分向提取介质扩散时，必须克服细胞壁及细胞间质的双重阻力。生物酶是由活细胞产生，并可在细胞内或细胞外起催化作用的一类蛋白质，能选择性地破坏植物细胞壁，从而使植物细胞内的成分更容易溶解、扩散。如纤维素酶可以水解纤维素，果胶酶可以水解果胶质。通过酶解反应，温和地分解细胞壁及细胞间质中的纤维素、半纤维素、果胶质等成分，破坏细胞壁的致密结构，引起细胞壁及细胞间质结构产生局部疏松、膨胀、崩解等变化，减小细胞壁及细胞间质等传质屏障对有效成分从胞内向提取介质扩散的传质阻力，从而有利于有效成分的溶出。而木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、葡萄糖苷酶等可以将淀粉、蛋白质、果胶等分解去除，改善提取澄清度。生物酶解技术，具有成分浸出率高、减少热敏成分降解、成本低廉，无需特殊设备就能完成等优势，且有大规模工业化生产的潜力。该技术已经广泛用于多糖、生物碱、黄酮、皂苷、蛋白质、有机酸等中药有效成分的提取中，与传统提取技术相比具有明显的优势。因而，需要进一步改进枳椇子提取物的制备方法，具有重要意义。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题在于克服上述不足之处，研究设计具有高澄清度水溶性的枳椇子提取物制备方法。本专利技术提供了一种酶解法制备枳椇子提取物的方法。该方法包括下列步骤：(1)取枳椇子，打粗粉，过10目-40目筛；优选过10目筛(2)加入药材总重量的10倍量的去离子水于室温搅拌0.5h，加入药材总重量0.01-0.2％的复合酶，各种酶的活力单位在4000-300000U/g之间，升温至50-60℃，提取5h；(3)200目滤袋过滤；(4)将所述步骤(3)得到的滤液于60℃经高速离心机过滤，离心速率为8000r/min；(5)离心液于58-60℃下，保持真空度为-0.09-0.095Mpa，浓缩成含固率20-30％的浓缩液，取出。(6)浓缩液在58-60℃下，保持真空度为-0.09-0.095Mpa，真空烘干(温度保持在58-60℃)，得到黄色块状固体，取出，粉碎、过80目筛，即得溶化性较好的枳椇子提取物。本专利技术方法，步骤(2)所述复合酶选自纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶或葡萄糖苷酶的组合；优选纤维素酶和木瓜蛋白酶、果胶酶和菠萝蛋白酶或半纤维素酶和葡萄糖苷酶的组合。所述步骤(2)复合酶中，各种酶的活力单位在4000-300000U/g之间；优选在7000-100000U/g之间。所述步骤(2)提取温度为50-60℃。所述步骤(2)提取时间为5h。所述步骤(4)高速离心机可以选用管式离心机、碟式离心机、卧式离心机等，离心速率7000-12000r/min；所述步骤(5)浓缩温度为58-60℃；所述步骤(5)浓缩真空度为-0.09-0.095Mpa；所述步骤(5)固体粉碎后粉末过80目筛网；本文中，所述室温是指16℃～25℃。本文中，所述倍量是指液料之比为V/W。本专利技术方法得到的枳椇子提取物产品的技术指标如下表：(1)本专利技术采用了生物酶解技术，能选择性地破坏植物细胞壁，从而使植物细胞内的成分更容易溶解、扩散，有利于有效成分的溶出，可以显著提高枳椇子总黄酮的回收率。(2)本专利技术采取的生物酶可以将淀粉、蛋白质、果胶等分解去除，极大地改善了提取物的澄清度。(3)本专利技术方法操作简单、可行，工艺条件温和，不会破坏产品有效成分，不仅能极大地节约成本，易于工业化生产，有较大的应用价值。(4)采用本专利技术方法可以获得澄清度和水溶解性非常好的枳椇子提取物产品，可以广泛应用于食品、饮料及保健食品行业，实用性更好。附图说明图1实施例6提取溶剂用量对提取得率的影响纵坐标提取得率横坐标溶剂用量溶剂去离子水图2实施例6提取温度对提取得率的影响纵坐标提取得率横坐标温度溶剂去离子水图3实施例5提取时间对提取得率的影响纵坐标提取得率横坐标提取时间溶剂去本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种酶解法制备枳椇子提取物的方法，其特征在于，该方法包括下列步骤：/n(1)取枳椇子，打粗粉，过10目-40目筛；/n(2)加入药材总重量的10倍量的去离子水于室温搅拌0.5h，加入药材总重量0.01-0.2％的复合酶，各种酶的活力单位在4000-300000U/g之间，升温至50-60℃，提取5h；/n(3)200目滤袋过滤；/n(4)将所述步骤(3)得到的滤液于60℃经高速离心机过滤，离心速率为8000r/min；/n(5)离心液于58-60℃下，保持真空度为-0.09-0.095Mpa，浓缩成含固率20-30％的浓缩液，取出。/n(6)浓缩液在58-60℃下，保持真空度为-0.09-0.095Mpa，真空烘干，温度保持在58-60℃，得到黄色块状固体，取出，粉碎、过80目筛，即得溶化性较好的枳椇子提取物。/n

【技术特征摘要】
1.一种酶解法制备枳椇子提取物的方法，其特征在于，该方法包括下列步骤：
(1)取枳椇子，打粗粉，过10目-40目筛；
(2)加入药材总重量的10倍量的去离子水于室温搅拌0.5h，加入药材总重量0.01-0.2％的复合酶，各种酶的活力单位在4000-300000U/g之间，升温至50-60℃，提取5h；
(3)200目滤袋过滤；
(4)将所述步骤(3)得到的滤液于60℃经高速离心机过滤，离心速率为8000r/min；
(5)离心液于58-60℃下，保持真空度为-0.09-0.095Mpa，浓缩成含固率20-30％的浓缩液，取出。
(6)浓缩液在58-60℃下，保持真空度为-0.09-0.095Mpa，真空烘干，温度保持在58-60℃，得到黄色块状固体，取出，粉碎、过80目筛，即得溶化性较好的枳椇子提取物。


2.根据权利要求1所述一种酶解法制备枳椇子提取物的方法，其特征在于，步骤(1)所述取枳椇子，打粗粉过10目筛。


3.根据权利要求1所述一种酶解法制备枳椇子提取物的方法，其特征在于，步骤(2)所述复合酶选自纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶或葡萄糖苷酶的组合。...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐晓宏，汤健俭，
申请(专利权)人：上海诺德生物实业有限公司，
类型：发明
国别省市：上海;31