【技术实现步骤摘要】
一种细胞组分自动提取方法
本专利技术涉及生物
，具体涉及一种可自动分离动植物细胞中蛋白和亚细胞结构的装置和方法，适用于多样品批处理。
技术介绍
在后基因组时代，开展功能组学的研究是生命科学研究的主要内容，蛋白质是生命活动的主要执行者，因此是研究的重点。通过分析不同生理/病理条件下，组织、细胞或亚细胞结构中蛋白质的异同，以揭示复杂的生命现象，为疾病诊治寻找靶点。由于一个细胞内蛋白质种类繁多（超过10万种），不同蛋白的动态分布范围极广（从102到109个分子），且性质各异，这些因素为蛋白质的分离分析带来困难。采取一些预分离手段使蛋白与非蛋白的生物大分子分离，减少样品复杂性，是对特异蛋白质进行分析研究的基本方法。随着生命科学研究的深入和精细化，已进入对亚细胞结构特异性分布的蛋白质进行研究的阶段，因此分离出亚细胞特异分布的蛋白是亚细胞蛋白质组学研究的前提。传统分离细胞蛋白的方法是采用RIPA裂解液（主要成分为50mMTris(pH7.4)，150mMNaCl，1%TritonX-100，1%脱氧胆酸钠，0.1%SDS）...
【技术保护点】
1.一种细胞组分自动提取方法，其特征在于，该方法所用仪器包括细胞组分自动提取装置，所用试剂包括致敏剂、系列细胞蛋白抽提液；/n所述细胞组分自动提取装置包括：移液系统、过滤系统、冷却系统、自动控制系统，所述冷却系统为移液系统和/或过滤系统提供0-4℃低温，其中，自动控制系统分别与移液系统、过滤系统、冷却系统连接；所述过滤系统包括：滤管放置盒（7）、通气供压系统（6）、滤管（9），其中滤管（9）包括滤柱（9-3）、收集管（9-1），滤柱（9-3）包括滤芯（9-2），滤芯（9-2）在压缩气体加压过滤过程中使细胞膜致敏的细胞破碎并将核酸DNA滤除，所得滤液即为不含DNA的其他细胞组...
【技术特征摘要】
1.一种细胞组分自动提取方法，其特征在于，该方法所用仪器包括细胞组分自动提取装置，所用试剂包括致敏剂、系列细胞蛋白抽提液；
所述细胞组分自动提取装置包括：移液系统、过滤系统、冷却系统、自动控制系统，所述冷却系统为移液系统和/或过滤系统提供0-4℃低温，其中，自动控制系统分别与移液系统、过滤系统、冷却系统连接；所述过滤系统包括：滤管放置盒（7）、通气供压系统（6）、滤管（9），其中滤管（9）包括滤柱（9-3）、收集管（9-1），滤柱（9-3）包括滤芯（9-2），滤芯（9-2）在压缩气体加压过滤过程中使细胞膜致敏的细胞破碎并将核酸DNA滤除，所得滤液即为不含DNA的其他细胞组分；所述移液系统包括：移液器吸头放置盒（1）、加样槽（8）、移液器（2）、吸头；所述移液器（2）为排式移液器，与加样槽平行排列，所述加样槽为成排连通的尖底圆孔组，其数量和位置与移液器吸头放置盒孔对应；所述通气供压系统（6）包括围栏（6-1）、压缩气瓶（6-4）、通气管道（6-5）、喷气嘴（6-7）；压缩气瓶通过通气管道与喷气嘴相接，压缩气瓶与通气管道之间设有总阀门（6-6），通气管道与喷气嘴之间通过螺纹连接，通气管道与喷气嘴之间设有分阀门（6-3），喷气嘴（6-7）与滤管接触处设有橡胶垫圈（6-2）；
所述致敏剂包括聚乙二醇辛基苯基醚、乙基苯基聚乙二醇、缓冲盐溶液；
所述系列细胞组分抽提液包括：聚乙二醇辛基苯基醚、乙基苯基聚乙二醇、聚氧乙烯山梨醇酐单月桂酸酯、3-[3-(胆酰胺丙基)二甲氨基]丙磺酸内盐，以及缓冲盐溶液；
该方法包括如下步骤：
（1）将吸头放入移液器吸头放置盒中，将预定数量的滤管放入滤管放置盒，最后将一定量的细胞样本和致敏剂混合后加入加样槽孵育；
（2）启动自动提取程序，在孵育5-10min后，移液器移动到移液器吸头放置盒上方，下移插取吸头；移液器移动到加样槽上方，下移吸取样本混合液；移液器移动到滤管放置盒上方，下移将样品加到滤管中；移液器回移归位；
（3）通气供压系统下移，喷气嘴插入滤管，滤管上沿与橡胶垫圈压紧密封，喷气嘴喷出加压气体，使致敏剂处理过的细胞悬液迅速通过滤芯，细胞在剪切力和惯性冲击作用下破碎，通气供压系统上移回原位；取...
【专利技术属性】
技术研发人员：张兵兵，李樑，杨云澜，周雪毅，
申请(专利权)人：重庆大学，
类型：发明
国别省市：重庆;50
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