一种兽用水溶性壳聚糖脂质体佐剂的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种兽用水溶性壳聚糖脂质体佐剂的制备方法，本发明专利技术的佐剂包括磷脂、胆固醇、蜂胶、壳聚糖盐酸盐、戊二醛，通过本发明专利技术制备得到的兽用水溶性壳聚糖脂质体佐剂粒径小，均一性好，具有较好的热稳定性和良好的细胞相容性，贮存稳定性高，久置不分层，极大消除了佐剂中有机溶剂残留的风险，可以延长高水平抗体在体内的维持时间。

【技术实现步骤摘要】
一种兽用水溶性壳聚糖脂质体佐剂的制备方法
本专利技术属于兽用疫苗佐剂
，尤其涉及一种兽用水溶性壳聚糖脂质体佐剂的制备方法。
技术介绍
免疫佐剂可辅佐免疫原刺激机体产生较早、较强、持久的免疫应答，佐剂大致可分为两类，第一类是抗原载体，例如乳剂类和脂质体等，能够以更有效的方式提呈抗原进入免疫系统，第二类为免疫刺激剂，如Toll样受体（TLR）、氢氧化铝、皂苷和细胞因子等。随着生物技术的发展，一些新型佐剂随着时代的需要逐步出现，其中壳聚糖及其衍生物由于具有良好的可生物降解性、低毒性、免疫刺激活性、缓释作用及靶向性，已成为了构建疫苗免疫佐剂的优良载体。铝盐作为经典的传统佐剂应用于临床已经有80多年，也是至今唯一被FDA批准可用于人类疫苗的佐剂，它能有效的诱导体液免疫应答，但对细胞免疫不起作用。油乳佐剂分为水包油、油包水乳剂和水包油包水双相乳剂，其中最著名的属弗氏佐剂（Freund’sadjuvant，FA），但该佐剂易引起注射部位的炎症或肉芽肿等不良反应。传统佐剂的局限性使得纳米佐剂等一系列新型佐剂得到飞速发展，而脂质体作为一种纳米传送体本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种兽用水溶性壳聚糖脂质体佐剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：/n（1）将磷脂和胆固醇均溶解在三氯甲烷中混合后得到混合溶液A；/n（2）按照蜂胶：95％的乙醇=1kg：（15-25）L的比例，将蜂胶溶于95％的乙醇中配制成蜂胶乙醇溶液；/n（3）步骤（1）中得到的混合溶液A与步骤（2）中得到的蜂胶乙醇溶液按照体积比1：（1-3）进行均匀混合，得到混合溶液B；/n（4）将步骤（3）中得到的混合溶液B转移至旋转蒸发仪中，进行真空旋转蒸发除去有机溶剂，旋转蒸发仪烧瓶内壁形成脂质膜；/n（5）用去离子水洗下步骤（4）中旋转蒸发仪烧瓶内壁的脂质膜，混匀溶液后得到混合溶液C；/n（6）使步骤（5...

【技术特征摘要】
1.一种兽用水溶性壳聚糖脂质体佐剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
（1）将磷脂和胆固醇均溶解在三氯甲烷中混合后得到混合溶液A；
（2）按照蜂胶：95％的乙醇=1kg：（15-25）L的比例，将蜂胶溶于95％的乙醇中配制成蜂胶乙醇溶液；
（3）步骤（1）中得到的混合溶液A与步骤（2）中得到的蜂胶乙醇溶液按照体积比1：（1-3）进行均匀混合，得到混合溶液B；
（4）将步骤（3）中得到的混合溶液B转移至旋转蒸发仪中，进行真空旋转蒸发除去有机溶剂，旋转蒸发仪烧瓶内壁形成脂质膜；
（5）用去离子水洗下步骤（4）中旋转蒸发仪烧瓶内壁的脂质膜，混匀溶液后得到混合溶液C；
（6）使步骤（5）中得到的混合溶液C在40-60℃温度下、在功率150-250W的超声处理下、在压力为12-16Mpa的二氧化碳气氛下孵化0.5-1.5h，得到蜂胶脂质体溶液；
（7）将壳聚糖盐酸盐用去离子水溶解后制得壳聚糖盐酸盐溶液，壳聚糖盐酸盐溶液与步骤（6）中制得的蜂胶脂质体溶液按照等体积比例进行均匀混合，在（500-700）r/min的条件下结合0.5-1.5h；
（8）微球制备处理；以重量份计，取步骤（7）...

【专利技术属性】
技术研发人员：王春维，王雪辉，祝爱侠，夏廉臣，陶冶，万蒙，陈懿琳，
申请(专利权)人：武汉轻工大学，
类型：发明
国别省市：湖北;42