一种牛坏死杆菌的亚单位疫苗及其制备方法技术

本发明专利技术涉及一种牛坏死杆菌的亚单位疫苗，包含牛坏死杆菌一种外膜蛋白43kDa OMP、坏死杆菌白细胞毒素截短蛋白PL‑4及坏死杆菌溶血素截短蛋白H2三种蛋白，三种蛋白的用量比为1：1：1。本发明专利技术还涉及上述牛坏死杆菌的亚单位疫苗的制备方法。本发明专利技术的牛坏死杆菌的亚单位疫苗包含牛坏死杆菌一种外膜蛋白43kDa OMP、坏死杆菌白细胞毒素截短蛋白PL‑4及坏死杆菌溶血素截短蛋白H2三种蛋白，联合应用，免疫后产生的特异性抗体水平高，可很好的激起小鼠的细胞免疫及体液免疫，有效保护小鼠抵抗坏死杆菌的攻击，免疫保护效果较好，保护效果与全菌灭活疫苗相当。

A subunit vaccine of necrobacter bovis and its preparation

【技术实现步骤摘要】
一种牛坏死杆菌的亚单位疫苗及其制备方法
本专利技术属于分子生物学和基因工程领域，涉及一种牛坏死杆菌的亚单位疫苗及其制备方法。
技术介绍
坏死杆菌(Fusobacteriumnecrophorum)又称为犊白喉杆菌，坏死棒状杆菌及坏死放线菌，为革兰氏阴性的严格厌氧细菌，具有多形性特性，形状多为杆状，但不具有荚膜和芽孢，没有运动性。菌宽约0.5μm，长约100μm，少数300μm，在一些培养物中还可见到较一般形态粗两倍的杆状菌体，在病变组织和肉汤中以丝状较多。坏死杆菌广泛分布在自然界，它即是人和动物口腔、呼吸道、胃肠道内寄生的正常菌群，也是各种化脓性和坏死性疾病的原发性或继发性病原，一种人畜共患病病原，主要引起动物的肝脓肿、腐蹄病、猪皮肤溃疡、坏死性喉炎以及人的Lemierre's综合症等疾病。在坏死杆菌引起的疾病中，以奶牛腐蹄病和牛肝脓肿最为常见。腐蹄病特点是发病率高、死亡率低，最大的危害是导致感染动物生产性能下降乃至淘汰。牛腐蹄病是Adams等人在1960年首次发现的，它可以引起反刍动物蹄部组织化脓等症状，具有较强的传染性。目前在我国该病的发病本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种牛坏死杆菌的亚单位疫苗，其特征在于：包含牛坏死杆菌外膜蛋白43kDa OMP、坏死杆菌白细胞毒素截短蛋白PL-4及坏死杆菌溶血素截短蛋白H2三种蛋白，三种蛋白的用量比为1：1：1。/n

【技术特征摘要】
1.一种牛坏死杆菌的亚单位疫苗，其特征在于：包含牛坏死杆菌外膜蛋白43kDaOMP、坏死杆菌白细胞毒素截短蛋白PL-4及坏死杆菌溶血素截短蛋白H2三种蛋白，三种蛋白的用量比为1：1：1。


2.根据权利要求1所述的牛坏死杆菌的亚单位疫苗，其特征在于：所述的外膜蛋白43kDaOMP的氨基酸序列如SEQIDNo.1所示，坏死杆菌白细胞毒素截短蛋白PL-4的氨基酸序列如SEQIDNo.2所示，坏死杆菌溶血素截短蛋白H2的氨基酸序列如SEQIDNo.3所示。


3.根据权利要求2所述的牛坏死杆菌的亚单位疫苗，其特征在于：编码外膜蛋白43kDaOMP的核苷酸序列如SEQIDNo.4所示，编码坏死杆菌白细胞毒素截短蛋白PL-4的核苷酸序列如SEQIDNo.5所示，编码坏死杆菌溶血素截短蛋白H2的核苷酸序列如SEQIDNo.6所示。


4.一种根据权利要求1所述的牛坏死杆菌的亚单位疫苗的制备方法，其特征在于：该方法包含以下步骤：
(1)43kDaOMP、PL-4、H2基因片段的获得；
(2)构...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭东华，孙东波，李春秋，原东伟，蒋剑成，贺显晶，张思瑶，王志慧，吕思文，高晶，姚爽，肖佳薇，汪锋锋，王丽娜，
申请(专利权)人：黑龙江八一农垦大学，
类型：发明
国别省市：黑龙;23