重组人源III型胶原蛋白α1链及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种重组人源III型胶原蛋白α1链及其应用，编码该所述重组人源III型胶原蛋白α1链的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，所述重组人源III型胶原蛋白α1链从氨基端依次包含：氨基端亲和纯化标签、人源III型胶原成熟肽链以及羧基端亲和纯化标签。根据本发明专利技术实施例的重组人源III型胶原蛋白，通过在人源III型胶原成熟肽链的两端都设计有特异性亲和纯化标签，有利于全长蛋白的纯化，也可用于胶原蛋白的鉴定，并且根据本发明专利技术实施例的所述重组人源III型胶原蛋白采用的是III型胶原蛋白的成熟肽链，去除了两端的前肽，表达量远高于包含前肽的基因。

Recombinant human type III collagen \u03b1 1 chain and its application

【技术实现步骤摘要】
重组人源III型胶原蛋白α1链及其应用
本专利技术涉及基因工程
，更具体地，本专利技术涉及一种重组人源III型胶原蛋白α1链及其应用。
技术介绍
胶原是包括皮肤、骨骼、肌腱和软骨在内的所有结缔组织中的主要蛋白质。例如，它在皮肤中形成大的纤维束，每个纤维束又包含许多单个的胶原原纤维，使得皮肤结构强壮且灵活。成熟的三螺旋的胶原蛋白在人体中含量非常丰富，对一系列工业和医学应用非常有价值。胶原蛋白已被广泛应用于临床应用领域，其在包括软性组织扩张、创口和烧伤的修复、骨科和心血管等方面被证明安全有效。人类III型胶原蛋白(hCOL3A1)属于形成纤维的胶原蛋白，广泛分布于皮肤，内脏器官或血管系统等可伸展的结缔组织中。它在人体伤口愈合，胶原纤维形成和心血管正常发育中起着关键作用。胶原蛋白的获得主要有两种种途径，包括来源于动物组织的传统方法和异源蛋白表达。传统方法主要通过酸、碱或酶解法来处理动物来源的组织，这些方法获得的均为长度不等的混合胶原肽段，给纯化带来不便；由于异源胶原蛋白在临床上表现出的排异反应，限制了其作为生物医学材料和药物载体本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种重组人源III型胶原蛋白α1链，其特征在于，编码该所述重组人源III型胶原蛋白α1链的核苷酸序列如SEQ ID N0：1所示，所述重组人源III型胶原蛋白α1链从氨基端依次包含：氨基端亲和纯化标签、人源III型胶原成熟肽链以及羧基端亲和纯化标签。/n

【技术特征摘要】
20190129 CN 201910088754X1.一种重组人源III型胶原蛋白α1链，其特征在于，编码该所述重组人源III型胶原蛋白α1链的核苷酸序列如SEQIDN0：1所示，所述重组人源III型胶原蛋白α1链从氨基端依次包含：氨基端亲和纯化标签、人源III型胶原成熟肽链以及羧基端亲和纯化标签。


2.根据权利要求1所述的重组人源III型胶原蛋白α1链，其特征在于，所述氨基端亲和纯化标签为6His标签，所述羧基端亲和纯化标签为Strep标签。


3.根据权利要求1所述的重组人源III型胶原蛋白α1链，其特征在于，所述人源III型胶原成熟肽链包括人III型胶原N端肽、人III型胶原成螺旋区、人III型胶原C端肽，所述人源III型胶原成熟肽链的核苷酸序列如SEQIDNO：2所示。


4.根据权利要求3所述的重组人源III型胶原蛋白α1链，其特征在于，所述人源III型胶原成熟肽链的核苷酸序列由天然胶原基因序列将其密码子按照宿主密码子的使用频率进行调整得到。


5.根据权利要求4所述的重组人源III型胶原蛋白α1链，其特征在于，所述宿主为毕赤酵母，所述调整为将所述天然胶原基因序列中毕赤酵母中的罕见密码子优化为其偏好密码子。


6.根据权利要求3所述的重组人源III型胶原蛋白α1链，其特征在于，所述人源III型胶原成熟肽链的核苷酸序列的扩增引物F(SEQIDNO：3)和R(SEQIDN0：4)如下所示：
F：CGGAATTCCATCATCATCATCATCATCAATACGACTCTTATGACGTGA，酶切位点为EcoRI；
R：CGGAATTCTTACTTCTCGAATTGTGGGTGAGACCATCCATAATATGGTGCGAATCCAC，酶切位点EcoRI。


7.根据权利要求6所述的重组人源III型胶原蛋白α1链，其特征在于，所述扩增引物的N端增加能够表达6His的核苷酸序列，C端增加能够表达Strep的核苷酸序列后进行扩增。


8.一种重组人源III型胶原蛋白α1链的应用，其特征在于，所述重组人源III型胶原蛋白应用于医用敷料，所述医用敷料各组分的质量分数为：...

【专利技术属性】
技术研发人员：钱松，王丽萍，
申请(专利权)人：江苏悦智生物医药有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32