一种SOD复合酶的制备方法技术

本发明专利技术提供一种SOD复合酶的制备方法，其首先净选刺梨干果和枸杞干果、清洗，然后将刺梨干果和枸杞干果分别粉碎至10～25目，筛选去除刺梨籽，得到刺梨粉碎物和枸杞粉碎物，接着以水为溶剂在45～65℃进行浸提，超滤、添加海藻糖、真空浓缩得到浓缩液，最后对浓缩液进行冻干升华除水制得粉末状的SOD复合酶。本发明专利技术以水为溶剂浸提SOD复合酶，在浸提过程中水其它活性物质不会发生化学反应生成新的衍生物，从而避免了衍生物抑制SOD酶活性的问题，确保了所提取SOD的活性；同时，在浸提温度45～65℃的范围下，各种浸提物之间不会发生化合反应，即不会有新的衍生物生成，进而不但确保了所提取SOD复合酶的纯度，而且进一步的确保了所提取SOD复合酶的活性。

A preparation method of SOD complex enzyme

【技术实现步骤摘要】
一种SOD复合酶的制备方法
本专利技术涉及保健食品
，具体涉及一种SOD复合酶的制备方法。
技术介绍
科学研究发现，有八十多种疾病的产生与自由基直接相关，有两百多种疾病的产生与自由基相关。人在25～40岁时，自由基攻击胶原系统，造成皮肤松弛、老化；人在35～50岁时，自由基攻击内分泌系统，造成性功能减退；人在50岁以上时，自由基攻击攻击心血管系统，造成各种心脑血管疾病。经过大量的医学研究证明，SOD是一种重要的人体超氧阴离子自由基的清除剂。然而，随着年龄递增至衰老期后，机体各个脏器中SOD活性下降；老年人基体生成自由基增加，SOD破坏或消耗严重；基体内的SOD生物学特性发生变化，无活性SOD增加，导致SOD功能衰减；衰老的红细胞非酶性糖基化作用增强，导致SOD活性下降。因此，为预防疾病的发生，从机体外向基体内补充SOD是行之有效的手段。目前，SOD来源是从动物血液、胰脏和植物中提取，从动物血液、胰脏中提取的SOD为单一性的Cu/Zn-SOD,其综合抗氧化性差，且所提取的Cu/Zn-SOD会因动物各种疾病的影响而存较差感染的因素；从植物中提取SOD，虽然所提取SOD为包含Cu/Zn-SOD、Mn-SOD、Fe-SOD三类金属辅基的复合酶，但从植物中提取SOD,一般在适当的缓冲液中进行，多数抽提是以缓冲液（盐液）为基础液进行提取，并在提取液总加入硫酸铵，其沉淀用磷酸缓冲液溶解后，梯度洗脱，动态透析去除无机盐，浓缩后干燥既得SOD纯品。该从植物提取SOD的过程中使用了有机溶剂（硫酸铵、磷酸），由于有机溶剂在SOD提取过程中会与其它活性发生化学反应，生成新的衍生物，新的衍生物会抑制SOD的活性，进而影响了SOD的抗氧化功能。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种SOD复合酶的制备方法，旨在解决现有技术中SOD复合酶在制备过程中使用有机溶剂而导致SOD活性低的问题。为实现上述目的，本专利技术一种SOD复合酶的制备方法采用的技术方案是，所述SOD复合酶的制备方法包括以下步骤：（1）净选刺梨干果和枸杞干果、清洗；（2）将清洗后的刺梨干果和枸杞干果分别粉碎至10～25目，筛选去取刺梨籽，得到刺梨粉碎物和枸杞粉碎物，备用；（3）取刺梨粉碎物和枸杞粉碎物，混合均匀，放入浸提容器内进行浸提，浸提溶剂为水，每100kg物料加入8～10倍的水，浸提温度为45～65℃，浸提时间为12～16h，得到含有可溶性固形物的浸提液；（4）将浸提液静置冷却温度至25～32℃时进行超滤，截留分子量1000道尔顿，截留液待用，通过液废弃；（5）将截留液升温至50～60℃，每100L的截留液体中加入1.6～2.8kg的海藻糖进行搅拌均匀10～30min，得到含有海藻糖的截留液；（6）将含有海藻糖的截留液在50～60℃进行真空浓缩，浓缩至固形物含量46%，得到浓缩液；（7）将浓缩液灌装并送入冷冻干燥机内进行冻干，冻干温度为-35～-31℃，冻干时间19～24h，然后进行升华除水，升华的温度为0～25℃，升华时的真空度为60～100Pa，得到粉末状的SOD复合酶。优选的，所述步骤（2）中将将清洗后的刺梨干果和枸杞干果分别粉碎至18目。优选的，所述步骤（3）中的浸提温度为58℃。优选的，所述步骤（7）中的冻干温度为-26～-24℃。优选的，所述步骤（1）中的刺梨干果为野生刺梨干果，枸杞干果为野生枸杞干果。本专利技术的有益效果：本专利技术以刺梨干果和枸杞干果为原料，对原料粉碎后以水为溶剂并控制温度在45～65℃下进行SOD浸提，水溶剂取代了有机溶剂，避免了在浸提过程中有机溶剂与其它活性物质发生化学反应生成新衍生物而抑制SOD活性的问题，从而确保了所提取SOD的抗氧化功能；同时，在浸提过程中，温度控制45～65℃，经实验证明，在该温度范围下，各种浸提物之间不会发生化合反应，不会有新的衍生物生成，进而不但确保了所提取SOD的纯度，而且进一步的确保了提取SOD的抗氧化功能。本专利技术以刺梨干果和枸杞干果为原料制备出的酶为包括Cu/Zn-SOD、Mn-SOD、Fe-SOD三类金属辅基的SOD复合酶，其不但包含了可清除人体超氧阴离子自由基的酶，而且包括了可清除人体非氧自由基的非酶类自由基的酶。通过本专利技术制备出的SOD复合酶，其综合抗氧化性好，具有全方位、无死角的清除细胞内、外的自由基，抗疾病、抗辐射、抗衰老、增加免疫力等方面的效果好。具体实施方式下面结合实施例对本专利技术做一步的说明。实施例1本实施例的SOD复合酶的制备方法，包括以下步骤：（1）净选野生刺梨干果和野生枸杞干果、清洗；（2）将清洗后的刺梨干果和枸杞干果分别粉碎至18目，筛选去取刺梨籽，得到刺梨粉碎物和枸杞粉碎物，备用；（3）取刺梨粉碎物和枸杞粉碎物，混合均匀，放入浸提容器内进行浸提，浸提溶剂为水，每100kg物料加入8倍的水，浸提温度为58℃；浸提时间为14h，得到pH值为4.2的浸提液，浸提液中含有SOD、维生素A、维生素C、胡萝卜素、人体必须的氨基酸、类黄酮等可溶性固形物；（4）将浸提液静置冷却温度至25℃时进行超滤，截留分子量1000道尔顿，截留液待用，通过液废弃，该步骤的目的是过滤掉浸提液中的小分子物质（维生素A、维生素C、胡萝卜素、人体必须的氨基酸、类黄酮等可溶性物物质），以提高SOD的纯度和避免小分子物质之间发生化学反应生成衍生物而抑制SOD活性的问题；（5）将截留液升温至55℃，每100L的截留液体中加入2kg的海藻糖进行搅拌均匀20min，得到含有海藻糖的截留液，海藻糖是一种保护剂，其作用是保护SOD的活性；（6）将含有海藻糖的截留液在55℃进行真空浓缩，浓缩至固形物含量46%，得到浓缩液；（7）将浓缩液灌装并送入冷冻干燥机内进行冻干，冻干温度为-35℃，冻干时间19h，然后进行升华除水，升华的温度为25℃，升华时的真空度为60Pa，得到粉末状的SOD复合酶。实施例2本实施例的SOD复合酶的制备方法，包括以下步骤：（1）净选野生刺梨干果和野生枸杞干果、清洗；（2）将清洗后的刺梨干果和枸杞干果分别粉碎至10目，筛选去取刺梨籽，得到刺梨粉碎物和枸杞粉碎物，备用；（3）取刺梨粉碎物和枸杞粉碎物，混合均匀，放入浸提容器内进行浸提，浸提溶剂为水，每100kg物料加入10倍的水，浸提温度为65℃；浸提时间为12h，得到pH值为4.5的浸提液，浸提液中含有SOD、维生素A、维生素C、胡萝卜素、人体必须的氨基酸、类黄酮等可溶性固形物；（4）将浸提液静置冷却温度至28℃时进行超滤，截留分子量1000道尔顿，截留液待用，通过液废弃，该步骤的目的是过滤掉浸提液中的小分子物质（维生素A、维生素C、胡萝卜素、人体必须的氨基酸、类黄酮等可溶性物物质），以提高SOD的纯度和避免小分子物质之间发生化学反应生成衍生物而抑制SOD活性的问题；（5）将截留液升温至6本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种SOD复合酶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：/n（1）净选刺梨干果和枸杞干果、清洗；/n（2）将清洗后的刺梨干果和枸杞干果分别粉碎至10～25目，筛选去取刺梨籽，得到刺梨粉碎物和枸杞粉碎物，备用；/n（3）取刺梨粉碎物和枸杞粉碎物，混合均匀，放入浸提容器内进行浸提，浸提溶剂为水，每100kg物料加入8～10倍的水，浸提温度为45～65℃，浸提时间为12～16h，得到含有可溶性固形物的浸提液；/n（4）将浸提液静置冷却温度至25～32℃时进行超滤，截留分子量1000道尔顿，截留液待用，通过液废弃；/n（5）将截留液升温至50～60℃，每100L的截留液体中加入1.6～2.8kg的海藻糖进行搅拌均匀10～30min，得到含有海藻糖的截留液；/n（6）将含有海藻糖的截留液在50～60℃进行真空浓缩，浓缩至固形物含量46%，得到浓缩液；/n（7）将浓缩液灌装并送入冷冻干燥机内进行冻干，冻干温度为-35～-31℃，冻干时间19～24h，然后进行升华除水，升华的温度为0～25℃，升华时的真空度为60～100Pa，得到粉末状的SOD复合酶。/n

【技术特征摘要】
1.一种SOD复合酶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）净选刺梨干果和枸杞干果、清洗；
（2）将清洗后的刺梨干果和枸杞干果分别粉碎至10～25目，筛选去取刺梨籽，得到刺梨粉碎物和枸杞粉碎物，备用；
（3）取刺梨粉碎物和枸杞粉碎物，混合均匀，放入浸提容器内进行浸提，浸提溶剂为水，每100kg物料加入8～10倍的水，浸提温度为45～65℃，浸提时间为12～16h，得到含有可溶性固形物的浸提液；
（4）将浸提液静置冷却温度至25～32℃时进行超滤，截留分子量1000道尔顿，截留液待用，通过液废弃；
（5）将截留液升温至50～60℃，每100L的截留液体中加入1.6～2.8kg的海藻糖进行搅拌均匀10～30min，得到含有海藻糖的截留液；
（6）将含有海藻糖的截留液在50～60℃进行真空浓缩，浓缩至固形物含量46%，得到浓...

【专利技术属性】
技术研发人员：王珩，
申请(专利权)人：郑州奇化酶生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：河南;41