The invention provides a method for improving the expression of NR0B2 gene in differentiated cells, belonging to the technical field of regeneration cell differentiation and preparation. In the invention, the liver cells generated by differentiation of pluripotent stem cells are screened for lipid metabolism related small molecule library, and the small molecule int \u2011 747 which can improve NR0B2 gene expression in the differentiated cells is identified. The small molecule is applied to the liver cells, so as to induce the liver cells which can highly express NR0B2 gene. These liver cells have high NR0B2 gene expression. In view of the central role of NR0B2 in liver lipid / glucose metabolism, differentiated cells with high NR0B2 gene expression can be used to study the lipid / glucose metabolism mechanism of liver and screen drugs regulating lipid / glucose metabolism.
【技术实现步骤摘要】
一种提高分化细胞中NROB2基因表达量的方法
本专利技术属于再生细胞分化与制备
,具体地说,涉及一种提高分化细胞中NROB2基因表达量的方法。
技术介绍
人多潜能干细胞可以无限扩增并分化产生肝脏细胞。由于其细胞数量是无限的,产生的肝细胞在疾病模型、药物筛选、药物毒性测试、组织工程、细胞治疗和基因治疗等领域有着非常广泛的应用前景。目前从人多潜能干细胞,包括胚胎干细胞和诱导多潜能干细胞分化得到的肝脏细胞,其细胞不成熟,类似于胎肝状态。相应的,分化产生的肝脏细胞的基因表达和成熟的肝脏细胞存在一定的差异(见图1)。在这些差异表达的基因中,一个非常重要的功能基因是细胞核受体基因NR0B2(NuclearReceptorSubfamily0GroupBMember2,也称作smallheterodimerpartner,SHP)。NR0B2的基因表达受NR1H4(NuclearReceptorSubfamily1GroupHMember4,也称作FarnesoidX-ActivatedReceptor,FXR)调控。NR0 ...
【技术保护点】
1.一种提高分化细胞中NR0B2基因表达量的方法,其特征在于,在细胞分化的过程中,在产生内胚层细胞之后的继续分化的一个或多个阶段将Int-747添加入细胞分化体系中。/n
【技术特征摘要】
1.一种提高分化细胞中NR0B2基因表达量的方法,其特征在于,在细胞分化的过程中,在产生内胚层细胞之后的继续分化的一个或多个阶段将Int-747添加入细胞分化体系中。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,在细胞分化的第三或第四阶段将Int-747添加入细胞分化体系中。
3.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述分化细胞为人多潜能干细胞或人胚胎干细胞分化产生细胞。
4.如权利要求3所述的方法,其特征在于,所述分化细胞为人多潜能干细胞或人胚胎干细胞分化产生的肝脏细胞。
5.如权利要求1-4任一所述的方法,其特征在于,Int-747添加入细胞分化体系中的量为1-50μmol/L,优选1-10μmol/L。
...
【专利技术属性】
技术研发人员:孙浩,刘凤林,陈昱安,周云卿,蔡军,
申请(专利权)人:北京协同创新研究院,
类型:发明
国别省市:北京;11
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