评估患者样品中UCH-L1状态的改进方法技术

本文公开了评估受试者的泛素羧基末端水解酶L1(UCH‑L1)状态的改进方法(例如用作创伤性脑损伤的量度或用于其它临床原因)。本文还公开了评估受试者中受试者的胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和UCH‑L1状态的方法(例如用作创伤性脑损伤的量度或用于其它临床原因)。

An improved method for assessing the state of UCH-L1 in patient samples

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】评估患者样品中UCH-L1状态的改进方法对相关申请的交叉引用本申请要求优先于2016年10月3日提交的62/403,293号美国临时申请和2017年2月6日提交的62/455,269号美国临时申请，本申请通过引用完整包含了这些申请。通过引用包含以电子方式提交的材料本快速申请包含一个已通过EFS-Web以ASCII格式提交的序列表，本申请通过引用完整包含该序列表。2017年10月2日创建的所述ASCII副本的文件名为2017_10_02_12994W001-SEQ-LIST.txt，大小为6,284个字节。
本公开涉及泛素羧基末端水解酶L1(UCH-L1)状态的改进评估方法，例如，用作创伤性脑损伤或其他临床原因的一种量度。本公开涉及受试者的胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和UCH-L1状态的评估方法，例如，用作创伤性脑损伤或其他临床原因的一种量度。
技术介绍
在很多情形下都会观察到创伤性脑、脊髓及其他神经损伤。例如，军事领域护理人员报告说，在经受颠簸和高振动地面及空中运输时，脊柱和头部受伤的人员会遭受严重的疼痛。在医疗运输期间患者经历的反复冲击和振动可能会影响医疗结果。脊髓损伤(SCI)、创伤性脑损伤(TBI)和/或其他严重神经损伤的伤员最容易受到车辆反复冲击和振动的伤害。神经元、轴突和星形胶质细胞损伤的流体标记物非常重要，能够帮助诊断患者的脑震荡和评估其是否需要头部创伤成像，预测短期和长期临床结果，判断大脑是否已从TBI恢复。目前的候选生物标志物受限于其在血清检测中的敏感性不足、针对脑的特异性不足以及化验标准化缺乏。缺乏可用于评价从超急性到急性的一系列TBI损伤的现场化验的急性标记。此外，目前还没有办法识别具有脑震荡后持续性脑损伤的轻度TBI(mTBI)，这种脑损伤可导致创伤后应激障碍(PTSD)或慢性神经退行性疾病(慢性创伤性脑病，CTE，“拳击醉态”)。难以客观地检测轻度TBI或脑震荡，而且，在全球的军事领域、急诊室、住院医院、门诊诊所和运动场，这都是急救护理部门的日常难题。脑震荡通常不会引起出血等大体病理，并且在大脑的常规计算机断层扫描上没有异常，但是存在可在几天到几周内自发消退的快速发作神经元功能障碍。大约15％的轻度TBI患者存在持久的认知功能障碍。缺少可用来在现场、急诊室、住院医院和诊所、运动场和军事活动中(例如，战斗)评估轻度TBI患者的工具。
技术实现思路
本公开涉及受试者泛素羧基末端水解酶L1(UCH-L1)状态的一种评估方法。这种方法包括以下步骤：在所述受试者的生物样品中检测至少一种生物标志物，其中至少一种生物标志物是UCH-L1，并且其检测方法(i)可用于测定小于等于25,000pg/mL的UCH-L1水平，(ii)具有5log的动态范围，并且(iii)在动态范围内是线性的。在这种方法中，可以通过免疫测定或单分子检测分析检测UCH-L1。在一些方面，根据所使用的分析形式和仪器，测定的UCH-L1水平可能高于25,000pg/mL。本公开涉及受试者泛素羧基末端水解酶L1(UCH-L1)状态的一种评估方法。这种方法包括以下步骤：a)使所述受试者的生物样品同时或以任意顺序依次与至少一种第一特异性结合成员和至少一种第二特异性结合成员接触，在这里，所述至少一种第一特异性结合成员和至少一种第二特异性结合成员各自特异性地结合UCH-L1，从而产生一种或多种第一复合物，其组成为至少一种第一特异性结合成员-UCH-L1-至少一种第二特异性结合成员；b)检测样品中存在的一种或多种第一复合物中的UCH-L1，其检测方法(i)可用于测定小于等于25,000pg/mL的UCH-L1水平，并且不需要稀释生物样品；(ii)可用于测定小于等于25,000pg/mL的UCH-L1水平，该检测方法具有5log的动态范围，并且在动态范围内是线性的；或(iii)能够在约5pg/mL至约25,000pg/mL的动态范围内定量测定UCH-L1水平，精度小于约10％CV，且在动态范围内的线性偏差(DL)小于约10％。在这种方法中，可以通过免疫测定或单分子检测分析检测UCH-L1。在一些方面，根据所使用的分析形式和仪器，测定的UCH-L1水平可能高于25,000pg/mL。本公开涉及受试者泛素羧基末端水解酶L1(UCH-L1)状态的一种评估方法。这种方法包括以下步骤：a)使所述受试者的生物样品同时或以任意顺序依次与至少一种第一特异性结合成员和至少一种第二特异性结合成员接触，在这里，所述至少一种第一特异性结合成员和至少一种第二特异性结合成员各自特异性地结合UCH-L1，从而产生一种或多种第一复合物，其组成为至少一种第一特异性结合成员-UCH-L1-至少一种第二特异性结合成员，在这里至少一种第一特异性结合成员和至少一种第二特异性结合成员中的至少一种包含一种可检测标记；b)评估一种或多种第一复合物的一种信号，在这里，可检测标记产生的可检测信号的数量指示样品中存在的UCH-L1的数量，因此可使用可检测标记产生的信号数量评估所述受试者的UCH-L1状态，其检测方法(i)可用于测定小于等于25,000pg/mL的UCH-L1水平，并且不需要稀释生物样品；(ii)可用于测定小于等于25,000pg/mL的UCH-L1水平，该检测方法具有5log的动态范围，并且在动态范围内是线性的；或(iii)能够在约5pg/mL至约25,000pg/mL的动态范围内定量测定UCH-L1水平，精度小于约10％CV，且在动态范围内的线性偏差(DL)小于约10％。在一些方面，根据所使用的分析形式和仪器，测定的UCH-L1水平可能高于25,000pg/mL。本公开涉及受试者生物样品中UCH-L1的一种测量方法。本公开还涉及受试者生物样品中UCH-L1的一种测量方法。这种方法包括(a)从所述受试者采集生物样品，(b)使生物样品同时或以任意顺序依次接触：(1)至少一种捕获抗体，其与UCH-L1或UCH-L1片段上的一个表位结合来形成一种至少一个捕获抗体-UCH-L1抗原复合物；(2)至少一种(第一)检测抗体，其包含一种(第一)可检测标记并与UCH-L1上的一个未结合捕获抗体的表位结合来形成一种至少一个捕获抗体-UCH-L1抗原-至少一个检测抗体复合物，从而形成至少一个捕获抗体-UCH-L1抗原-至少一个检测抗体复合物，(c)根据至少一个捕获抗体-UCH-L1抗原-至少一个检测抗体复合物中可检测标记产生的信号测定生物样品中的UCH-L1数量或浓度，其检测方法(i)可用于测定小于等于25,000pg/mL的UCH-L1水平，并且不需要稀释生物样品；(ii)可用于测定小于等于25,000pg/mL的UCH-L1水平，该检测方法具有5log的动态范围，并且在动态范围内是线性的；或(iii)能够在约5pg/mL至约25,000pg/mL的动态范围内定量测定UCH-L1水平，精度小于约10％CV，且在动态范围内的线性偏差(DL)小于约10％。在一些方面，根据所使用的分析形式和仪器，测定的UCH-L1水平可能高于25,000pg/mL。上述方法可以进一步包括评估UCH-L1以及一种或多种其他生物标志物。例如，可以评估受试者的胶质纤维酸性蛋白(GFAP)状态以及受试者的UCH-本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种评估受试者的泛素羧基末端水解酶L1(UCH‑L1)状态的方法，所述方法包括以下步骤：在来自所述受试者的生物样品中检测至少一种生物标志物，其中所述生物标志物中的至少一种是UCH‑L1，并且其中所述方法(i)可用于确定其量小于或等于25,000pg/mL的UCH‑L1水平，(ii)具有5log的动态范围，并且(iii)在所述动态范围内是线性的。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.10.03 US 62/403,293;2017.02.06 US 62/455,2691.一种评估受试者的泛素羧基末端水解酶L1(UCH-L1)状态的方法，所述方法包括以下步骤：在来自所述受试者的生物样品中检测至少一种生物标志物，其中所述生物标志物中的至少一种是UCH-L1，并且其中所述方法(i)可用于确定其量小于或等于25,000pg/mL的UCH-L1水平，(ii)具有5log的动态范围，并且(iii)在所述动态范围内是线性的。2.一种评估受试者的泛素羧基末端水解酶L1(UCH-L1)状态的方法，所述方法包括以下步骤：a)使来自所述受试者的生物样品同时或以任意顺序依次接触至少一种第一特异性结合成员和至少一种第二特异性结合成员，其中所述第一特异性结合成员和所述第二特异性结合成员各自特异性结合UCH-L1，从而产生包含所述第一特异性结合成员-UCH-L1-第二特异性结合成员的一种或多种第一复合物；以及b)检测所述样品中存在的所述一种或多种第一复合物中的UCH-L1，其中所述方法：(i)可用于确定小于或等于25,000pg/mLUCH-L1的水平，并且不需要稀释所述生物样品；或者(ii)可用于确定其量小于或等于25,000pg/mL的UCH-L1水平，并且其中所述方法具有5log的动态范围，并且在所述动态范围内是线性的，或者(iii)能够在约5pg/mL至约25,000pg/mL的动态范围内定量所述UCH-L1水平，其中精确度小于10％CV，并且在所述动态范围内实现线性偏差(DL)小于10％。3.一种评估受试者的泛素羧基末端水解酶L1(UCH-L1)状态的方法，所述方法包括以下步骤：a)使来自所述受试者的生物样品同时或以任意顺序依次接触至少一种第一特异性结合成员和至少一种第二特异性结合成员，其中所述第一特异性结合成员和所述第二特异性结合成员各自特异性结合UCH-L1，从而产生包含所述第一特异性结合成员-UCH-L1-第二特异性结合成员的一种或多种第一复合物，其中所述第一特异性结合成员或第二特异性结合成员包含可检测标记；以及b)评估来自所述一种或多种第一复合物的信号，其中来自所述可检测标记的可检测信号的量指示所述样品中UCH-L1的存在量，其中所述方法：(i)可用于确定小于或等于25,000pg/mLUCH-L1的水平，并且不需要稀释所述生物样品；或者(ii)可用于确定其量小于或等于25,000pg/mL的UCH-L1水平，并且其中所述方法具有5log的动态范围，并且在所述动态范围内是线性的，或者(iii)能够在约5pg/mL至约25,000pg/mL的动态范围内定量所述UCH-L1水平，其中精确度小于10％CV，并且在所述动态范围内实现线性偏差(DL)小于10％。4.一种评估来自受试者的生物样品中UCH-L1的方法，所述方法包括：(a)从所述受试者获得生物样品；(b)使所述生物样品同时或以任意顺序依次接触以下物质：(1)至少一种捕获抗体，其与UCH-L1或UCH-L1片段上的表位结合以形成捕获抗体-UCH-L1抗原复合物；和(2)至少一种检测抗体，其包含一种可检测标记并与UCH-L1上的未被所述捕获抗体结合的表位结合以形成至少一种捕获抗体-UCH-L1抗原-至少一种第一检测抗体复合物，以及(c)根据所述至少一种捕获抗体-UCH-L1抗原-至少一种第一检测抗体复合物中由所述可检测标记产生的信号确定所述生物样品中UCH-L1的量或浓度，其中所述方法：(i)可用于确定其量小于或等于25,000pg/mL的UCH-L1水平，并且其中所述方法具有5log的动态范围，并且在所述动态范围内是线性的；或者(ii)能够在约5pg/mL至约25,000pg/mL的动态范围内定量所述UCH-L1水平，其中精确度小于10％CV，并且在所述动态范围内实现线性偏差(DL)小于10％。5.根据权利要求3所述的方法，其中所述方法进一步包括至少一种第三特异性结合成员，其与未被所述至少一种第一特异性结合成员和所述至少一种第二特异性结合成员结合的表位结合，并且其中所述第一特异性结合成员、第二特异性结合成员和第三特异性结合成员中的至少两种包含可检测标记。6.根据权利要求5所述的方法，其中所述至少一种特异性结合成员、至少一种第二特异性结合成员和至少一种第三特异性结合成员是单特异性抗体。7.根据权利要求4所述的方法，其中所述方法进一步包括至少一种第二检测抗体，其包含可检测标记并且与UCH-L1上未被所述捕获抗体和所述第一检测抗体结合的表位结合。8.根据权利要求7所述的方法，其中所述至少一种捕获抗体、至少一种检测抗体和至少第二检测抗体是单特异性抗体。9.根据权利要求3、5或6所述的方法，其中将任何不包含所述可检测标记的所述第一特异性结合成员和所述第二特异性结合成员固定在实心载体上。10.根据权利要求1-9所述的方法，其中UCH-L1与一种或多种其它生物标志物一起评估。11.根据权利要求1所述的方法，其中UCH-L1与所述受试者的胶质纤维酸性蛋白(GFAP)状态一起评估，所述方法包括以下步骤：检测来自所述受试者的生物样品中的至少两种生物标志物，其中所述生物标志物中的至少两种是GFAP和UCH-L1，并且其中所述方法(i)可用于确定其量小于或等于50,000pg/mL的GFAP水平和其量小于或等于25,000pg/mL的UCH-L1水平，(ii)具有5log的动态范围，并且(iii)在所述动态范围内是线性的12.根据权利要求1、2或11所述的方法，其中通过免疫测定或单分子检测分析检测所述UCH-L1。13.根据权利要求11或12所述的方法，其中通过免疫测定或单分子检测分析检测所述GFAP。14.根据权利要求2所述的方法，其中所述方法进一步涉及评估受试者的GFAP状态，其中所述方法进一步包括以下步骤：a)使所述生物样品同时或依次接触以下物质：(i)至少一种第一GFAP特异性结合成员和至少一种第二GFAP特异性结合成员，其中所述至少一种第一GFAP特异性结合成员和至少一种第二GFAP特异性结合成员各自特异性结合GFAP；从而...

【专利技术属性】
技术研发人员：S·德特维勒，B·麦奎斯顿，G·博利格尔，E·布拉特，J·莱普，D·帕森缇，
申请(专利权)人：雅培实验室，
类型：发明
国别省市：美国,US